不结球白菜的分子标记引物及其应用

本发明属于分子生物学，具体涉及不结球白菜的分子标记引物及其应用。

背景技术：

1、不结球白菜(brassica campestris.ssp.chinensis.makino)在我国蔬菜消费中占有重要地位，其富含对人体有利的维生素c、蛋白质、矿物质、粗纤维等营养物质，其中又以紫色不结球白菜的花青苷含量尤为丰富，观赏性也更高。花青苷是糖基化的多酚类化合物，易溶于水，是蔬菜和水果重要的呈色物质。花青苷能够保护植物抵抗各种生物和非生物胁迫，在人体中还具有抗氧化、抗癌，降低血压和血脂，减缓阿尔兹海默症等功效。因此，设计一种可以快速鉴定紫叶不结球白菜分子标记引物，大大缩短育种进程，进而培育出营养价值更高且观赏性极佳的不结球白菜，对产量和品质具有重要意义。

技术实现思路

1、发明目的：本发明的第一目的是提供了一种不结球白菜紫叶基因；本发明的第二目的是提供一种高效检测紫叶不结球白菜的分子标记引物及其应用；本发明的第三目的是提供一种鉴定不结球白菜紫叶品种的方法。

2、技术方案：本发明所述的不结球白菜紫叶基因，其核苷酸序列如seq id no.1所示。

3、本发明所述的检测上述不结球白菜紫叶基因的分子标记引物。

4、进一步地，所述分子标记引物的核苷酸序列如seq id no.2～3所示。

5、本发明所述的分子标记引物在鉴定不结球白菜紫叶品种中的应用。

6、本发明所述的一种鉴定不结球白菜紫叶品种的方法，包括以下步骤：

7、(1)提取待鉴定样品的基因组dna；

8、(2)将步骤(1)得到的基因组dna作为模板，利用所述的分子标记引物进行pcr扩增；

9、(3)对步骤(2)得到的扩增产物进行聚丙烯酰胺电泳分离，如果分离的产物中含有150bp的片段，则说明待鉴定样品不结球白菜的叶片为紫色。

10、进一步地，步骤(2)中所用的扩增体系为：dna模板、pur54引物、2×primer star、去离子水。

11、进一步地，步骤(2)中所用的扩增体系为：50ng/μl dna模板1μl、10μm pur54引物各0.5μl、2×primer star 5μl、去离子水3μl，总反应体系为10μl。

12、进一步地，步骤(2)中所用的扩增程序为：95℃预变性2min，98℃变性30s，59.8℃退火30s，72℃延伸30s，72℃后延伸10min，35个循环，冷却至4℃保存。

13、本发明所述的紫叶不结球白菜的选育方法，所述的紫叶不结球白菜含有上述的不结球白菜紫叶基因

14、进一步地，在育种过程中采用上述的分子标记引物选择不结球白菜颜色的性状。

15、有益效果：与现有技术相比，本发明具有如下突出的显著优点：本发明的不结球白菜的分子标记引物，可用于高效鉴定不结球白菜紫叶品种，在幼苗期即可完成鉴定，实现苗期叶色选择。操作简单，鉴定成本低，效率高，可加快不结球白菜的育种进程。

技术特征：

1.一种不结球白菜紫叶基因，其特征在于，其核苷酸序列如seq id no.1所示。

2.一种检测权利要求1所述的不结球白菜紫叶基因的分子标记引物。

3.根据权利要求2所述的分子标记引物，其特征在于，所述分子标记引物的核苷酸序列如seq id no.2～3所示。

4.一种权利要求3所述的分子标记引物在鉴定不结球白菜紫叶品种中的应用。

5.一种鉴定不结球白菜紫叶品种的方法，其特征在于，包括以下步骤：

6.根据权利要求5所述的鉴定不结球白菜紫叶品种的方法，其特征在于，步骤(2)中所用的扩增体系为：dna模板、分子标记引物、2×primer star、去离子水。

7.根据权利要求6所述的鉴定不结球白菜紫叶品种的方法，其特征在于，步骤(2)中所用的扩增体系为：50ng/μl dna模板1μl、10μm pur54引物各0.5μl、2×primer star5μl、去离子水3μl，总反应体系为10μl。

8.根据权利要求5所述的鉴定不结球白菜紫叶品种的方法，其特征在于，步骤(2)中所用的扩增程序为：95℃预变性2min，98℃变性30s，59.8℃退火30s，72℃延伸30s，72℃后延伸10min，35个循环，冷却至4℃保存。

9.一种紫叶不结球白菜的选育方法，其特征在于，所述的紫叶不结球白菜含有权利要求1所述的不结球白菜紫叶基因。

10.根据权利要求9所述的选育方法，其特征在于，在育种过程中采用权利要求3所述的分子标记引物选择不结球白菜颜色的性状。

技术总结
本发明公开了一种不结球白菜的分子标记引物及其应用。本发明公开了一种不结球白菜紫叶基因，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明还公开了检测上述不结球白菜紫叶基因的分子标记引物。所述分子标记引物的核苷酸序列如SEQ ID NO.2～3所示。本发明还公开不结球白菜的分子标记引物在鉴定不结球白菜紫叶品种中的应用。本发明的不结球白菜的分子标记引物，可用于高效鉴定不结球白菜紫叶品种，在幼苗期即可完成鉴定，实现苗期叶色选择。操作简单，鉴定成本低，效率高，可加快不结球白菜的育种进程。

技术研发人员：汤伟华,刘叶琼,潘颀,孙朋朋,全张妮,叶彬彬
受保护的技术使用者：江苏农林职业技术学院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13