一种发酵翅果油种子的微生物及其降血脂组合物的制作方法

本发明属于功能多肽制备，具体涉及一种发酵翅果油树种子的微生物及其发酵多肽的应用，进一步包括应用微生物发酵制备翅果油多肽及辅助降血脂组合物。

背景技术：

1、近年来，随着我国经济的高速发展，人们的生活水平的不断提高，居民的饮食结构由低脂的植物性食物为主逐渐转变为高脂的动物性食物为主，使得高脂肪含量食物的摄入大大增加。但随之而来的就是脂肪摄入过多，多余的脂肪在体内堆积，从而诱发肥胖、高脂血症、胰岛素抵抗、动脉粥样硬化等病症。因此，如何攻克高脂饮食诱发的肥胖和高脂血症是我们目前关注的主要问题之一。

2、翅果油（elaeagnus mollis oil）是从翅果油树中提取的植物油脂，主要存在于翅果油树籽中，其脂肪含量在 46.6%～51.5%。翅果油有丰富的营养和药用价值，其种仁提取的植物油营养成分丰富，全面，接近母乳，在当地享有“天然母乳”的美誉。但翅果油树非常稀少，在我国仅分布于山西省乡宁、翼城、平陆和陕西秦岭北麓等地区的海拔 800-1500 米的背阴山坡，现已被我国列为二级重点保护植物，严重制约了翅果油中有效成分的推广利用。而且翅果油蛋白中含有7种必须氨基酸，是一种优良的天然植物蛋白资源，在食品加工领域具有广泛的应用前景。常规加工获得的翅果蛋白，其功能特性，如溶解性，起泡性，乳化性，持水性等往往会受到加工条件(如酸碱度，离子强度，温度等)的影响，在一定程度上限制了翅果蛋白在更多食品加工领域的应用。

3、现有技术中针对翅果油或者翅果蛋白的加工还仅仅停留在农产品的粗加工阶段。例如cn109805411a中公开了一种辅助降血脂的保健食品，其中含有翅果油；cn111317047a公开了一种翅果茶饮料及其制备方法，利用翅果油树的叶片制成的茶叶进行粉碎加工；cn105505573a公开了一种超声波辅助提取翅果油树籽油的方法，但还没有对其中的翅果蛋白进行深入研究，难以精确掌握其中的有效成分，因此需要对翅果蛋白进行进一步的深加工，提高加工功能性质，拓宽翅果蛋白的应用领域。

4、众多研究表明翅果蛋白中含有大量的生物活性肽，这些生物活性肽具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗血栓形成、抗高血压、免疫调节或金属螯合等生物活性。但是在蛋白质中，这些肽段不表现生物活性，只有通过用酶、酸、碱或发酵处理水解而被激活并表现出生物活性，其中酶解法被认为是生产活性肽最有效的方法。但是并不清楚利用何种生物酶进行处理可以获得生物活性高的多肽。

技术实现思路

1、针对现有技术方案的不足，本发明旨在提供一种能够发酵翅果油树种子制备具有降血脂作用的翅果蛋白多肽的微生物，所述微生物为植物乳杆菌 cgy-12株，上述菌株分离自翅果油树根，分类学命名为植物乳杆菌 lactobacillus plantarum，已于2022年7月4日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏号为cgmcc no.22560。

2、进一步的，本申请提供一种植物乳杆菌cgy-12在制备翅果蛋白多肽的应用，所述应用可以对翅果蛋白进行进一步的深加工，提高加工功能性质，拓宽翅果蛋白的应用领域。

3、进一步的，本发明提供一种具有降血脂作用的翅果蛋白多肽的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：

4、（1）实验前选取颗粒饱满、无病虫害、质地均匀的翅果油树种子，去除内皮，干燥后粉碎过筛，以正己烷提取剂反复抽提，并以超声波辅助提取，过滤、减压脱溶，上清为翅果油树籽油，过滤物为翅果油树种仁油粕。

5、（2）取脱脂后的翅果油树种仁油粕，以蒸馏水再次抽提离心取上清液，调ph使蛋白充分沉淀、离心、用蒸馏水洗至ph 7.0，冷冻干燥得翅果油树种仁蛋白。

6、（3）活化扩培植物乳杆菌cgy-12。

7、（4）配置含有上述翅果油树种仁蛋白的发酵培养基，接种加入植物乳杆菌cgy-12活化液，进行微生物发酵，发酵结束后离心后取上清液，浓缩后经真空冷冻干燥，得翅果油树种仁蛋白多肽。

