一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法与流程

本发明涉及药物提取，具体为一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法。

背景技术：

1、5-羟基色氨酸，是一种氨基酸类物质。它在人体内可作为5-羟色胺的前体物质；其中，5-羟色胺又名血清素，广泛存在于哺乳动物组织中，特别在大脑皮层质及神经突触内含量很高，它也是一种抑制性神经递质。能产生愉悦情绪的信使，因此被广泛应用于抗抑郁药。

2、目前5-羟基色氨酸主要有天然提取法、化学合成和发酵法制得。天然提取法是从非洲加纳籽中提取得来研究发现，其主要活性物质5-羟基色氨酸含量可达到10％以上。

3、目前，5-羟基色氨酸的提取方法主要为：将加纳籽粉碎，加水回流提取，提取液加入g6104阳离子树脂吸附，30％氨水洗脱(如现有技术201010549785.x)。其产品的最终回收率为60％-70％。然而，5-羟基色氨酸在碱性条件下不稳定；且仍然含有较大量的5-羟基色氨酸没被分离出来，未分离出的5-羟基色氨酸占整个5-羟基色氨酸的含量的30％-40％，从而导致产品收率较低。

技术实现思路

1、本发明提供一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，用以解决上述提出的至少一项技术问题。

2、为解决上述技术问题，本发明公开了一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，包括：

3、s1：原料预处理

4、在乳化剪切机中加入干燥的加纳籽粉末和乙醇，并超声提取，提取时启动乳化剪切机进行乳化，得母液滤液；

5、s2：浓缩脱脂处理

6、对母液滤液进行真空浓缩回收乙醇；回收完成后使用脱脂剂进行脱脂，得浓缩物；

7、s3：提纯处理

8、对浓缩物进行纯化水稀释沉淀，高速离心过滤；得上清液和沉积固体；对上清液进行大孔树脂吸附；纯净水洗涤，再对沉积固体和吸附树脂分别进行乙醇洗脱；回收乙醇，放冷结晶，分别收取结晶物；

9、s4：干燥制备

10、对结晶物进行乙醇溶解并重结晶，对重结晶进行恒温干燥。

11、优选的，s1中乙醇的体积百分比为百分之50；

12、乙醇和加纳籽粉的质量占比为1：6。

13、优选的，s1中至少使用乙醇对加纳籽粉末超声介入提取一次，提取温度为65-75摄氏度，提取时间为0.9-1.1小时，乳化时间为30分钟。

14、优选的，s2中真空浓缩回收乙醇的真空浓缩温度小于等于70摄氏度，真空度为-0.07mpa-0.88mpa。

15、优选的，s2中脱脂剂为石油醚、正乙烷、乙醚中的任一种。

16、优选的，s3中大孔树脂为d-101,d-130,ab-8,lx-38,nka-9,hpd-400,xda-8树脂中的一种或二种组合；

17、乙醇洗脱中的乙醇的体积百分比为百分之40-45。

18、优选的，s3中大孔树脂xda-8,

19、优选的，s4中恒温干燥的温度小于等于60摄氏度。

20、优选的，s1中超声提取采用的仪器为超声波提取仪。

21、优选的，还包括，s11：在进行超声提取的过程中对超声波提取仪的运行状态进行自检，有效保证超声提取的提取效率，超声波提取仪的实际提取效率θ：

22、其中，θ为超声波提取仪的实际提取效率θ，cx为用可见光谱法检测出的母液滤液中5-羟基色氨酸的浓度，vx为加入超声波提取仪内的乙醇的体积，mx为加入超声波提取仪的加纳籽粉粉末的质量，为每克加纳籽粉粉末在vx体积的乙醇中提取时得到的基准5-羟基色氨酸浓度，β为5-羟基色氨酸在乙醇中的扩散系数，π为圆周率，d为超声波提取仪腔体的平均直径，t为超声提取时长；

23、若θ>θ0，则超声波提取仪正常运行，若θ≤θ0，则此时超声波提取仪异常，会导致超声提取效率低于预设水平，此时超声波提取仪发出报警提示；其中θ0为超声波提取仪的预设提取效率。

24、优选的，s4后对得到的产品进行抽样质检，抽样质检包括纯度检测、残留溶剂检测、重金属和微生物检测和5-羟基色氨酸含量检测中的一种或多种。

25、下面通过附图和实施例，对本发明的技术方案做进一步的详细描述。

26、与现有技术对比，本发明具备以下有益效果：

27、1.本发明将加纳籽磨成细粉或者加纳籽粉加入乳化剪切机的提取罐中，然后加入加纳籽粉重量的六倍量的百分之50体积浓度的乙醇；并超声提取两次(或使用超声波提取仪提取两次)，其中，两次的提取温度均为70℃，提取时间为1h；然后启动乳化剪切机运动30分钟，并对乳化后的液体使用100-200目筛进行过滤；以得到母液滤液；在此使用环境下，并未引入碱性物质对加纳籽粉进行提取，从而提高了5-羟基色氨酸的稳定性和回收性；

