本发明属于生物活性肽制备,具体涉及一种大鲵肽锌螯合物及其制备方法和应用。
背景技术:
1、病原微生物引起的感染性疾病,严重威胁着人们的健康,特别是以金黄色葡萄球菌为代表的多重耐药菌的出现,使感染性疾病的治疗更加复杂。在抗生素替代药物的研究过程中发现一些抗菌肽可以不使细菌产生耐药性或者降低细菌耐药性,因而备受到人们的重视,且在包括食品业、农业和医药业等行业有着广泛的应用。
2、大鲵(andrias davidianus)是我国特有的大型珍稀两栖动物,也是水产养殖的重要品种。大鲵在长期的进化过程中,形成了自己独特的结构。大鲵活性肽来自于大鲵肉的酶解产物,具有独特的氨基酸序列,同时具有抗氧化、抗衰老、降血糖、降尿酸等多种生物活性(佟长青、李伟著,《大鲵活性肽制备、功能及应用》,中国轻工业出版社,2022.6,isbn978-7-5184-3921-8)。但是,对于大鲵活性肽独特的结构研究还不够深入,其生物活性没有被充分挖掘,尤其是如何获得具有抗菌活性的大鲵肽,迄今为止未见报道。
技术实现思路
1、本发明的目的在于提供了一种大鲵肽锌螯合物及其制备方法和应用,所述大鲵肽锌螯合物具有较高的抑菌活性,可以有效抑制多种菌株的生长。
2、本发明提供了一种大鲵肽锌螯合物,包括如下质量份数的原料:
3、大鲵活性肽10~30份和锌源化合物1份;所述大鲵活性肽从大鲵肉中提取得到,分子量小于2000;所述锌源化合物包括硫酸锌、氯化锌或乙酸锌。
4、优选的,所述大鲵活性肽的制备方法包括:以aspergillus sp.酸性蛋白酶对大鲵肉进行酶解,得到酶解产物;
5、以三氯乙酸对所述酶解产物进行沉淀,得到的酶解液中含有所述大鲵肽锌螯合物。
6、优选的,所述大鲵活性肽包括seq id no.1~seq id no.20所示氨基酸序列的多肽。
7、本发明还提供了上述技术方案所述大鲵肽锌螯合物的制备方法,包括:
8、将大鲵活性肽和锌源化合物进行螯合反应,得到所述大鲵肽锌螯合物。
9、优选的,所述制备方法包括如下步骤:
10、将大鲵活性肽水溶液和锌源化合物水溶液混合,进行螯合反应,得到螯合反应液;
11、以无水乙醇对所述螯合反应液进行沉淀,得到的沉淀物含有所述大鲵活性肽。
12、优选的,所述螯合反应的温度为55~70℃,时间为30~90min,ph值为4~6。
13、优选的,所述无水乙醇与所述螯合反应液的体积比为(3~6):1。
14、优选的,以体积百分比为95%的乙醇水溶液对所述沉淀物进行洗涤后进行离心,将得到的沉淀物进行烘干,得到所述大鲵肽锌螯合物。
15、本发明还提供了上述技术方案所述的大鲵肽锌螯合物或上述技术方案所述的制备方法制备得到的大鲵肽锌螯合物在制备抗菌剂中的应用。
16、本发明还提供了一种抗菌剂,所述抗菌剂的有效成分包括上述技术方案所述的大鲵肽锌螯合物或上述技术方案所述的制备方法制备得到的大鲵肽锌螯合物。
17、有益效果:
18、本发明提供了一种大鲵肽锌螯合物,包括如下质量份数的原料:大鲵活性肽10~30份和硫酸锌1份;所述大鲵活性肽从大鲵肉中提取得到,分子量小于2000。本发明将包括上述质量份数的大鲵活性肽和锌源化合物进行螯合得到的大鲵活性肽锌螯合物使原本不具有抗菌活性的大鲵活性肽具有显著的抗菌活性,对包括枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌、产气肠杆菌和腐败希瓦氏菌在内的多种菌株的生长具有显著的抑制作用。
1.一种大鲵肽锌螯合物,其特征在于,包括如下质量份数的原料:
2.根据权利要求1所述的大鲵肽锌螯合物,其特征在于,所述大鲵活性肽的制备方法包括:以aspergillussp.酸性蛋白酶对大鲵肉进行酶解,得到酶解产物;
3.根据权利要求1或2所述大鲵肽锌螯合物,其特征在于,所述大鲵活性肽包括seq idno.1~seq id no.20所示氨基酸序列的多肽。
4.权利要求1~3任一项所述大鲵肽锌螯合物的制备方法,其特征在于,包括:
5.根据权利要求4所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法包括如下步骤:
6.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述螯合反应的温度为55~70℃,时间为30~90min,ph值为4~6。
7.根据权利要求5或6所述的制备方法,其特征在于,所述无水乙醇与所述螯合反应液的体积比为(3~6):1。
8.根据权利要求5所述的制备方法,其特征在于,所述制备方法还包括对所述沉淀物进行后处理,得到所述大鲵肽锌螯合物;
9.权利要求1~3任一项所述的大鲵肽锌螯合物或权利要求4~8任一项所述的制备方法制备得到的大鲵肽锌螯合物在制备抗菌剂中的应用。
10.一种抗菌剂,其特征在于,所述抗菌剂的有效成分包括权利要求1~3任一项所述的大鲵肽锌螯合物或权利要求4~8任一项所述的制备方法制备得到的大鲵肽锌螯合物。