人类白细胞抗原HLA-B*5801基因在鼻咽癌易感性筛查中的应用的制作方法

本发明涉及疾病诊断标志物，更具体地，涉及人类白细胞抗原hla-b*5801基因在鼻咽癌易感性筛查中的应用。

背景技术：

1、鼻咽癌(nasopharyngeal carcinoma，npc)是我国南方(广东、广西、香港、湖南、福建和江西)常见的恶性肿瘤之一。eb病毒感染在鼻咽癌发生发展中发挥了重要作用，但并不是所有感染了eb病毒的患者均会发展为鼻咽癌，其分子机制未明。随着研究的深入，人们发现遗传易感性在鼻咽癌的发生发展中起着非常重要的作用。

2、hla(人类白细胞抗原)是人类主要组织相容性复合体(majorhistocompatibility complex,mhc)的表达产物，hla复合体定位于6号染色体短臂(6p21.3)，全长3600kb。hla等位基因系统是最复杂的一类显性多态性遗传系统，大量研究表明，某些hla基因与癌症易感性之间存在显著相关性，如肺癌、甲状腺癌症等。hla基因可分为三类，其中编码i类分子中的hla-b系列抗原的hla-b基因有上千种等位基因，hla-b*5801等位基因是其中的一种。hla-b*5801基因目前主要用于别嘌呤醇不良反应预测。据报道，hla-b*5801与别嘌呤醇引起的严重皮肤不良反应(scar)有关，包括过敏综合征(hss)、史蒂文斯-约翰逊综合征(sjs)、中毒性表皮坏死松解症(ten)以及嗜酸性粒细胞增多症和全身症状的药物反应(dress)。然而，关于hla-b*5801与鼻咽癌的相关性，目前还未见相关报道。

技术实现思路

1、本发明所要解决的技术问题是克服上述现有技术中存在的缺陷和不足，提供人类白细胞抗原hla-b*5801基因在鼻咽癌易感性筛查中的应用。

2、本发明的目的在于提供人类白细胞抗原hla-b*5801基因在制备鼻咽癌易感性筛查产品中的应用。

3、本发明的另一目的在于提供检测类白细胞抗原hla-b*5801基因的试剂在制备鼻咽癌易感性筛查产品中的应用。

4、本发明的上述目的是通过以下技术方案给予实现的：

5、本发明采用聚合酶链反应-序列特异性引物(pcr-ssp)技术检测806例样本的hla-b*5801等位基因频率，其中鼻咽癌患者样本128例，宫颈癌症、肺癌、癌症、胃癌或结直肠癌患者样本共331例，非肿瘤对照样本347例，探讨hla-b*5801与鼻咽癌易感性的关系。本发明还进一步分析了hla-b*5801、ebv vca iga和细胞因子水平之间的相关性，包括il-2、il-4、il-6、il-10、il-17a、inf-γ和tnf-α水平。结果显示，hla-b*5801阳性的人群有更高的鼻咽癌患病率，可能与导致eb病毒清除障碍的免疫相关细胞因子水平较低有关。即hla-b*5801等位基因是鼻咽癌的易感基因，hla-b*5801等位基因可作为鼻咽癌易感性诊断标志物，可通过检测患者是否携带hla-b*5801基因进行鼻咽癌易感性筛查、判断。

