本发明涉及基因工程,更具体地说是涉及杂交鹅掌楸lhmft2基因及应用。
背景技术:
1、鹅掌楸属(liriodendron l.)隶属于木兰科,为多年生温带落叶树种。该属树种为高大乔木,树干通直,材质优良,花叶俱美,少病虫害、抗污染能力强,具有较高的观赏价值。鹅掌楸属种间杂交后代—杂交鹅掌楸(l.chinense sarg.×l tulipifera l.)则具有明显的杂种优势,与亲本相比具有更强的速生性和抗逆性,山地大面积造林胸径年生长量可达2.0cm以上,是良好的材用树种和碳汇树种,具有极强的开发利用前景。因此,鹅掌楸属树种尤其是其种间杂种乃极少数集较好速生性、优质性、适应性等优良性状于一身的树种之一,数十年的栽培试验证实了其多方面明显的杂种优势。
2、磷脂酰乙醇胺结合蛋白(pebp)广泛存在于动物、植物和微生物中。植物pebp基因,充当各种信号通路的调节剂来控制生长和分化,参与开花转换和营养生长。该家族分有三个主要分支:ft-like,tfl-like和mft-lik基因。其中,ft-like和tfl-like研究较为透彻,相关基因主要参与植物的开花和物候调节。mft亚家族是ft和tfl1亚家族的祖先基因,与ft和tfl相比,mft的功能研究还不够确切。
3、因此,如何克隆出一种mft家族的基因,并对其功能进行研究和应用是本领域技术人员亟需解决的技术问题。
技术实现思路
1、有鉴于此,本发明提供了一种杂交鹅掌楸lhmft2基因及应用。
2、为了实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
3、一种杂交鹅掌楸lhmft2基因,所述基因的cds核苷酸序列如seq id no.1所示。
4、一种杂交鹅掌楸lhmft2蛋白,由seq id no.1所示核苷酸序列编码而成,蛋白序列如seq id no.2所示。
5、权利要求1所述的lhmft2基因在延长观赏植物童期、推迟植物花期、提高观赏植物花序数量和荚果数量、提高作物产量中的应用。
6、一种扩增所述lhmft2基因的引物,所述引物序列如seq id no.3~seq id no.4所示;
7、上游引物lhmft2-f1:5’-atggctcgctctgtggagcctttgg-3’,如seq id no.3所示;
8、下游引物lhmft2-r1:5’-atggcaaccggcaattgc-3’,如seq id no.4所示。
9、一种植物表达载体pbwa(v)bs:lhmft2,所述植物表达载体由pbwa(v)bs载体和lhmft2基因连接而成。
10、一种植物表达载体pbwa(v)bs:lhmft2的构建方法,过程包括:先合成:lhmft2基因的cdna序列,然后扩增编码区序列,得目标序列;最后将目标序列与pbwa(v)bs载体连接,得植物表达载体。
11、优选地,以seq id no.3~seq id no.4所示的引物扩增编码区序列。
12、所述的lhmft2基因在制备转基因微生物中的应用,所述微生物包括农杆菌。
13、所述的lhmft2基因在植物育种中的应用。
14、优选地,所述植物育种包括选育开花数量多的观赏植物品种、抗倒伏能力强和产量高的植物品种。
15、经由上述的技术方案可知,与现有技术相比,本发明通过挖掘鹅掌楸基因组数据库中的pebp基因家族序列lch25487。利用基因同源性,设计引物,成功的在具有杂种优势的杂交鹅掌楸中克隆出了同源基因,通过结构域和数据库比对,证实为pebp基因家族的mft基因,命名为lhmft2。通过对克隆到的lhmft2基因构建过表达载体,转化拟南芥,多代种植,获得t2代种子;将转基因拟南芥t2代种植和野生型拟南芥在适宜条件下共同培养,表型观察发现转基因植株,花期均有不同程度的推迟,花序变粗变长,且不易倒伏。因此,杂交鹅掌楸lhmft2基因可以延长拟南芥植株的童期,提高产量且抗倒伏,在分子育种中具有重要应用价值。
1.一种杂交鹅掌楸lhmft2基因,其特征在于,所述基因的cds核苷酸序列如seq idno.1所示。
2.一种杂交鹅掌楸lhmft2蛋白,其特征在于,由seq id no.1所示核苷酸序列编码而成,蛋白序列如seq id no.2所示。
3.权利要求1所述的lhmft2基因在延长观赏植物童期、推迟植物花期、提高观赏植物花序数量和荚果数量、提高作物产量中的应用。
4.一种扩增所述lhmft2基因的引物,其特征在于,所述引物序列如seq id no.3~seqid no.4所示;
5.一种植物表达载体pbwa(v)bs:lhmft2,其特征在于,所述植物表达载体由pbwa(v)bs载体和lhmft2基因连接而成。
6.一种植物表达载体pbwa(v)bs:lhmft2的构建方法,其特征在于,过程包括:先合成:lhmft2基因的cdna序列,然后扩增编码区序列,得目标序列;最后将目标序列与pbwa(v)bs载体连接,得植物表达载体。
7.根据权利要求6所述的一种植物表达载体pbwa(v)bs:lhmft2的构建方法,其特征在于,以seq id no.3~seq id no.4所示的引物扩增编码区序列。
8.权利要求1所述的lhmft2基因在制备转基因微生物中的应用,所述微生物包括农杆菌。
9.权利要求1所述的lhmft2基因在植物育种中的应用。
10.根据权利要求9所述的应用,其特征在于,所述植物育种包括选育开花数量多的观赏植物品种、抗倒伏能力强和产量高的植物品种。