一种萎缩芽孢杆菌WLKYSY-4、生物菌剂及应用的制作方法

本发明属于微生物学、生物技术和生物防治，具体涉及一种萎缩芽孢杆菌wlkysy-4、生物菌剂及应用。

背景技术：

1、芽孢杆菌是一类好氧或兼性厌氧，可产生芽孢的革兰氏阳性菌。芽孢杆菌最突出的特点是可在恶劣的环境中产生抗逆性强的芽孢以度过不良的环境条件，且在自然界中普遍存在、对人畜无害、对植物无致病性，并且大多数芽孢杆菌还能够对一些植物病原菌生长有抑制作用。因此，芽孢杆菌成为目前世界上研究最深入，应用最广泛的植物生防细菌之一。

2、目前，植物病害的防治仍以化学防治为主，长期使用化学农药不仅使植物病原菌产生抗药性，同时造成农药的残留，杀伤天敌，污染环境，威胁人类健康，破坏生态平衡。利用拮抗微生物防治植物病害对人畜无毒，不污染环境，无残留，能保持农产优良品质，对害虫天敌和有益生物安全，有助于保持生态平衡等优点。

3、但是生防微生物与土壤环境中的微生物群落之间往往存在相互作用，外源拮抗微生物的引入可以引起作物根际土壤微生物群落的组成发生变化，因此生防菌剂的使用有很大的地域适应性。目前国内外的一些商品化生防菌制剂由于上述原因在防治本地农作物上的一些土传病害时，效果并不理想，这就迫切需要立足本地特有的微生物资源，筛选出一些适合本土土壤和气候条件的生防菌用于作物病害的防治，这不论在技术发明上还是在实际应用方面都有重大意义。从民勤青土湖肉苁蓉种植区土壤中分离筛选获得的对多种病原菌有拮抗作用的生防菌株，对于植物病害的防治具有非常重要的意义。

技术实现思路

1、为解决上述问题，本发明的目的是提供一株广谱抗病萎缩芽孢杆菌wlkysy-4、生物菌剂及其应用，特别涉及该菌在植物病害生物防治方面的应用。

2、为实现上述目的，本发明是通过以下技术方案来实现的：

3、一种萎缩芽孢杆菌wlkysy-4，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：cgmcc no.26815，分类命名：萎缩芽孢杆菌bacillus atrophaeus，保藏日期：2023年3月14日，保藏地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

4、一种生物菌剂，其含有如上所述的萎缩芽孢杆菌wlkysy-4。

5、如上所述的生物菌剂，其由所述萎缩芽孢杆菌wlkysy-4经发酵而成。

6、如上所述的生物菌剂的制备方法，包括以下步骤：将所述萎缩芽孢杆菌wlkysy-4首先接种于lb固体培养基活化，然后将活化后的萎缩芽孢杆菌wlkysy-4接种于lb液体培养基发酵培养，制成种子液，所述种子液再接种于lb液体培养基中发酵培养，得到生物菌剂。

7、优选的，所述培养温度为26～30℃；所述种子液接种量为4～6％，所述种子液发酵培养时间为2～4d。

8、如上所述的萎缩芽孢杆菌wlkysy-4或如上所述的生物菌剂在抗病原菌、或由病原菌所导致的相关疾病和植物病害中的应用。

9、优选的，所述病原菌为肉苁蓉茎腐病菌、葡萄灰霉病菌和枸杞叶枯病菌中的至少一种；所述植物病害为肉苁蓉茎腐病、葡萄灰霉病和枸杞叶枯病中的至少一种。

10、优选的，所述肉苁蓉茎腐病菌为尖孢镰刀菌、层出镰刀菌和锐顶镰刀菌中的至少一种；所述葡萄灰霉病菌为灰葡萄孢霉菌；所述枸杞叶枯病菌为链格孢属。

11、如上所述的应用方法，将包含所述萎缩芽孢杆菌wlkysy-4的生物菌剂，对植物进行灌根或喷洒。

12、优选的，所述生物菌剂稀释至其中的萎缩芽孢杆菌wlkysy-4有效活菌数为1.0×106～1.0×108cfu/ml后使用。

13、本申请提供的萎缩芽孢杆菌wlkysy-4对多种植物病害无论是预防防治还是治疗防治都有较好的防治效果，在生物农药方面具有非常好的应用前景。

技术特征：

1.一种萎缩芽孢杆菌wlkysy-4，其特征在于，其保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：cgmccno.26815。

2.一种生物菌剂，其特征在于，其含有如权利要求1所述的萎缩芽孢杆菌wlkysy-4。

3.如权利要求2所述的生物菌剂，其特征在于，其由所述萎缩芽孢杆菌wlkysy-4经发酵而成。

4.如权利要求2～3所述的生物菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：将所述萎缩芽孢杆菌wlkysy-4首先接种于lb固体培养基活化，然后将活化后的萎缩芽孢杆菌wlkysy-4接种于lb液体培养基发酵培养，制成种子液，所述种子液再接种于lb液体培养基中发酵培养，得到生物菌剂。

5.如权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述培养温度为26～30℃；所述种子液接种量为4～6％，所述种子液发酵培养时间为2～4d。

6.如权利要求1所述的萎缩芽孢杆菌wlkysy-4或如权利要求2～3任一项所述的生物菌剂在抗病原菌、或由病原菌所导致的相关疾病和植物病害中的应用。

7.如权利要求6所述的应用，其特征在于，所述病原菌为肉苁蓉茎腐病菌、葡萄灰霉病菌和枸杞叶枯病菌中的至少一种；所述植物病害为肉苁蓉茎腐病、葡萄灰霉病和枸杞叶枯病中的至少一种。

8.如权利要求7所述的应用，其特征在于，所述肉苁蓉茎腐病菌为尖孢镰刀菌、层出镰刀菌和锐顶镰刀菌中的至少一种；所述葡萄灰霉病菌为灰葡萄孢霉菌；所述枸杞叶枯病菌为链格孢属。

9.如权利要求6～8任一项所述的应用方法，其特征在于，将包含所述萎缩芽孢杆菌wlkysy-4的生物菌剂，对植物进行灌根或喷洒。

10.如权利要求9所述的应用方法，其特征在于，所述生物菌剂稀释至其中的萎缩芽孢杆菌wlkysy-4有效活菌数为1.0×106～1.0×108cfu/ml后使用。

技术总结
本发明公开了一种萎缩芽孢杆菌WLKYSY‑4、生物菌剂及其应用，该萎缩芽孢杆菌WLKYSY‑4，保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为：CGMCC No.26815。本申请提供的萎缩芽孢杆菌WLKYSY‑4对多种植物病害无论是预防防治还是治疗防治都有较好的防治效果，在生物农药方面具有非常好的应用前景。

技术研发人员：李强,刘伟,何彩,胡芳,叶芳,陈岩辉,晋敏,金娜,张军,赵连鑫,牟德生,张勤德,段爱莉,郭艳兰,张涛,王鑫,李栋,杨作奎,韩登山,董存元,史星雲,姚元文,王曼,俞志琴,李长江
受保护的技术使用者：武威市林业科学研究院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/14