一株高产油脂的酿酒酵母突变株MU2R48及其应用

本发明属于生物工程，具体涉及一株高产油脂的酿酒酵母突变株mu2r48及其应用。

背景技术：

1、公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

2、棕榈油酸是一种珍稀的十六碳ω-7单不饱和脂肪酸，已有研究表明其在医药、保健品、水产饵料、化工产品以及生物能源等领域具有重要的应用价值。棕榈油酸可以在体内作为信号分子调控代谢，提高人体对胰岛素的敏感性，从而对糖尿病、代谢综合征和动脉粥样硬化等疾病具有一定的功效，并且研究发现棕榈油酸还具有显著的抗炎和防止色素沉着的作用。目前天然的棕榈油酸主要来源于沙棘果油、澳洲坚果籽油、深海鱼油和微藻藻油等野生动植物，但是这些野生动植物资源非常有限并且广泛受制于季节地域等因素难以规模化种植，无法满足迅速增长的棕榈油酸的市场的需求。研究发现，酿酒酵母油脂中的棕榈油酸含量远高于其他微生物和野生动植物，约占总油脂含量的50％左右。但是酿酒酵母的油脂含量很低，仅不足5％，经过诱导后也仅在20％左右，油脂含量低不足以满足棕榈油酸的产量需求。申请人前期经过大量的野生菌种筛选工作获得了一株油脂含量为30％的酿酒酵母菌株sc018，并且经过发酵工艺优化可以将其油脂含量提高到40％以上，显示出较强的油脂生产能力。尽管如此，与传统的产油微生物相比，其油脂含量有待进一步提高。然而单纯依靠野生株的筛选来获得更高油脂含量的酿酒酵母菌株，无论是从工作量还是可行性上都存在巨大的问题，相反，通过诱变育种来获得高油含量的酿酒酵母菌株的可行性更大。

3、高通量流式拉曼分选(flowracs)能够利用单细胞拉曼图谱这一细胞内在、免外源标记的“生化指纹”进行功能分选，通过流式微流控芯片结合拉曼光镊技术能够实现活体单细胞超高通量拉曼分选的高度自动化，具有不需要预知生物标识物、无需标记、非侵入性、可全景识别细胞代谢表型等优势。将诱变育种与高通量筛选方法相结合极大提高了菌种的自然突变进程和从海量突变体中获得目标菌株的筛选效率。

技术实现思路

1、为了解决现有技术的不足，本发明的目的是提供一株高产油脂的酿酒酵母突变株mu2r48及其应用。

2、为了实现上述目的，本发明是通过如下的技术方案来实现：

3、第一方面，本发明提供了一株高产油脂的酿酒酵母突变株mu2r48，其分类命名为saccharomyces cerevisiae mu2r48，已于2023年3月23日保藏于中国普通微生物菌种保藏中心，保藏号为cgmccno.26860，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

4、第二方面，本发明提供了一种第一方面所述的酿酒酵母突变株mu2r48的菌剂的发酵制备方法，将权利要求1或2所述的酿酒酵母突变株mu2r48进行种子培养后进行产油诱导培养。

5、第三方面，本发明提供了一种菌剂，通过第二方面所述的发酵制备方法获得，所述菌剂含有第一方面所述的酿酒酵母突变株mu2r48。

6、第四方面，本发明提供了第一方面所述的酿酒酵母突变株mu2r48和/或第三方面所述的菌剂在生产油脂中的应用。

7、上述本发明的一种或多种技术方案取得的有益效果如下：

8、本发明通过诱变后高通量流式拉曼分选得到的酿酒酵母突变株，与传统的野生型酿酒酵母和出发菌株相比能够在限氮培养中达到高产油脂的效果，油脂含量可达40.26％，较出发菌株30.85％的油含量，提高了30.50％。在工业上细胞的油含量高更有利于有油脂的提取分离，将节省工业生产的成本，并且菌株无毒无害，可作为规模化生产酿酒酵母油脂和棕榈油酸的优良菌株。

9、保藏信息

10、酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)mu2r48，已于2023年3月23日保藏于中国普通微生物菌种保藏中心，保藏号为cgmcc no.26860，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

技术特征：

1.一株高产油脂的酿酒酵母突变株mu2r48，其分类命名为saccharomyces cerevisiaemu2r48，已于2023年3月23日保藏于中国普通微生物菌种保藏中心，保藏号为cgmccno.26860，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

2.如权利要求1所述的酿酒酵母突变株mu2r48，其特征在于，所述酿酒酵母突变株mu2r48的its序列具有如seq id no.1所示的核苷酸序列。

3.一种权利要求1或2所述的酿酒酵母突变株mu2r48的菌剂的发酵制备方法，其特征在于，将权利要求1或2所述的酿酒酵母突变株mu2r48进行种子培养后进行产油诱导培养。

4.如权利要求3所述的发酵制备方法，其特征在于，所述种子培养使用的培养基为ypd培养基，所述ypd培养基的组分包括酵母浸粉9-11g/l、蛋白胨19-21g/l和葡萄糖19-21g/l。

5.如权利要求3所述的发酵制备方法，其特征在于，所述种子培养为在28℃、180rpm的条件下摇床培养24-36h。

6.如权利要求3所述的发酵制备方法，其特征在于，所述产油诱导培养使用的培养基为限氮培养基，所述限氮培养基的组分包括酵母浸粉3-5g/l，(nh4)2so4 0.3-0.5g/l，kh2po40.9-1.1g/l，na2hpo40.2-0.3g/l，mgso4·7h2o 1.4-1.6g/l，fecl3·6h2o 0.14-0.16g/l，cacl2·2h2o 0.14-0.16g/l，znso4·7h2o 0.01-0.03g/l，mnso4·h2o0.05-0.07g/l，葡萄糖19-21g/l。

7.如权利要求3所述的发酵制备方法，其特征在于，所述产油诱导培养为在28℃、180rpm的条件下摇床培养96h，每24h补加29-31g/l的葡萄糖。

8.一种菌剂，其特征在于，通过权利要求3-7任一项所述的发酵制备方法获得，所述菌剂含有权利要求1或2所述的酿酒酵母突变株mu2r48。

9.权利要求1或2所述的酿酒酵母突变株mu2r48和/或权利要求8所述的菌剂在生产油脂中的应用。

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述油脂包括棕榈油酸。

技术总结
本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一株高产油脂的酿酒酵母突变株MU2R48及其应用。本发明提供了一株高产油脂的酿酒酵母突变株MU2R48，其分类命名为Saccharomyces cerevisiae MU2R48，已于2023年3月23日保藏于中国普通微生物菌种保藏中心，保藏号为CGMCC No.26860，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。本发明通过诱变后高通量流式拉曼分选得到的酿酒酵母突变株，与传统的野生型酿酒酵母和出发菌株相比能够在限氮培养中达到高产油脂的效果，油脂含量可达40.26％，较出发菌株30.85％的油含量，提高了30.50％。在工业上细胞的油含量高更有利于有油脂的提取分离，将节省工业生产的成本，并且菌株无毒无害，可作为规模化生产酿酒酵母油脂和棕榈油酸的优良菌株。

技术研发人员：周文俊,刘天中,纪晓彤,吕雪峰
受保护的技术使用者：中国科学院青岛生物能源与过程研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13