大球盖菇五肽及其制备方法和应用、药物组合物和大球盖菇五肽食品

本发明涉及食用菌深加工，具体涉及大球盖菇五肽及其制备方法和应用、药物组合物和大球盖菇五肽食品。

背景技术：

1、大球盖菇(stropharia rugoso-annulata)，又称皱环球盖菇、酒红色球盖菇、赤松茸，属于担子菌门(basidiomycota)、伞菌纲(agricomycetes)、伞菌目(agricales)、球盖菇科(strophariaceae)、球盖菇属(stropharica)，是一种珍稀草腐类食用菌，富含优质蛋白质，其子实体干品中粗蛋白含量为20～31wt％，是开发食用菌蛋白质、肽及其衍生物的优质原料。

2、血管紧张素转化酶(ace)是调节血压水平的关键酶，抑制血管紧张素转化酶则可以控制或治疗高血压。现有技术“李文,陈万超,马海乐,吴迪,张忠,杨焱.大球盖菇肽基料超声制备及其食药特性分析[j].食用菌学报,2022,29(03):81-94.”公开了fp-20-120-t20-uf、pb-20-120-t20-uf、fp-20/28-120-t20-uf、fp-20/40-120-t20-uf、fp-28/40-120-t20-uf、fp-20/28/40-120-t20-uf、fp-20/40/28-120-t20-uf、fp-s20/28-300-t20-uf和pb-s20/28-300-t20-uf共9种大球盖菇超滤液肽基料对血管紧张素转化酶具有抑制作用，其ace抑制活性ic50值在0.037～0.119mg/ml范围。然而，上述大球盖菇超滤液肽基料的ace抑制活性不够高。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的在于提供大球盖菇五肽及其制备方法和应用、药物组合物和大球盖菇五肽食品，本发明采用的大球盖菇五肽对血管紧张素转化酶和二肽基肽酶-4的抑制活性高。

2、为了实现上述发明目的，本发明提供以下技术方案：

3、本发明提供了一种大球盖菇五肽，包括具有式i所示结构的大球盖菇五肽epqcd和/或具有式ii所示结构的大球盖菇五肽sngne：

4、

5、本发明提供了上述技术方案所述大球盖菇五肽的制备方法，包括以下步骤：

6、将大球盖菇进行水提，得到水提液；

7、将所述水提液进行超滤分离，得到超滤粗肽；所述超滤分离的截留分子量为3～5kda；

8、将所述超滤粗肽进行sephadex g-15凝胶过滤柱分离，得到凝胶分离粗肽；所述sephadex g-15凝胶过滤柱分离采用的洗脱剂为水；

9、将所述凝胶分离粗肽进行高效液相色谱分离，分别得到所述大球盖菇五肽epqcd和所述大球盖菇五肽sngne；所述高效液相色谱分离的流动相为甲醇水溶液，所述甲醇水溶液中甲醇的体积分数为3～5％。

10、优选的，所述大球盖菇的质量与水提用水的体积之比为1g：20～40ml。

11、优选的，所述水提为沸水提取，所述水提的时间为45～60min。

12、优选的，所述超滤分离的压力差为0.58～0.62bar。

13、优选的，所述高效液相色谱分离的条件包括：色谱柱为xbridge peptide beh c18obdtm prep柱；柱温为25℃；洗脱方式为等度洗脱；所述流动相的流速为1ml/min。

14、本发明提供了上述技术方案所述的大球盖菇五肽或上述技术方案所述制备方法制得的大球盖菇五肽在制备药物、在保健品或调味料中的应用；

15、所述药物包括治疗血管紧张素转化酶和/或二肽基肽酶-4介导的疾病的药物。

16、优选的，所述保健品包括降血压保健品和/或降血糖保健品。

17、本发明提供了一种药物组合物，包括大球盖菇五肽和药学上可接受的辅料；所述大球盖菇五肽为上述技术方案所述的大球盖菇五肽或上述技术方案所述制备方法制得的大球盖菇五肽。

18、本发明提供了一种大球盖菇五肽食品，包括大球盖菇五肽和食品学上可接受的辅料；所述大球盖菇五肽为上述技术方案所述的大球盖菇五肽或上述技术方案所述制备方法制得的大球盖菇五肽。

