本发明属于食用蛋白质加工，特别是涉及一种大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法。
背景技术：
1、大豆乳清废水（下称豆清水）是生产大豆分离蛋白得到的副产物，豆清水中含有大量可回收利用的物质，如大豆乳清蛋白、大豆低聚糖和大豆异黄酮等，还有尚未完全沉淀的大豆球蛋白，少量脂肪以及磷脂、植酸等物质。
2、大豆乳清蛋白是残存于大豆乳清中不能为酸所沉淀的蛋白质，在大豆乳清蛋白中2s组分所占的比重较大；乳清蛋白质中除含有球蛋白、白蛋白之外，还主要含有：①kunitz胰蛋白酶抑制剂（kti，ph3 .0~10 .0，20kda）；②bowman-brik胰蛋白酶抑制剂（bbi，ph3 .0~10 .0，8kda）；③β-淀粉酶（61 .7kda）；④凝集素（ph2 .2~10 .8，120kda）；⑤脂氧合酶（lox，102kda）等多种生理活性物质，约占大豆蛋白的9%-15.3%。随着研究的不断深入，发现胰蛋白酶抑制剂医药领域具有很大的潜在价值。
3、豆清水在大豆分离蛋白生产过程中作为废水处理，存在处理过程复杂，费用高，处理过程固废难处理等问题。
4、cn114560928a公开了一种基于大豆深加工废液以豆清水为原料粗提sbti蛋白工艺，cn110551208a公开了一种大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法，cn110551209a公开了一种基于大豆深加工废液以豆清水为原料粗提sbti蛋白工艺。其预处理步骤使用碟片离心机+膜处理，其沉淀离心步骤为盐析法。
技术实现思路
1、本发明的大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法，包括以豆清水为原料制备初提物的步骤，所述制备初提物包括以下步骤：
2、s01，预处理：澄清豆清水中的不溶物，得到预处理豆清水；
3、s02，浓缩：将所述预处理豆清水浓缩，得到浓缩豆清水；
4、s03，分离：将所述浓缩豆清水析出豆清蛋白，得到蛋白聚合物，即所述初提物；
5、s01中，所述澄清中使用的助滤剂为豆渣。
6、在本发明的一些实施方式中，s01中，所述澄清为板框压滤澄清或隔膜压滤澄清。
7、在本发明的一些实施方式中，s01中，以豆清水的重量为基准，加入2.0-10.0‰的豆渣。
8、在本发明的一些实施方式中，s01中，以豆清水的重量为基准，加入3.0-8.0‰的豆渣。
9、在本发明的一些实施方式中，s03中，调节所述浓缩豆清水ph，使豆清蛋白析出。
10、在本发明的一些实施方式中，s03中，豆清蛋白析出后，加入聚丙烯酸，搅拌后静置，收获蛋白聚合物，得到所述初提物。
11、在本发明的一些实施方式中，s03中，调节所述浓缩豆清水ph至2.5-4.5。
12、在本发明的一些实施方式中，s03中，调节所述浓缩豆清水ph至3.0-4.0。
13、在本发明的一些实施方式中，s03中，以所述浓缩豆清水的重量为基准，加入4-6‰的聚丙烯酸。
14、在本发明的一些实施方式中，s02中，所述浓缩为对所述预处理豆清水采用超滤法进行蛋白浓缩，并将豆清水中的小分子物质去除。
15、在本发明的一些实施方式中，还包括以下步骤：
16、s04，蛋白聚合物分散，溶解；
17、s05，脱盐、浓缩；
18、所述浓缩结束后，得到大豆胰蛋白酶抑制剂粗提溶液。
19、在本发明的一些实施方式中，s04中，将所述蛋白聚合物加入水分散，调节ph，离心去除聚合物和部分非目标蛋白得到大豆胰蛋白酶抑制剂粗提溶液。
20、在本发明的一些实施方式中，s05中，使用水置换超滤浓缩，得到固形物含量大于10%（w/w）的大豆胰蛋白酶抑制剂粗提溶液。
21、在本发明的一些实施方式中，还包括以下步骤：
22、s6、层析纯化；
23、s7、浓缩干燥。
24、有益效果
25、本发明的大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法，预处理中，使用隔膜压滤，豆渣作为助滤剂。本发明的隔膜压滤加豆渣助滤的方法，与碟片离心机+膜处理相比，一步处理操作简单，豆渣作为助滤剂无新固体废弃物产生。相比之下使用膜设备，占地空间大，在膜清洗时需要大量的水资源，产生大量碱性废水。
26、本发明大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法，采用等电点聚丙烯酸沉降法，与盐析法相比，所得初提物值重量大致相同，酶活更高，经处理的浓缩豆清水产生价值后仍可按照豆清水进行处理，无需额外投入。而且盐析法产生高盐废水需额外投入高盐废水处理设备，本发明降低了助剂原料成本和助剂废水处理成本。分离过程中通过调节ph值，改变蛋白水化层带电情况，使蛋白析出，通过聚丙烯酸使析出蛋白凝聚，从而更好分离。
1.一种大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法，包括以豆清水为原料制备初提物的步骤，其特征在于，所述制备初提物包括以下步骤：
2.根据权利要求1所述的大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法，其特征在于，s01中，所述澄清为板框压滤澄清或隔膜压滤澄清。
3.根据权利要求1或2所述的大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法，其特征在于，s01中，以豆清水的重量为基准，加入2.0-10.0‰的豆渣。
4.根据权利要求3所述的大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法，其特征在于，s01中，以豆清水的重量为基准，加入3.0-8.0‰的豆渣。
5.根据权利要求1所述的大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法，其特征在于，s03中，调节所述浓缩豆清水ph，使豆清蛋白析出。
6.根据权利要求5所述的大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法，其特征在于，s03中，豆清蛋白析出后，加入聚丙烯酸，搅拌后静置，收获蛋白聚合物，得到所述初提物。
7.根据权利要求5或6所述的大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法，其特征在于，s03中，调节所述浓缩豆清水ph至2.5-4.5。
8.根据权利要求7所述的大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法，其特征在于，s03中，调节所述浓缩豆清水ph至3.0-4.0。
9.根据权利要求1所述的大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法，其特征在于，s03中，以所述浓缩豆清水的重量为基准，加入4-6‰的聚丙烯酸。
10.根据权利要求1所述的大豆胰蛋白酶抑制剂的提取方法，其特征在于，s02中，所述浓缩为对所述预处理豆清水采用超滤法进行蛋白浓缩，并将豆清水中的小分子物质去除。