一株鼠李糖乳杆菌及其发酵物和应用的制作方法

本发明涉及微生物，更具体地，涉及一株鼠李糖乳杆菌及其发酵物和应用。

背景技术：

1、乳酸菌是一类广泛应用于食品、化工等领域的益生菌，其代谢产物，如抗菌肽、酸性物质等对食物中部分致病菌和腐败菌的生长具有抑制作用，并且在消化道中可通过占位性竞争方式抑制病原菌。因此，乳酸菌发酵产物在生产抗菌产品如绿色防腐剂或抗菌功能产品方面具有较好的应用价值。

2、现有技术表明不同种类的乳酸菌产生的代谢产物及其抑菌活性差异较大，因此可开发不同种类的乳酸菌应用于抑菌产品或抑菌功能产品；如公告号为cn104818232b的中国发明专利公开了一株具有抑菌活性的植物乳杆菌ab-3，该菌表现出对甜瓜疫霉、甜瓜枯萎菌、娄地青霉和苹果炭疽菌的有效抑制性；公开号为cn104611251a的中国发明专利公开了一株具有广谱抑菌活性的乳酸菌，该菌对多种人和水产养殖生物致病菌均具良好的抑菌作用。同时，同一种类乳酸菌，由于培养时利用的原料不同，也会产生抑菌或其他功能显著差异的发酵物；如公开号为cn104336416a的中国发明专利公开了一株植物乳杆菌及其在苜蓿青贮中的应用，该乳杆菌能够在较低可溶性糖的环境下生长并产酸，对致病菌具有较好的抑菌活性。由此可见，乳酸菌种类、培养基中发酵底物种类、底物性质会直接影响乳酸菌的生长繁殖和代谢产物的形成和积累，从而可用于新抗菌活性的产品的研发。

3、因此，筛选代谢产物抗菌活性高的乳酸菌菌株并研究其发酵底物和发酵条件，并以此生产绿色防腐剂等抗菌产品、后生元等功能产品，具有重要的意义。

技术实现思路

1、本发明的目的是针对上述技术问题，提供一株代谢产物抗菌活性高的乳酸菌，并研究其抗菌代谢产物的发酵底物和发酵条件，以此提供其在生产绿色防腐剂等抗菌产品、后生元等功能产品中的应用。

2、为实现上述目的，本发明采用了以下技术方案：

3、本发明提供了一株鼠李糖乳杆菌(lactobacillus rhamnosus)，命名为st，本鼠李糖乳杆菌(lactobacillus rhamnosus)st已于2023年2月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(china general microbiological culture collectioncenter，cgmcc)菌种保藏地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号；菌种保藏编号为cgmccno.26684。

4、本鼠李糖乳杆菌st来源于泡菜，菌种鉴定为鼠李糖乳杆菌(lacticaseibacillusrhamnosus)，命名为鼠李糖乳杆菌st，所述鼠李糖乳杆菌在培养基中生长，其菌落特征为：菌落直径为1～2mm，乳白色、表面光滑湿润、液滴状、圆形、隆起、边缘整齐。本鼠李糖乳杆菌st及其发酵物具有广谱抑菌性，不仅对金黄色葡萄球菌、巨大芽孢杆菌、痤疮杆菌和屎肠球菌等革兰氏阳性菌具有抑菌作用，而且对大肠杆菌、沙门氏菌、恶臭假单胞菌和沙雷氏菌等革兰氏阴性菌也有抑菌作用。

5、本发明提供了一种鼠李糖乳杆菌st发酵物，由上述鼠李糖乳杆菌st在培养基中发酵得到。

6、本发明提供了上述一种鼠李糖乳杆菌st发酵物的制备方法，包括如下步骤：

7、s1.在培养基中接种鼠李糖乳杆菌，在35～38℃下，发酵12～50h，所述鼠李糖乳杆菌为上述鼠李糖乳杆菌st；

8、s2.将发酵液离心，取上清液进行超滤，所得滤液为鼠李糖乳杆菌st发酵物。

9、进一步地，步骤s1中所述接种鼠李糖乳杆菌前，还需将鼠李糖乳杆菌进行活化。

10、进一步地，步骤s1中所述培养基为乳酸菌培养基。

11、优选地，所述乳酸菌培养基含有如下质量浓度的组分：蛋白胨8～10g/l、牛肉浸粉3～4g/l、酵母粉3～5g/l、葡萄糖18～22g/l、磷酸氢二钾1～3g/l、柠檬酸三铵1～3g/l、醋酸钠4～6g/l、硫酸镁0.1～0.3g/l、硫酸锰0.04～0.06g/l、吐温80 1-3g/l。

