一种降低秀丽线虫aβ沉积的刺五加药渣多糖及其制备方法和应用

本发明涉及多糖提取，具体的说涉及一种降低秀丽线虫aβ沉积的刺五加药渣多糖及其制备方法和应用。

背景技术：

1、阿尔兹海默症(alzheimer's disease，ad)是一种严重威胁老年人生命健康的中枢神经退行性疾病，发病隐匿，诊断困难，致病致死率高。β淀粉样蛋白沉积和神经纤维缠结是ad最主要的病理学特征，但其发病机制复杂，许多方面仍有待深入研究。目前，临床上用于治疗ad的药物主要包括胆碱酯酶抑制剂和nmda(n-methyl-d-aspartic acid receptor)受体阻断剂，能在一定程度上阻断ad的进程，但需要长期服药，并且具有恶心、呕吐、腹泻等不良反应。因此，探寻安全有效的防治ad的药物具有重要意义。传统中医将ad归“痴呆”“健忘”“呆病”一属，其病位在脑，但与心肝脾肾功能失调密切相关，是由肾精不足，脑髓空虚而引起的神志病。因此，中医常选用具有补肾益精功能的中药材治疗痴呆。

2、刺五加为五加科植物刺五加acanthopanaxsenticosus(rupr.etmaxim.)harms的干燥根和根茎或茎，其味辛、微苦、性温，归脾、肾、心经，具有益气健脾、补肾安神的功效，常用于治疗脾肺气虚、肺肾两虚、心脾不足等症状，发展前景广阔。工业生产中常采用75％乙醇提取刺五加苷，而多糖等其他大分子有效成分仍留在废渣、废液中，未得到有效利用。多糖是刺五加药渣中的主要活性成分之一，具有保护中枢神经系统、抗衰老、增强机体免疫力等多种药理活性。目前，传统的刺五加多糖的提取方法多以刺五加药材为原料，采用水提醇沉法进行提取，具有耗时长、溶剂消耗量大、提取率低、资源浪费等缺点。

3、动态高压微射流技术是一种新型预处理破壁、高压均质技术，通过瞬时高速碰撞、强烈剪切、瞬间压力释放等作用使植物细胞壁破裂，促进有效成分溶出，提高传质速率，进而提高提取率，已被广泛应用于植物活性多糖的提取领域。表面活性剂是一种新型溶剂，具有绿色安全、易降解、无毒副作用等优点，在天然活性物质提取方面具有巨大潜力。但是，将动态高压微射流协同表面活性剂的方法应用于刺五加药渣多糖的提取未见报道。

4、因此，如何促进刺五加资源最大化利用，提供一种提取率及纯度高，又同时降低秀丽线虫aβ沉积的刺五加药渣多糖及其制备方法是本领域技术人员亟待解决的技术难题。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明提供了一种降低秀丽线虫aβ沉积的刺五加药渣多糖及其制备方法和应用。

