本发明属于生物医药领域,具体涉及一种生长激素型垂体瘤耐药细胞系。
背景技术:
1、针对临床上的生长激素型垂体腺瘤,除了手术切除的治疗手段以外,奥曲肽为首选的药物治疗方案,然而部分患者对奥曲肽的疗效不佳,肿瘤的耐药原因尚不明确,同时缺少合适的研究对象来探索生长激素型垂体腺瘤耐药原因。因此,提供一种生长激素型垂体瘤耐药细胞系,用于研究耐药原因是本领域亟待解决的问题。
技术实现思路
1、为弥补现有技术的不足,本发明提供了一种生长激素型垂体瘤耐药细胞系。
2、为实现上述目的,本发明采用如下技术方案:
3、本发明的第一方面提供了一种生长激素型垂体瘤耐药细胞系,其保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为cgmcc no.45626。
4、本发明的第二方面提供了一种衍生自如本发明第一方面所述的生长激素型垂体瘤耐药细胞系的子代细胞系。
5、本发明的第三方面提供了一种试剂,所述试剂包括本发明第一方面所述的生长激素型垂体瘤耐药细胞系或本发明第二方面所述的衍生自生长激素型垂体瘤耐药细胞系的子代细胞系。
6、本发明的第四方面提供了一种试剂盒,所述试剂盒包括本发明第一方面所述的生长激素型垂体瘤耐药细胞系或本发明第二方面所述的衍生自生长激素型垂体瘤耐药细胞系的子代细胞系或本发明第三方面所述的试剂。
7、本发明的第五方面提供了本发明第一方面所述的生长激素型垂体瘤耐药细胞系或本发明第二方面所述的衍生自生长激素型垂体瘤耐药细胞系的子代细胞系在如下任一项中的应用:
8、(1)在制备垂体瘤耐药模型中的应用;
9、(2)在筛选预防和/或治疗垂体瘤的药物中的应用;
10、(3)在筛选垂体瘤耐药逆转药物中的应用;
11、(4)在垂体瘤耐药机制研究中的应用;
12、(5)在评价抗耐药垂体瘤药物、垂体瘤耐药监测或耐药交叉分析中的应用;
13、(6)在制备垂体瘤耐药试剂中的应用;
14、(7)在制备垂体瘤耐药试剂盒中的应用。
15、本发明的第六方面提供了一种构建本发明第一方面所述的生长激素型垂体瘤耐药细胞系的方法,所述方法包括:将垂体腺瘤细胞系接种于含奥曲肽的培养基中共培养,期间不断增加奥曲肽的浓度。
16、进一步,不断增加奥曲肽的浓度包括将奥曲肽的浓度由1-5nm增加至18-30nm。
17、进一步,不断增加奥曲肽的浓度包括将奥曲肽的浓度由2nm增加至20nm。
18、进一步,所述培养基包括dmem/f12、fbs和p/s。
19、进一步,fbs的浓度为10%-20%,p/s的浓度为0.3%-1.5%。
20、进一步,fbs的浓度为15%,p/s的浓度为1%。
21、本发明的第七方面提供了一种制备生长激素型垂体瘤耐药模型的方法,所述方法包括将本发明第一方面所述的生长激素型垂体瘤耐药细胞系或本发明第二方面所述的衍生自生长激素型垂体瘤耐药细胞系的子代细胞系或本发明第三方面所述的试剂施用于动物中。
22、进一步,所述动物为非人动物。
23、本发明的第八方面提供了一种评价抗耐药垂体瘤药物功效的方法,所述方法包括:将一种或多种药物与本发明第一方面所述的生长激素型垂体瘤耐药细胞系或本发明第二方面所述的衍生自生长激素型垂体瘤耐药细胞系的子代细胞系或本发明第三方面所述的试剂接触,测定药物对细胞生长的抑制。
24、生物材料的保藏信息:
25、分类命名:大鼠垂体瘤细胞系gh3;
26、保藏单位:中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(cgmcc);
27、保藏地址:北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所;
28、保藏日期:2023年07月03日;
29、保藏编号:cgmcc no.45626。
30、本发明的优点和有益效果:
31、本发明通过低浓度到高浓度的奥曲肽诱导培养,逐步筛选gh3细胞系中的耐药细胞并稳定传代培养,获得生长能力更强、对奥曲肽治疗不敏感的细胞系,对应临床上的奥曲肽不敏感型生长激素垂体腺瘤,为研究这部分病人的耐药机制提供合适的研究材料。
1.一种生长激素型垂体瘤耐药细胞系,其特征在于,其保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏编号为cgmcc no.45626。
2.一种衍生自如权利要求1所述的生长激素型垂体瘤耐药细胞系的子代细胞系。
3.一种试剂,其特征在于,所述试剂包括权利要求1所述的生长激素型垂体瘤耐药细胞系或权利要求2所述的衍生自生长激素型垂体瘤耐药细胞系的子代细胞系。
4.一种试剂盒,其特征在于,所述试剂盒包括权利要求1所述的生长激素型垂体瘤耐药细胞系或权利要求2所述的衍生自生长激素型垂体瘤耐药细胞系的子代细胞系或权利要求3所述的试剂。
5.权利要求1所述的生长激素型垂体瘤耐药细胞系或权利要求2所述的衍生自生长激素型垂体瘤耐药细胞系的子代细胞系在如下任一项中的应用:
6.一种构建权利要求1所述的生长激素型垂体瘤耐药细胞系的方法,其特征在于,所述方法包括:将垂体腺瘤细胞系接种于含奥曲肽的培养基中共培养,期间不断增加奥曲肽的浓度。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,不断增加奥曲肽的浓度包括将奥曲肽的浓度由1-5nm增加至18-30nm。
8.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,所述培养基包括dmem/f12、fbs和p/s。
9.一种制备生长激素型垂体瘤耐药模型的方法,其特征在于,所述方法包括将权利要求1所述的生长激素型垂体瘤耐药细胞系或权利要求2所述的衍生自生长激素型垂体瘤耐药细胞系的子代细胞系或权利要求3所述的试剂施用于动物中。
10.一种评价抗耐药垂体瘤药物功效的方法,其特征在于,所述方法包括:将一种或多种药物与权利要求1所述的生长激素型垂体瘤耐药细胞系或权利要求2所述的衍生自生长激素型垂体瘤耐药细胞系的子代细胞系或权利要求3所述的试剂接触,测定药物对细胞生长的抑制。