19、本发明提供的具有式i所示结构的大球盖菇五肽epqcd以及具有式ii所示结构的大球盖菇五肽sngne的相对分子质量较小，在人体内的容易吸收，不仅能提供人体生长发育所需要的营养，还能调节人体生理机能，对血管紧张素转化酶和二肽基肽酶-4的抑制活性高，在制备抑制ace和/或dpp-iv活性或制备治疗ace、dpp-iv介导的疾病的药物、保健品、调味料中具有很好的应用前景。对于传统的单一的呈味氨基酸或者呈味核苷酸作为鲜味剂，味感单调，而本发明采用的大球盖菇五肽具有鲜味特征，属于鲜味肽，可以作为调味料补充和增强食物的整体味道，使其风味更加和谐、柔软和丰满。如实施例测试结果所示，大球盖菇五肽epqcd和sngne对ace的ic50分别为441.83±0.34μm和425.50±3.82μm，对dpp-iv的ic50分别为2004.49±9.23μm和1976.99±9.10μm，浓度为2mg/ml的大球盖菇五肽epqcd和sngne对ace的抑制率分别为89.15±0.42％和90.51±0.21％，对dpp-iv的的抑制率分别为57.68±0.96％和61.42±0.33％；大球盖菇五肽epqcd和sngne的鲜味特性阈值分别为0.304mmol/l和0.214mmol/l，浓度为0.5mg/ml的大球盖菇五肽epqcd和sngne的电子舌测试结果分别为7.12和8.82；说明，本发明采用的大球盖菇五肽epqcd和sngne对ace和dpp-iv的抑制活性高，具有鲜味特征。

技术特征：

1.一种大球盖菇五肽，其特征在于，包括具有式i所示结构的大球盖菇五肽epqcd和/或具有式ii所示结构的大球盖菇五肽sngne：

2.权利要求1所述大球盖菇五肽的制备方法，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述大球盖菇的质量与水提用水的体积之比为1g：20～40ml。

4.根据权利要求2或3所述的制备方法，其特征在于，所述水提为沸水提取，所述水提的时间为45～60min。

5.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述超滤分离的压力差为0.58～0.62bar。

6.根据权利要求2所述的制备方法，所述高效液相色谱分离的条件包括：色谱柱为xbridge peptide beh c18 obdtm prep柱；柱温为25℃；洗脱方式为等度洗脱；所述流动相的流速为1ml/min。

7.权利要求1所述的大球盖菇五肽或权利要求2～6任一项所述制备方法制得的大球盖菇五肽在制备药物、在保健品或调味料中的应用；

8.根据权利要求7所述的应用，其特征在于，所述保健品包括降血压保健品和/或降血糖保健品。

9.一种药物组合物，其特征在于，包括大球盖菇五肽和药学上可接受的辅料；所述大球盖菇五肽为权利要求1所述的大球盖菇五肽或权利要求2～6任一项所述制备方法制得的大球盖菇五肽。

10.一种大球盖菇五肽食品，其特征在于，包括大球盖菇五肽和食品学上可接受的辅料；所述大球盖菇五肽为权利要求1所述的大球盖菇五肽或权利要求2～6任一项所述制备方法制得的大球盖菇五肽。

技术总结
本发明提供了大球盖菇五肽及其制备方法及其应用、药物组合物和大球盖菇五肽食品，涉及食用菌深加工技术领域。本发明提供的具有式I所示结构的大球盖菇五肽EPQCD以及具有式II所示结构的大球盖菇五肽SNGNE的相对分子质量均较小，在人体内的容易吸收，不仅能提供人体生长发育所需要的营养，还能调节人体生理机能，对血管紧张素转化酶和二肽基肽酶‑4的抑制活性高，在制备抑制或治疗ACE、DPP‑IV介导的疾病的药物以及食品，尤其是保健品中具有很好的应用前景。大球盖菇五肽具有鲜味特征，作为调味料能，够补充和增强食物的整体味道，使其风味更加和谐。

技术研发人员：陈万超,杨焱,李文,吴迪,张忠,汪文翰,颜梦秋
受保护的技术使用者：上海市农业科学院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15