6、因此，本发明提供关于人类白细胞抗原hla-b*5801基因的以下应用：

7、人类白细胞抗原hla-b*5801基因作为鼻咽癌易感性诊断标志物在非疾病诊断目的的鼻咽癌易感性筛查中的应用。

8、人类白细胞抗原hla-b*5801基因作为鼻咽癌易感性诊断标志物在制备鼻咽癌易感性筛查产品中的应用。

9、人类白细胞抗原hla-b*5801基因的检测试剂在非疾病诊断目的的鼻咽癌易感性筛查中的应用。

10、人类白细胞抗原hla-b*5801基因的检测试剂在制备鼻咽癌易感性筛查产品中的应用。

11、本发明中关于hla-b*5801基因的检测可通过包括但不限于高通量测序、小片段替代测序、pcr技术、免疫学方法等本领域常规技术手段进行。

12、进一步地，所述检测试剂为实时荧光聚合酶链反应试剂，包括一套hla-b*5801基因型特异性引物和一套内控基因引物。具体来源于中国世纪生物科技有限公司。

13、本发明还提供一种鼻咽癌易感性筛查产品，包含检测人类白细胞抗原hla-b*5801基因的试剂。

14、进一步地，所述产品还包括dna提取试剂。

15、本发明还提供所述鼻咽癌易感性筛查产品在非疾病诊断目的的鼻咽癌易感性筛查中的应用。

16、一种非疾病诊断目的的鼻咽癌易感性筛查方法，为采用人类白细胞抗原hla-b*5801基因的检测试剂对患者全血dna进行检测，若hla-b*5801基因阳性，则为鼻咽癌易感人群。

17、与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：

18、本发明公开了人类白细胞抗原hla-b*5801基因在鼻咽癌易感性筛查中的应用。本发明研究表明hla-b*5801等位基因是鼻咽癌的易感基因，可能与导致eb病毒清除障碍的细胞因子水平较低有关，hla-b*5801等位基因可作为鼻咽癌易感性诊断标志物，可通过检测患者是否携带hla-b*5801基因进行鼻咽癌易感性筛查、判断，为鼻咽癌易感性筛查提供更多的方式。

技术特征：

1.人类白细胞抗原hla-b*5801基因作为鼻咽癌易感性诊断标志物在非疾病诊断目的的鼻咽癌易感性筛查中的应用。

2.人类白细胞抗原hla-b*5801基因作为鼻咽癌易感性诊断标志物在制备鼻咽癌易感性筛查产品中的应用。

3.人类白细胞抗原hla-b*5801基因的检测试剂在非疾病诊断目的的鼻咽癌易感性筛查中的应用。

4.人类白细胞抗原hla-b*5801基因的检测试剂在制备鼻咽癌易感性筛查产品中的应用。

5.根据权利要求3或4所述应用，其特征在于，所述检测试剂为实时荧光聚合酶链反应试剂，包括一套hla-b*5801基因型特异性引物和一套内控基因引物。

6.一种鼻咽癌易感性筛查产品，其特征在于，包含检测人类白细胞抗原hla-b*5801基因的试剂。

7.根据权利要求6所述鼻咽癌易感性筛查产品，其特征在于，还包括dna提取试剂。

8.根据权利要求6所述鼻咽癌易感性筛查产品，其特征在于，所述产品为试剂盒。

9.权利要求6～8任一所述鼻咽癌易感性筛查产品在非疾病诊断目的的鼻咽癌易感性筛查中的应用。

10.一种非疾病诊断目的的鼻咽癌易感性筛查方法，其特征在于，采用人类白细胞抗原hla-b*5801基因的检测试剂对患者全血dna进行检测，若hla-b*5801基因阳性，则为鼻咽癌易感人群。

技术总结
本发明公开了人类白细胞抗原HLA‑B*5801基因在鼻咽癌易感性筛查中的应用。本发明通过分析人类HLA‑B*5801与鼻咽癌的相关性，及与白细胞介素2、4、6、10和17A水平，INF‑γ和TNF‑α水平的关系。结果显示鼻咽癌患者HLA‑B*5801等位基因频率高于非肿瘤组和其他类型癌症组。HLA‑B*5801阳性组的VCA‑IgA阳性率较高，免疫细胞因子如IL‑2、4,10、INF‑γ和TNF‑α水平较低。表明HLA‑B*5801等位基因是鼻咽癌的易感基因，可能与导致EB病毒清除障碍的细胞因子水平较低有关，可通过检测患者是否携带HLA‑B*5801基因进行鼻咽癌易感性判断。

技术研发人员：林金端,刘红伟,尹卫国,周笑红,蓝永乐,黄延锋,潘秀峰,王攀,杜秀芬,冯子人
受保护的技术使用者：清远市人民医院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15