用于抑制syn2a的多核苷酸、含有其的外泌体及其用途的制作方法

本发明涉及生物医药领域，特别涉及用于抑制syn2a的多核苷酸、含有其的外泌体及其用途。

背景技术：

1、创伤后应激障碍(ptsd)是一种精神类疾病，主要由于个体受到强烈的创伤而引发，并且症状可以持续数月或数十年。而且，ptsd往往与其他精神疾病，比如抑郁、自杀想法并存。因此，ptsd的治疗显得更加迫切。然而，目前临床上最常用的方法是在心理学家或精神科医生的指导下的暴露疗法，而这个过程是低效的，它可能需要长久的治疗过程来克服这段痛苦的记忆。当然，目前还有一些药物疗法，比如抗抑郁药，如ssri药物氟西汀(百忧解)(fluoxetine(prozac)和帕罗西汀(赛乐特)(paroxetine(paxil)，在治疗ptsd的一些症状中是有效的，但此类药物有潜在的心理依赖和成瘾性。因此，开发新的安全的治疗创伤后应激障碍的药物至关重要。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种用于抑制syn2a的多核苷酸。

2、本发明的另一目的在于提供一种外泌体。

3、本发明的另一目的在于提供一种药物组合物。

4、本发明的另一目的在于提供一种预防、治疗和/或辅助治疗创伤后应激障碍的方法。

5、为解决上述技术问题，本发明第一方面，提供了一种分离的多核苷酸，所述多核苷酸选自下述任一种：

6、(i)如seq id no:1所示的多核苷酸；

7、(ii)与seq id no:1所示序列相比，同源性大于80％的的多核苷酸；和

8、(iii)由seq id no:1所示序列经过一个或几个核苷酸的取代、缺失或添加而形成的多核苷酸。

9、本发明的第二方面，提供了一种含有本发明第一方面所述多核苷酸的小核酸分子，所述小核酸分子为sirna、sirna前体、dsrna、shrna、mirna或小干扰rna。

10、本发明的第三方面，提供了一种含有本发明第一方面所述多核苷酸或含有本发明第二方面所述小核酸分子的外泌体。

11、本发明的第四方面，提供了一种药物组合物，包括：本发明第一方面所述的多核苷酸/本发明第二方面所述的小核酸分子/本发明第三方面所述的外泌体，和药学上可接受的载体。

12、本发明的第五方面，提供了一种预防、治疗和/或辅助治疗创伤后应激障碍的方法，所述方法包括步骤：向受试对象施加治疗有效量的本发明第一方面所述的多核苷酸，或者向受试对象施加治疗有效量的本发明第二方面所述的小核酸分子，或者向受试对象施加治疗有效量的本发明第三方面所述的外泌体，向受试对象施加治疗有效量的本发明第四方面所述的药物组合物。

13、在一些优选的方案中，所述施用的方式为静脉注射。

14、本发明的第六方面，提供了本发明第一方面所述的多核苷酸的用途，用于：

15、(i)预防、治疗和/或辅助治疗创伤后应激障碍；

16、(ii)制备用于预防、治疗和/或辅助治疗创伤后应激障碍的药物；

17、(iii)体外非治疗性地降低syn2a基因或其编码蛋白的表达水平；和/或

18、(iv)用作syn2a抑制剂。

19、本发明的第七方面，提供了本发明第二方面所述的小核酸分子的用途，用于：

20、(i)预防、治疗和/或辅助治疗创伤后应激障碍；

21、(ii)制备用于预防、治疗和/或辅助治疗创伤后应激障碍的药物；

22、(iii)体外非治疗性地降低syn2a基因或其编码蛋白的表达水平；和/或

23、(iv)用作syn2a抑制剂。

24、本发明的第八方面，提供了本发明第三方面所述的外泌体的用途，用于：

25、(i)预防、治疗和/或辅助治疗创伤后应激障碍；

26、(ii)制备用于预防、治疗和/或辅助治疗创伤后应激障碍的药物；

27、(iii)体外非治疗性地降低syn2a基因或其编码蛋白的表达水平；和/或

28、(iv)用作syn2a抑制剂。

29、本发明的第九方面，提供了一种含有本发明第一方面所述多核苷酸的外泌体的制备方法，所述方法包括步骤：

30、获取原始的外泌体，然后将本发明第一方面所述的多核苷酸导入所述原始的外泌体中，即得含有本发明第三方面所述多核苷酸的外泌体。

31、在一些优选的方案中，通过电转导法或者化学转导法将本发明第一方面所述的多核苷酸导入所述原始的外泌体中。

32、在一些优选的方案中，所述原始的外泌体通过使ecs试剂处理细胞获得。

33、本发明相对于现有技术而言，至少具有下述优点：

34、(1)本发明提供了一种syn2a sirna序列，其可作为syn2a抑制剂用于预防/治疗/辅助治疗创伤后应激障碍(ptsd)；

35、(2)本发明还提供了一种装载有syn2a sirna序列的外泌体，它能够高效、组织特异性的递送syn2a sirna序列至靶基因，抑制靶基因或其编码蛋白的表达，在小鼠动物模型中，尾静脉注射外泌体包裹的syn2a sirna，能够显著降低普通c57小鼠以及恐惧记忆难消退模型鼠的平均僵直率，因此，该外泌体药物是治疗性的，能够有效地预防和/或治疗和/或辅助治疗ptsd。

36、应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。限于篇幅，在此不再一一累述。

技术特征：

1.一种分离的多核苷酸，其特征在于，所述多核苷酸用作syn2a抑制剂，所述多核苷酸选自下述任一种：

2.一种含有权利要求1所述的多核苷酸的小核酸分子，所述小核酸分子为sirna、sirna前体、dsrna、shrna、mirna或小干扰rna。

3.一种含有权利要求1所述的多核苷酸或权利要求2所述小核酸分子的外泌体。

4.一种药物组合物，其特征在于，所述药物组合物包括：权利要求1所述的多核苷酸或权利要求2所述的小核酸分子，和药学上可接受的载体。

5.一种预防、治疗和/或辅助治疗创伤后应激障碍的方法，其特征在于，所述方法包括步骤：向受试对象施加治疗有效量的如权利要求1所述的多核苷酸；或者

6.如权利要求1所述的多核苷酸的用途，用于：

7.如权利要求2所述的小核酸分子的用途，用于：

8.如权利要求3所述的外泌体的用途，用于：

9.如权利要求3所述的外泌体的制备方法，其特征在于，所述方法包括步骤：

10.根据权利要求8所述的方法，其特征在于，所述原始的外泌体通过使ecs试剂处理细胞获得。

技术总结
本申请公开了一种用于抑制syn2a的多核苷酸、含有其的外泌体及其用途。本申请中提供了一种syn2a siRNA序列，其可作为syn2a抑制剂用于预防/治疗/辅助治疗创伤后应激障碍(PTSD)；本申请中还提供了一种装载有syn2a siRNA序列的外泌体，它能够高效、组织特异性的递送syn2a siRNA序列至靶基因，抑制靶基因或其编码蛋白的表达，对恐惧记忆难消退模型鼠治疗效果显著，可显著降低其平均僵直率。

技术研发人员：朱铃强,刘丹,沈细亚,高博
受保护的技术使用者：苏州志恒生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15