RNF106在食管鳞癌检测、治疗和预后靶点及应用

本发明涉及生药医药和分子生物学，特别涉及rnf106在食管鳞癌检测、治疗和预后靶点及应用。

背景技术：

1、尽管食管鳞癌在诊断、治疗及发病机制等方面的研究取得诸多进展，但其5年生存率一直低于30％，且其发病率及病死率仍有逐年升高的趋势。病理进展迅速及治疗手段有限一直是食管鳞癌困扰临床多年的医学难题，因此全面深入地了解食管鳞癌的发生发展机制，寻找精准有效的诊断及治疗方法，对改善预后、提高患者生活质量具有重要意义。

2、hippo信号通路由丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶的复杂级联反应组成，当感受到胞外环境的生长抑制信号后，经过一系列激酶磷酸化反应，作用于下游效应因子yap和taz，参与细胞增殖、凋亡、控制器官大小以及肿瘤发生等生物功能。新近的基因组测序和分子研究表明，hippo信号通路和食管鳞癌之间可能存在联系：hippo信号通路抑制因子或hippo中关键因子yap的基因组扩增突变在食管鳞癌样本中普遍存在。这提示hippo通路的过度激活可能在食管鳞癌的癌变过程中起重要作用。因此，揭示hippo信号通路激活的分子机制对食管鳞癌治疗具有重要意义。

3、泛素样含phd和环指域蛋白1(ubiquitin-like with phd and ring fingerdomains 1)又称为rnf106，是新发现的与细胞生长有关的核蛋白基因，参与细胞增殖、周期调控、凋亡等重要的生物学过程。rnf106由泛素样结构域(ubl)、串联tudor结构域(ttd)、set and ring associated结构域(sra)和ring结构域组成。rnf106蛋白可与细胞dna甲基转移酶1(dnmt1)结合，维持dna的低甲基化状态。rnf106还能调节组蛋白的泛素化和染色质结构。除了调控基因组的功能外，最近的研究还表明，rnf106还可能参与多种细胞信号通路如p53信号等的修饰。

技术实现思路

1、本发明为了弥补现有技术的不足，提供了rnf106在食管鳞癌检测、治疗和预后靶点及应用。本发明首次发现rnf106的表达与食管鳞癌及hippo信号通路紧密相关，同时研究证实rnf106可以通过调控hippo/lats1/2/yap信号通路促进食管鳞癌的发生发展。因此，rnf106作为食管鳞癌的预测诊断标志物和潜在治疗靶点。基于上述研究成果，从而完成本发明。

2、具体的，本发明涉及以下技术方案：

3、本发明的第一个方面，提供rnf106作为标志物在制备食管鳞癌诊断或辅助诊断产品中的应用。

4、本发明通过生物信息分析发现，rnf106在食管鳞癌组织中表达量明显高于正常食管组织，且pcr及western blot在食管鳞癌细胞系的实验结果也证实了这一现象，因此rnf106可作为食管鳞癌的诊断标志物。

5、本发明的第二个方面，提供一种产品，所述产品包含上述用于检测rnf106的物质，所述产品用于诊断或辅助诊断食管鳞癌。

6、其中，检测rnf106的物质包括但不限于用于rt-pcr、western blot、实时定量pcr、免疫组化、基因芯片和基因测序检测rnf106的表达水平的物质。

