一种提取和纯化羊角棉总生物碱的方法

本发明属于绿色过程化学，具体涉及一种提取和纯化羊角棉总生物碱的方法。

背景技术：

1、公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

2、羊角棉(alstonia mairei)为夹竹桃科(apocynaceae)，鸡骨常山属植物，羊角棉为我国特有种，滇中地区有分布。具有清热、止痛、止血、排浓生肌的作用；外用治疗外伤出血、疮毒等。富含结构多样性的生物碱是羊角棉具有良好生物活性的重要原因。

3、传统的提取羊角棉总生物碱的方法，主要是采用有机溶剂进行萃取或者回流进行提取；纯化的方法采用大孔吸附树脂。但是传统的提取方法获得的羊角棉总生物碱的量少，并且纯化的过程也会进一步减少羊角棉总生物碱的量，同时纯化的方法也会影响到羊角棉总生物碱的活性。

技术实现思路

1、为了克服上述问题，本发明提供了一种提取和纯化羊角棉总生物碱的方法。本发明以羊角棉枝叶为原料，运用超声提取法在单因素实验的基础上，从料液比、提取温度、乙醇浓度、提取时间等因素对羊角棉中生物碱含量的影响，并通过多元二次回归方程来拟合响应面值与因素之间的函数关系，获得最优的料液比、提取温度、乙醇浓度，并通过大孔树脂对提取的羊角棉总生物碱进行纯化，纯化后的羊角棉总生物碱的活性明显提高。

2、为实现上述技术目的，本发明采用如下技术方案：

3、本发明的第一个方面，提供一种提取和纯化羊角棉总生物碱的方法，所述方法包括：

4、s1、将羊角棉枝叶利用粉碎机研磨后，得到羊角棉粉末；

5、s2、选取乙醇作为提取剂，对步骤s1中的羊角棉粉末进行超声提取，通过单因素实验，确定提取剂的浓度、料液比、提取温度、提取时间的最优值；

6、s3、采用响应面法优化超声辅助羊角棉生物碱提取方法，根据单因素实验结果，以料液比a、提取温度b、乙醇浓度c作为自变量，以生物碱的含量为响应值y，利用design-expert8软件建立数学模型，得到回归方程；

7、s4、对s3中的回归方程进行计算，得到最佳料液比、提取温度、乙醇浓度；

8、s5、在s4中最佳料液比、提取温度、乙醇浓度下，对羊角棉粉末进行超声提取，得到羊角棉生物碱粗提液；

9、s6、将s5中羊角棉生物碱粗提液进行蒸干，得到粗羊角棉生物碱，经过酸提后采用大孔树脂对其进行吸附提纯，通过单因素实验，确定大孔吸附树脂的类型、上样液的ph、上样量的最优值；将吸附羊角棉生物碱的大孔树脂进行解析，并通过单因素实验，确定洗脱剂的乙醇浓度以及洗脱量的最优值；

10、s7、将解析后的羊角棉生物碱利用naoh溶液碱化，碱化后溶液的ph值至10～11，后经二氯甲烷萃取、蒸干后得到纯羊角棉生物碱。

11、在一种或多种实施方式中，所述步骤s1中粉碎机研磨的粒径大小为80～100目。

12、在一种或多种实施方式中，所述步骤s2中，提取剂的浓度(溶质的质量分数)的最优值为80％、料液比最优值为1:25g/ml、提取温度最优值为40℃、提取时间的最优值为50min。

13、在一种或多种实施方式中，所述步骤s3中，回归方程为：y＝199.75+14.43a-3.75b+28.58c-1.83ab+2.27ac-13.19bc-2.95a2-4.84b2-5.91c2。

14、在一种或多种实施方式中，所述步骤s4中，通过计算得到最佳料液比23.41g/ml、提取温度30.16℃、乙醇浓度89.77％。

15、在一种或多种实施方式中，所述步骤s5中，酸提的条件为：采用质量分数为1％～3％的盐酸溶液进行酸提；优选的所述盐酸的质量分数为2％；所述粗羊角棉生物碱的质量与盐酸溶液的体积比为1mg：1.34～4ml；优选为1mg：2ml。

16、在一种或多种实施方式中，所述步骤s6中，所述大孔吸附树脂为x-5型号的大孔树脂。

17、在一种或多种实施方式中，所述步骤s6中，所述上样液的ph的最优值为ph＝5。

18、在一种或多种实施方式中，所述步骤s6中，所述上样量采用粗羊角棉生物碱与大孔树脂的质量比进行表示，上样量的最优值为0.063:1。

19、在一种或多种实施方式中，所述步骤s6中，洗脱剂的乙醇浓度的最优值为70％。

20、在一种或多种实施方式中，所述步骤s6中，洗脱量采用洗脱液的体积与大孔树脂的质量比进行表示，洗脱量的最优值为44ml：1g。

21、本发明的有益效果在于：

22、本发明提供了一种提取和纯化羊角棉总生物碱的方法，以羊角棉枝叶为原料，运用超声提取法在单因素实验的基础上，从料液比、提取温度、乙醇浓度、提取时间等因素对羊角棉中生物碱含量的影响，并通过多元二次回归方程来拟合响应面值与因素之间的函数关系，获得最优的料液比、提取温度、乙醇浓度，并通过大孔树脂对提取的羊角棉总生物碱进行纯化，纯化后的羊角棉总生物碱的活性明显提高。

技术特征：

1.一种提取和纯化羊角棉总生物碱的方法，其特征在于，所述方法包括：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤s1中粉碎机研磨的粒径大小为80～100目。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，提取剂的浓度的最优值为80％、料液比最优值为1:25g/ml、提取温度最优值为40℃、提取时间的最优值为50min。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤s3中，回归方程为：y＝199.75+14.43a-3.75b+28.58c-1.83ab+2.27ac-13.19bc-2.95a2-4.84b2-5.91c2。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤s4中，通过计算得到最佳料液比23.41g/ml、提取温度30.16℃、乙醇浓度89.77％。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤s5中，酸提的条件为：采用质量分数为1％～3％的盐酸溶液进行酸提；优选的所述盐酸的质量分数为2％；所述粗羊角棉生物碱的质量与盐酸溶液的体积比为1mg：1.34～4ml；优选为1mg：2ml。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤s6中，所述大孔吸附树脂为x-5型号的大孔树脂；

8.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述上样量采用粗羊角棉生物碱与大孔树脂的质量比进行表示，上样量的最优值为0.063:1。

9.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤s6中，洗脱剂的乙醇浓度的最优值为70％。

10.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤s6中，洗脱量采用洗脱液的体积与大孔树脂的质量比进行表示，洗脱量的最优值为44ml：1g。

技术总结
本发明属于绿色过程化学技术领域，具体公开了一种提取和纯化羊角棉总生物碱的方法，以羊角棉枝叶为原料，运用超声提取法在单因素实验的基础上，从料液比、提取温度、乙醇浓度、提取时间等因素对羊角棉中生物碱含量的影响，并通过多元二次回归方程来拟合响应面值与因素之间的函数关系，获得最优的料液比、提取温度、乙醇浓度，并通过大孔树脂对提取的羊角棉总生物碱进行纯化，解决了传统提取方法获得的羊角棉总生物碱量过少的问题，并且通过本发明的纯化方法，羊角棉总生物碱的活性明显提高。

技术研发人员：王姝麒,孔文茹,郭常川,王梦花,王智璠,张舒凯
受保护的技术使用者：山东大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15