本发明属于酶解,具体涉及一种酶降解动物组织制备含有成骨生长肽及c-端五肽溶液的方法。
背景技术:
1、成骨生长肽(osteogenic growth peptide,ogp)是具有显著生理活性的小分子多肽物质。原肽由十四个氨基酸组成,一级结构为alkrqgrtlygfgg。能促进细胞ⅰ型胶原mrna、骨钙素(bgp)和碱性磷酸酶(alpase)的表达,从而增加细胞胶原蛋白合成、骨钙素含量和碱性磷酸酶的活性。临床上可用于骨代谢失衡、骨损伤和骨髓移植等相关疾病的治疗以及增进骨和骨髓造血的活性,作为造血激动剂的潜在用途。成骨生长肽的c-端五肽ogp(10-14)是保持原肽全部活性的最小氨基酸序列,不仅对成骨细胞(mc3t3e1)和成纤维细胞(nih3t3)有明显增殖作用,在动物体内也表现出显著地成骨和造血活性,因此,有望替代原肽成为新的临床候选药物。虽然人和动物血中含有成骨生长肽,但含量太小,化学合成已经可以成规模获得.如果能从食源性材料获取,则成骨生长肽将能够开发成功能食品或保健食品服务于更多人。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供一种酶降解动物组织制备含有成骨生长肽及c-端五肽溶液的方法,通过酶解的方式获取肉类中成骨生长肽及c-端五肽的方法。
2、为了实现上述目的,本发明采用的技术方案是:
3、一种酶降解动物组织制备含有成骨生长肽及c-端五肽溶液的方法,其特征在于,包括以下步骤:
4、1、取蛋白酶加1%nahco3溶液制成每1μl中含1μg的蛋白酶溶液;
5、2、将原料置于反应容器中,加入浓度为1%-3%的缓冲溶液,超声处理20-40min,再用浓度为1%-3%的缓冲溶液定容后摇匀,经过微孔滤膜滤过,取续滤液置微量进样瓶中,加入酶溶液,酶溶液与原料比为1:1μg/g,摇匀,在恒温酶解10-15小时,得到含有成骨生长肽(ogp)以及碳端五肽ogp(10-14)的溶液。
6、所述的酶包括但不限于胃蛋白酶,胰蛋白酶,木瓜蛋白酶以及其他能够降解蛋白质的酶。
7、所述的滤膜为0.22μm的微孔滤膜滤。
8、所述的缓冲溶液为nh4hco3,nahco3,nh4cl,nah2po4/k2hpo4中的一种或任意几种的混合物。
9、所述的恒温的温度为20-80℃中一温度。
10、所述的含有成骨生长肽(ogp)以及碳端五肽ogp(10-14)的溶液应用于保健食品或功能食品中。
11、所述的含有成骨生长肽(ogp)以及碳端五肽ogp(10-14)的溶液应用于化妆品中。
12、所述的含有成骨生长肽(ogp)以及碳端五肽ogp(10-14)的溶液应用于药品中。
13、所述的原料为肉类,动物皮、鹿茸角、龟板胶。
14、本发明的有益效果是:
15、肉类富含蛋白质,经过酶降解得到ogp,这样将给ogp提供一个天然来源,从食材获取,则成骨生长肽将能够开发成功能食品或保健食品服务于更多人。
1.一种酶降解动物组织制备含有成骨生长肽及c-端五肽溶液的方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种酶降解动物组织制备含有成骨生长肽及c-端五肽溶液的方法,其特征在于,所述的酶包括但不限于胃蛋白酶,胰蛋白酶,木瓜蛋白酶以及其他能够降解蛋白质的酶。
3.根据权利要求1所述的一种酶降解动物组织制备含有成骨生长肽及c-端五肽溶液的方法,其特征在于,所述的滤膜为0.22μm的微孔滤膜滤。
4.根据权利要求1所述的一种酶降解动物组织制备含有成骨生长肽及c-端五肽溶液的方法,其特征在于,所述的缓冲溶液为nh4hco3,nahco3,nh4cl,nah2po4/k2hpo4中的一种或任意几种的混合物。
5.根据权利要求1所述的一种酶降解动物组织制备含有成骨生长肽及c-端五肽溶液的方法,其特征在于,所述的恒温的温度为20-80℃中一温度。
6.根据权利要求1所述的一种酶降解动物组织制备含有成骨生长肽及c-端五肽溶液的方法,其特征在于,所述的含有成骨生长肽(ogp)以及碳端五肽ogp(10-14)的溶液应用于保健食品或功能食品中。
7.根据权利要求1所述的一种酶降解动物组织制备含有成骨生长肽及c-端五肽溶液的方法,其特征在于,所述的含有成骨生长肽(ogp)以及碳端五肽ogp(10-14)的溶液应用于化妆品中。
8.根据权利要求1所述的一种酶降解动物组织制备含有成骨生长肽及c-端五肽溶液的方法,其特征在于,所述的含有成骨生长肽(ogp)以及碳端五肽ogp(10-14)的溶液应用于药品中。
9.根据权利要求1所述的一种酶降解动物组织制备含有成骨生长肽及c-端五肽溶液的方法,其特征在于,所述的原料为肉类,动物皮、鹿茸角、龟板胶。