8、进一步的，本发明提供翅果蛋白多肽在制备降血脂组合物中的应用，所述应用为将上述翅果蛋白多肽作为活性成分添加到食品中，所述食品具有降低甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白的含量，显著升高高密度脂蛋白的含量的效果。

9、进一步的，所述组合物为翅果油混合微囊粉。

10、所述翅果油混合微囊粉的制备方法为：

11、以翅果油树种仁蛋白多肽和麦芽糊精为壁材，添加翅果油作为芯材，吐温-80和司盘-80为乳化剂，经喷雾干燥制备获得翅果油混合微囊粉。

12、进一步的，本发明提供翅果油混合微囊粉在制备降血脂组合物中的应用，所述组合物包括：翅果油混合微囊、膳食纤维、大豆磷脂、绿茶粉、硬脂酸镁，辅料。所述辅料包括赤藓糖醇。

13、进一步的，本发明提供一种降血脂制品，包含前述的翅果蛋白多肽和组合物。组合物，优选包括抗性糊精、大豆磷脂、低聚果糖、红曲米粉、绿茶粉；进一步优选，还包括紫苏籽微囊粉和牛磺酸以及复合维生素。其中复合维生素为维生素c、维生素e、维生素b1、维生素b2。

14、经实验证明，本发明制备的翅果油树种仁蛋白及其产品经小鼠灌胃实验证明具有较好的辅助降血脂功效，具有显著缓解体重的增加并且显著降低肝脏、附睾脂肪及肾周脂肪的重量，进一步研究证实，上述产品能够显著降低甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白的含量，显著升高高密度脂蛋白的含量。该翅果油树种仁蛋白及其产品的生产工艺，可操作性强，产品质量可控，蛋白质酶解程度完全，所得的翅果油树种仁蛋白呈白色或淡黄色，活性高，易溶于水，可用于食品和医疗保健等领域，具有较广的应用前景。

技术特征：

1.一种能够发酵翅果油树种子制备具有降血脂作用的翅果蛋白多肽的微生物，其特征在于，所述微生物为植物乳杆菌 cgy-12株，上述菌株分离自翅果油树根，分类学命名为植物乳杆菌 lactobacillus plantarum，已于2022年7月4日保藏在位于北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所的中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为cgmcc no.22560。

2.权利要求1所述的一种植物乳杆菌cgy-12在制备翅果蛋白多肽的应用，所述应用为发酵翅果油树种子制备具有降血脂作用的翅果蛋白多肽。

3.一种具有降血脂作用的翅果蛋白多肽的制备方法，所述制备方法包括如下步骤：

4.利用权利要求3所述的方法制备获得的一种翅果蛋白多肽。

5.权利要求4所述的翅果蛋白多肽在制备降血脂组合物中的应用，所述应用为将上述翅果蛋白多肽作为活性成分添加到食品中。

6.一种含有权利要求4所述翅果蛋白多肽的组合物，其特征在于所述组合物还包括翅果油混合微囊粉。

7.如权利要求6所述的组合物，所述组合物还包括抗性糊精、大豆磷脂、低聚果糖、红曲米粉、绿茶粉、紫苏籽微囊粉和牛磺酸以及复合维生素。

8.如权利要求7所述的组合物，所述复合维生素为维生素c、维生素e、维生素b1、维生素b2。

9.如权利要求6-8任一所述的组合物在制备降血脂组合物中的应用。

10.一种降血脂制品，其特征在于，降血脂制品中包含有权利要求4所述的翅果蛋白多肽和权利要求6-8任一所述的组合物。

技术总结
本发明提供一种发酵翅果油种子的微生物发酵及其降血脂组合物。微生物为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)，能够发酵翅果油树种子制备具有降血脂作用的翅果蛋白多肽，菌株分离自翅果油树根，已于2022年7月4日在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏号为CGMCC No.22560。菌株发酵获得的翅果油树种仁蛋白及其产品经小鼠灌胃实验证明具有较好的辅助降血脂功效，具有显著缓解体重增加并且显著降低肝脏、附睾脂肪及肾周脂肪重量，进一步研究证实，产品能够显著降低甘油三酯、胆固醇、低密度脂蛋白的含量，显著升高高密度脂蛋白的含量。

技术研发人员：房克敏,陈析,管英伟,郭然
受保护的技术使用者：北京康美禾源健康科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13