28、2.本发明将乳化后的母液滤液放入真空浓缩仪，在真空度为-0.07mpa-0.88mpa，真空浓缩温度小于等于70摄氏度的情况下对母液滤液中的乙醇进行回收，回收完成后，添加石油醚脱脂，分离出石油醚层；回收的乙醇可以二次利用，分离出的石油醚层经过离心除杂后可以得到加纳籽油；回收后二次利用的乙醇可以节省溶剂的使用成本，加纳籽油可以提高附加产品的价值，从而增加收益；

29、3.本发明将脱脂后的浓缩物加纯净水稀释，沉淀，得第一混合溶液；使用离心机对第一混合溶液进行过高速离心过滤，得上清液和沉积固体；通过大孔树脂吸附上清液；再用纯净水洗涤吸附树脂，再使用45％乙醇分别洗脱吸附树脂和沉积固体；然后使用真空浓缩仪浓缩回收乙醇，并将其浓缩至有晶体开始析出时取出放冷沉淀析晶；回收的乙醇可以二次利用，从而减少资源浪费，降低成本；

30、4.本发明将沉淀析晶放冷后，使用乙醇溶解，并重结晶，然后使用干燥机在温度小于等于60℃的情况下对重结晶晶体进行恒温干燥，对干燥后的重结晶晶体使用破碎机进行粉碎、并过80目筛。重结晶过程中可以使用真空浓缩仪浓缩回收乙醇，从而降低资源损耗，降低成本；

31、5.本发明在实验过程中5-羟基色氨酸含量均高于80％；总5-羟基色氨酸的提取率均高于85％，表明提取效益高，该提取方法回报率高。

技术特征：

1.一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，其特征在于，包括：

2.根据权利要求1所述的一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，其特征在于，s1中乙醇的体积百分比为百分之50；

3.根据权利要求2所述的一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，其特征在于，s1中至少使用乙醇对加纳籽粉末超声介入提取一次，提取温度为65-75摄氏度，提取时间为0.9-1.1小时，乳化时间为30分钟。

4.根据权利要求1所述的一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，其特征在于，s2中真空浓缩回收乙醇的真空浓缩温度小于等于70摄氏度，真空度为-0.07mpa-0.88mpa。

5.根据权利要求1所述的一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，其特征在于，s2中脱脂剂为石油醚、正乙烷、乙醚中的任一种。

6.根据权利要求1所述的一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，其特征在于，

7.根据权利要求1所述的一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，其特征在于，s4中恒温干燥的温度小于等于60摄氏度。

8.根据权利要求1所述的一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，s1中超声提取采用的仪器为超声波提取仪。

9.根据权利要求9所述的一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，还包括，s11：在进行超声提取的过程中对超声波提取仪的运行状态进行自检，，有效保证超声提取的提取效率，超声波提取仪的实际提取效率

10.根据权利要求1所述的一种从加纳籽中的提取分离5-羟基色氨酸的方法，s4后对得到的产品进行抽样质检，抽样质检包括纯度检测、残留溶剂检测、重金属和微生物检测和5-羟基色氨酸含量检测中的一种或多种。

技术总结
本发明公开了一种从加纳籽中的提取分离5‑羟基色氨酸的方法，包括：S1：在乳化剪切机中加入干燥的加纳籽粉末和乙醇，并超声提取，提取时启动乳化剪切机进行乳化，得母液滤液；S2：对母液滤液进行真空浓缩回收乙醇；回收完成后使用脱脂剂进行脱脂，得浓缩物；S3：对浓缩物进行纯化水稀释沉淀，高速离心过滤；得上清液和沉积固体；对上清液进行大孔树脂吸附；先用纯水洗涤吸附后的树脂，再对树脂和沉积固体分别进行乙醇洗脱；回收乙醇，放冷结晶，得结晶物；S4：对结晶物进行乙醇溶解并重结晶，对重结晶物进行恒温干燥。本发明未使用碱性溶剂对5‑羟基色氨酸进行提取，提高了提取后5‑羟基色氨酸的稳定性。

技术研发人员：刘星勋,方植伟,王志
受保护的技术使用者：湖南华康生物资源有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15