一种体外培养肿瘤类器官的方法与流程

本发明涉及生物医药领域，具体涉及一种体外培养肿瘤类器官的方法。

背景技术：

1、癌症患者来源肿瘤类器官模型的建立，被认为是类器官培养技术的又一重大突破，传统的肿瘤类器官是源自肿瘤组织中肿瘤特异性干细胞通过三维组织培养形成的细胞簇，它可模拟体内肿瘤特征及肿瘤细胞异质性。

2、传统的肿瘤类器官培养方法是将患者肿瘤组织分离获得的肿瘤细胞(含有肿瘤干细胞)在加入一定的细胞因子和小分子建立类似体内的微环境中进行3d培养，形成微型肿瘤模型，然而传统的肿瘤类器官培养周期长，细胞类型较为简单，后续如果需要做免疫相关的药物检测需要通过类器官芯片和免疫细胞共培养，价格昂贵。

3、因此，本领域迫切需要开发一种新的，可以保留肿瘤微环境，能够快速且准确进行抗肿瘤药物筛选的肿瘤类器官平台。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一个新的，可以保留肿瘤微环境，能够有效进行抗肿瘤药物筛选的肿瘤类器官平台。

2、本发明的第一方面，提供了一种体外肿瘤类器官培养的方法，包括步骤：

3、(a)在肿瘤类器官培养基的存在下，培养肿瘤组织，从而获得肿瘤类器官；其中，所述肿瘤类器官培养基包括卵巢癌类器官培养基、肠癌类器官培养基、胶质瘤类器官培养基、肝癌类器官培养基和皮肤癌类器官培养基。

4、在另一优选例中，所述卵巢癌类器官培养基包括dmem/f12(gibco11330-033)/n2(gibco 17502-048)/b27(gibco 17504-044)/glutamax(gibco35050061)/bfgf(humanzymehz-1272)/epidermal growth factor(egf；r&dsystems 236-eg)/heparin(sigma h3393)/penicillin/streptomycin(gibco c14-15070-063)。

5、在另一优选例中，所述方法还包括以下步骤：

6、(b)在肿瘤类器官培养基的存在下，对步骤(a)获得的肿瘤类器官进行传代培养，获得经传代的肿瘤类器官。

7、在另一优选例中，所述培养为混合培养。

8、在另一优选例中，所述步骤(a)中，还包括获得2d贴壁细胞和3d细胞球的步骤。

9、在另一优选例中，在步骤(a)中，在肿瘤类器官培养基的存在下，培养5-50天，较佳地，10-30天，更佳地，15-25天。

10、在另一优选例中，所述方法不需要添加免疫细胞共培养。

11、在另一优选例中，所述肿瘤组织来自选自下组的一种或多种肿瘤：卵巢癌、肠道癌、皮肤癌、胶质瘤、肝癌。

12、在另一优选例中，所述肠道癌包括：结肠癌。

13、在另一优选例中，所述肿瘤类器官包括卵巢癌肿瘤类器官、肠道癌类器官、皮肤癌类器官、胶质瘤类器官、肝癌类器官。

14、在另一优选例中，所述方法还包括筛选治疗肿瘤的药物的步骤。

15、本发明第二方面提供了一种由如权利要求1所述的体外肿瘤类器官培养方法培养的类器官。

16、在另一优选例中，所述的肿瘤类器官包括卵巢癌肿瘤类器官、肠道癌类器官、皮肤癌类器官、胶质瘤类器官、肝癌类器官。

17、本发明第三方面提供了一种如本发明第一方面所述方法获得的类器官在用于制备药物筛选的模型中的用途。

18、在另一优选例中，所述药物包括化疗药物。

19、在另一优选例中，所述化疗药物包括顺铂、卡铂。

20、在另一优选例中，所述药物包括：吉西他滨、奥沙利铂、仑伐替尼、pd-l1抗体、伊马替尼、斯皮仁诺、二甲双胍。

21、本发明第四方面提供了一种抗肿瘤药物筛选的方法，包括步骤：

22、(a)提供用如本发明第一方面所述的方法制备的类器官；和

23、(b)使用所述类器官进行抗肿瘤药物筛选。

24、在另一优选例中，所述方法是非诊断和非治疗的。

25、在另一优选例中，当类器官的边缘扩散，体积缩小，则表明该药物为抗肿瘤药物。

26、应理解，在本发明范围内中，本发明的上述各技术特征和在下文(如实施例)中具体描述的各技术特征之间都可以互相组合，从而构成新的或优选的技术方案。说明书中所揭示的各个特征，可以被任何提供相同、均等或相似目的的替代性特征取代。限于篇幅，在此不再一一累述。

技术特征：

1.一种体外肿瘤类器官培养的方法，其特征在于，包括步骤：

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述培养为混合培养。

3.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述步骤(a)中，还包括获得2d贴壁细胞和3d细胞球的步骤。

4.如权利要求1所述的方法，其特征在于，在步骤(a)中，在肿瘤类器官培养基的存在下，培养5-50天，较佳地，10-30天，更佳地，15-25天。

5.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法不需要添加免疫细胞共培养。

6.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述肿瘤组织来自选自下组的一种或多种肿瘤：卵巢癌、肠道癌、皮肤癌、胶质瘤、肝癌。

7.如权利要求1所述的方法，其特征在于，所述方法还包括筛选治疗肿瘤的药物的步骤。

8.一种由如权利要求1所述的体外肿瘤类器官培养方法培养的类器官。

9.一种如权利要求1所述方法获得的类器官在用于制备药物筛选的模型中的用途。

10.一种抗肿瘤药物筛选的方法，其特征在于，包括步骤：

技术总结
本发明公开了一种体外培养肿瘤类器官的方法，具体地，本发明公开了体外肿瘤类器官培养的方法，包括步骤：(a)在肿瘤类器官培养基的存在下，培养肿瘤组织，从而获得肿瘤类器官；其中，所述肿瘤类器官培养基包括肠癌类器官培养基、胶质瘤类器官培养基、卵巢癌类器官培养基、肝癌类器官培养基及皮肤癌类器官培养基。本发明首次发现，本发明的肿瘤类器官可有效进行抗肿瘤药物筛选。

技术研发人员：韩欣欣,蔡春晖,李蓝杨,王晨
受保护的技术使用者：上海礼升生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/5/10