2、为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

3、一种降低秀丽线虫aβ沉积的刺五加药渣多糖的制备方法，包括以下步骤：

4、(1)取刺五加药渣将其烘干后粉碎，然后加入水，搅拌均匀后，进行动态高压微射流均质处理；

5、(2)取处理后的料液，加入表面活性剂进行超声提取，得到多糖提取液；

6、(3)将所得多糖提取液进行离心后取上清液，减压浓缩，得到浓缩液；

7、(4)向所述浓缩液中加入无水乙醇进行醇沉；

8、(5)将醇溶液离心，取沉淀复溶，减压浓缩，冷冻干燥，得刺五加药渣多糖apsp-50；

9、(6)将刺五加药渣多糖asps-50经deae-650m填料分离纯化得asps-50-ⅰ、asps-50-ⅱ和asps-50-ⅲ。

10、进一步，步骤(1)中所述烘干温度为45～50℃，烘干时间2～2.5h；

11、所述粉碎粒度为90～110目；

12、更进一步，步骤(1)中所述刺五加药渣与水的质量比为1:20～40；

13、所述搅拌转速为300～500r/min，搅拌时间3-5min；

14、所述微射流均质压力为120～160mpa，时间60～90s，微射流均质处理2～3次。

15、进一步，步骤(2)中所述表面活性剂类型为十二烷基磺酸钠；

16、所述表面活性剂用量为处理后的料液质量的2～3％；

17、更进一步，步骤(2)中所述超声提取功率为500～700w，提取温度为60～90℃，提取时间30～50min。

18、进一步，步骤(3)中所述离心转速为4500～5000r·min-1，离心时间为10～15min。

19、进一步，步骤(4)中所述醇沉温度为4℃，醇沉时间为48h；

20、所述无水乙醇的加入量为加入无水乙醇后溶液中乙醇体积浓度为50％。

21、进一步步骤(3)和步骤(5)中所述超声减压均为在压力12kpa，温度50℃，转速30r/min下进行。

22、进一步步骤(5)中所述冷冻干燥为在压力13pa，温度-40℃下冷冻干燥24h。

23、进一步，步骤(5)中所述离心转速为4500～5000r·min-1，离心时间为10～15min。

24、本发明还提供了一种降低秀丽线虫aβ沉积的刺五加药渣多糖，其采用上述方法制备得到。

25、本发明的有益效果在于：本发明首次以刺五加药渣为原料，对其化学成分和药理作用进行深入研究。本发明提供的刺五加药渣多糖首次采用动态高压微射流协同表面活性剂进行提取，该方法具有操作方便、省时高效和无污染等优点，而且本发明刺五加药渣多糖具有降低秀丽线虫aβ沉积的作用。

26、本发明采用刺五加药渣为原料，对刺五加药渣中的活性成分进行资源回收和二次利用，促进刺五加产业的可持续发展。本发明公开的制备方法具有操作方便、省时高效和无污染等优点。本发明制备的刺五加药渣多糖具有降低秀丽线虫aβ沉积的功效。

27、本发明还提供了上述刺五加药渣多糖在在降低秀丽线虫aβ沉积中的应用。本发明采用秀丽线虫aβ模型——cl4176转基因线虫株，应用本发明制备的asps-50给药，结果表明，本发明的asps-50能够抗线虫瘫痪、延长线虫寿命、减轻热应激损伤，提高线虫运动能力而刺五加药渣多糖在此方面相关报道较少，说明刺五加药渣多糖在降低秀丽线虫aβ沉积方面具有明显前景。

28、本发明中采用的cl4176转基因线虫株购买自cgc(caenorhabditis geneticscenter)，本发明中的内容不涉及生物保藏内容。

技术特征：

1.一种降低秀丽线虫aβ沉积的刺五加药渣多糖的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述一种降低秀丽线虫aβ沉积的刺五加药渣多糖的制备方法，其特征在于，步骤(1)中所述烘干温度为45～50℃，烘干时间2～2.5h；

3.根据权利要求1所述一种降低秀丽线虫aβ沉积的刺五加药渣多糖的制备方法，其特征在于，步骤(2)中所述表面活性剂类型为十二烷基磺酸钠；

4.根据权利要求1所述一种降低秀丽线虫aβ沉积的刺五加药渣多糖的制备方法，其特征在于，步骤(3)中所述离心转速为4500～5000r·min-1，离心时间为10～15min。

5.根据权利要求1所述一种降低秀丽线虫aβ沉积的刺五加药渣多糖的制备方法，其特征在于，步骤(4)中所述醇沉温度为4℃，醇沉时间为48h。

6.根据权利要求1所述一种降低秀丽线虫aβ沉积的刺五加药渣多糖的制备方法，其特征在于，步骤(5)中所述离心转速为4500～5000r·min-1，离心时间为10～15min。

7.根据权利要求1所述一种降低秀丽线虫aβ沉积的刺五加药渣多糖的制备方法，其特征在于，步骤(3)和步骤(5)中所述超声减压均为在压力12kpa，温度50℃，转速30r/min下进行。

8.根据权利要求1所述一种降低秀丽线虫aβ沉积的刺五加药渣多糖的制备方法，其特征在于，步骤(5)中所述冷冻干燥为在压力13pa，温度-40℃下冷冻干燥24h。

9.一种降低秀丽线虫aβ沉积的刺五加药渣多糖，其特征在于，由权利要求1-8任一项所述方法制备得到。

10.一种如权利要求9所述刺五加药渣多糖在在降低秀丽线虫aβ沉积中的应用。

技术总结
本发明公开了一种降低秀丽线虫aβ沉积的刺五加药渣多糖的制备方法，步骤为取刺五加苷提取工艺中产生的废弃物为原料，烘干粉碎，加入水搅拌均匀，进行动态高压微射流均质处理，处理后的料液加入表面活性剂超声提取，所得多糖提取液，离心取上清液，减压浓缩上清液，醇沉得刺五加药渣多糖。本发明采用刺五加药渣为原料，对刺五加药渣中的活性成分进行资源回收和二次利用，促进刺五加产业的可持续发展。本发明公开的制备方法具有操作方便、省时高效和无污染等优点。本发明制备的刺五加药渣多糖具有降低秀丽线虫Aβ沉积的功效。

技术研发人员：赵宏,王艳艳,汤威威,高琪,邵梦婷
受保护的技术使用者：佳木斯大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14