7、所述产品包括但不限于检测待测样本中所述rnf106表达水平的引物、探针、芯片、核酸膜条、制剂、试剂盒或生物传感器。

8、所述待测样本可为人源样本，更具体的，所述待测样本包括受试者食管鳞癌细胞和/或食管鳞癌组织。

9、本发明的第三个方面，提供一种用于诊断或辅助诊断食管鳞癌的系统，所述系统包括：

10、i)分析单元，所述分析单元包含：用于确定受试者的待测样品中选自上述rnf106表达水平的检测物质；

11、ii)评估单元，所述评估单元包含：根据i)中确定的所述rnf106表达水平判断所述受试者是否患有食管鳞癌；

12、所述步骤ii)评估单元具体评估流程包括：

13、与参照相比，所述受试者的待测样品中的rnf106表达水平上调，则所述受试者为或候选为食管鳞癌患者；反之，则所述受试者不为或不候选为食管鳞癌患者。

14、本发明的第四个方面，提供一种诊断或辅助诊断食管鳞癌的方法，所述方法包括：

15、a)从受试者分离待测样品；

16、b)在所述受试者的待测样品中检测上述rnf106表达水平，以及；

17、c)将样品中的表达水平与参照中的表达水平进行比较；

18、其中，与参照中的水平相比，样品中表达水平的上调，则所述受试者为或候选为食管鳞癌患者；反之，则所述受试者不为或不候选为食管鳞癌患者。

19、本发明的第五个方面，提供所述rnf106作为靶点在食管鳞癌治疗和/或筛选食管鳞癌药物中的应用。

20、本发明的第六个方面，提供抑制所述rnf106的表达水平的方法在制备产品中的应用；

21、所述产品的功能为如下任意一种或多种：

22、(a1)抑制食管鳞癌细胞增殖；

23、(a2)抑制食管鳞癌细胞的侵袭和/或迁移；

24、(a3)延长食管鳞癌细胞g0/g1周期；

25、(a4)抑制hippo/lats1/2/yap信号通路；

26、(a5)抑制食管鳞癌生长；

27、(a6)预防和/或治疗食管鳞癌。

28、本发明的第七个方面，提供一种产品，其活性成分包括抑制所述lncrna的表达水平的物质；所述产品的功能为如下任意一种或多种：

29、(a1)抑制食管鳞癌细胞增殖；

30、(a2)抑制食管鳞癌细胞的侵袭和/或迁移；

31、(a3)延长食管鳞癌细胞g0/g1周期；

32、(a4)抑制hippo/lats1/2/yap信号通路；

33、(a5)抑制食管鳞癌生长；

34、(a6)预防和/或治疗食管鳞癌。

35、上述第六至第七方面中的产品可以为药物或试验试剂，所述试验试剂可供基础研究使用。

36、本发明的第八个方面，提供一种治疗食管鳞癌的方法，所述方法包括：向受试者施用上述抑制所述rnf106的表达水平的物质。

37、与现有技术相比，本发明的有益技术效果：

38、本发明首次发现rnf106的表达量与食管鳞癌及hippo信号通路紧密相关，进一步研究证实了rnf106与食管鳞癌中肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移机制相关，并且阐明了rnf106通过直接集合并泛素化降解lats1/2，促进yap因子入核，从而转录调控相关因子，提供了完整的通路研究。最后，本发明通过对rnf106的敲除证实了敲除rnf106对食管鳞癌的治疗切实有效，有望开发为新型的治疗药物，弥补目前药物选择的不足。

39、综上，rnf106作为食管鳞癌的预测诊断标志物和潜在治疗靶点，从而在食管鳞癌的诊断、治疗中发挥重要作用，因此具有良好的实际应用之价值。

技术特征：

1.rnf106作为标志物在制备食管鳞癌诊断或辅助诊断产品中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括但不限于检测待测样本中rnf106表达水平的引物、探针、芯片、核酸膜条、制剂、试剂盒或生物传感器。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品能够通过检测样本中rnf106的表达水平来诊断食管鳞癌，rnf106在食管鳞癌组织中表达量上调。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述产品包括通过基于免疫组化方法、基于定量pcr方法、基于western blot方法检测样品中rnf106表达的物质以诊断食管鳞癌的产品。

5.一种用于诊断或辅助诊断食管鳞癌的系统，其特征在于，所述系统包括：

6.rnf106作为靶点在食管鳞癌治疗、筛选食管鳞癌药物中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述药物包括rnf106和/或其表达产物的抑制剂。

技术总结
本发明提供RNF106在食管鳞癌检测、治疗和预后靶点及应用，属于生药医药和分子生物学技术领域。本发明通过研究分析发现RNF106在食管鳞癌组织中表达量明显高于正常脑组织。同时本发明利用CO‑IP技术检测与RNF106结合的蛋白质，发现RNF106可与LATS2结合，并促进LATS2 k48相关的泛素化和降解，从而抑制YAP磷酸化，促进YAP在ESCC中的致癌功能，进而影响食管鳞癌的发生发展。本发明最终证实RNF106可通过LATS2‑Hippo‑YAP通路促进食管鳞癌的发生发展，并有望成为食管鳞癌诊断及治疗中的新靶点。

技术研发人员：武静,周海燕,张业慧,李瑞杰,梁倩,李岩,李欣,张建明,齐洪昊
受保护的技术使用者：山东第一医科大学第一附属医院（山东省千佛山医院）
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15