12、更进一步地，步骤s1中所述鼠李糖乳杆菌st在培养基中的接种量为0.1％～10％。

13、进一步地，步骤s1中所述培养基中含有透明质酸或透明质酸盐。

14、优选地，所述透明质酸盐可以为透明质酸钠盐、透明质酸钾盐、透明质酸镁盐中的一种或几种。

15、更进一步地，步骤s1中所述透明质酸或透明质酸盐的分子量为1kda～1800kda。

16、优选地，步骤s1中所述透明质酸或透明质酸盐的分子量为1kda～190kda。

17、更进一步地，步骤s1中所述透明质酸或透明质酸盐在培养基中的质量浓度为0.1％～10％。

18、优选地，步骤s1中所述透明质酸或透明质酸盐在培养基中的质量浓度为1％～2％。

19、优选地，步骤s2中所述超滤采用10kda滤膜。

20、进一步地，本发明请求保护上述鼠李糖乳杆菌st发酵物的制备方法制备得到的鼠李糖乳杆菌st发酵物。

21、进一步地，本发明还提供了上述鼠李糖乳杆菌st或上述鼠李糖乳杆菌st发酵物在生产抗菌产品或抗菌功能产品中的应用。

22、本发明提供了一种后生元复合物，含有上述鼠李糖乳杆菌st和/或鼠李糖乳杆菌st发酵物。

23、本发明提供了一种抗菌剂，含有鼠李糖乳杆菌st和/或鼠李糖乳杆菌st发酵物。

24、本发明提供了一种抑菌喷鼻剂，包括鼠李糖乳杆菌st发酵物和生理盐水，所述鼠李糖乳杆菌st发酵物和生理盐水的质量比为1：40-60。

25、本发明提供了一种口腔抑菌喷剂，包括以下重量份的组分：山梨糖醇70-90份、上述鼠李糖乳杆菌st发酵物1-20份、海盐7-9份、薄荷醇2-4份、甘草提取物10-20份、忍冬提取物10-20份、水400-600份。

26、本发明的有益效果是：

27、(1)本发明提供的鼠李糖乳杆菌st能够代谢产生抑菌作用的蛋白或多肽，可以对多个革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌具有抑制效果，抗菌活性高，具有广谱抑菌性。

28、(2)以本鼠李糖乳杆菌st在含有透明质酸的培养基中发酵培养得到的鼠李糖乳杆菌st发酵物的抑菌效果得到显著提升，抑菌效果更好。

29、(3)本发明的鼠李糖乳杆菌st及其发酵物可应用于生产抗菌产品或抗菌功能产品，如抗菌剂、后生元复合物、抑菌喷鼻剂或口腔抑菌喷剂等，具有重要的应用价值。

技术特征：

1.一株鼠李糖乳杆菌(lactobacillus rhamnosus)st，其特征在于，所述鼠李糖乳杆菌st于2023年2月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no：26684。

2.一种鼠李糖乳杆菌st发酵物的制备方法，其特征在于，由权利要求1所述鼠李糖乳杆菌st在培养基中发酵得到鼠李糖乳杆菌st发酵物。

3.根据权利要求2所述鼠李糖乳杆菌st发酵物的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

4.根据权利要求3所述鼠李糖乳杆菌st发酵物的制备方法，其特征在于，步骤s1中所述培养基为乳酸菌培养基。

5.根据权利要求3所述鼠李糖乳杆菌st发酵物的制备方法，其特征在于，步骤s1中所述鼠李糖乳杆菌st在培养基中的接种量为0.1％～10％。

6.根据权利要求3-5任一项所述鼠李糖乳杆菌st发酵物的制备方法，其特征在于，步骤s1中所述培养基中含有透明质酸或透明质酸盐。

7.根据权利要求6所述鼠李糖乳杆菌st发酵物的制备方法，其特征在于，步骤s1中所述透明质酸或透明质酸盐的分子量为1kda～2000kda。

8.根据权利要求6所述鼠李糖乳杆菌st发酵物的制备方法，其特征在于，步骤s1中所述透明质酸或透明质酸盐在培养基中的质量浓度为0.1％～10％。

9.根据权利要求2-8任一项所述制备方法制备得到的鼠李糖乳杆菌st发酵物。

10.权利要求1所述鼠李糖乳杆菌st或权利要求9所述鼠李糖乳杆菌st发酵物在生产抗菌产品或抗菌功能产品中的应用。

技术总结
本发明公开了一株鼠李糖乳杆菌及其发酵物和应用。本鼠李糖乳杆菌(Lactobacillus rhamnosus)ST于2023年2月27日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC NO：26684。该鼠李糖乳杆菌ST能够代谢产生具有抑菌作用的蛋白或多肽，对多个革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌抗菌活性高，具有广谱抑菌性。进一步地，以本鼠李糖乳杆菌ST在含有透明质酸的培养基中发酵培养得到的发酵物的抑菌效果得到显著提升。本发明的鼠李糖乳杆菌ST及其发酵物可应用于生产抗菌产品或抗菌功能产品，如抗菌剂、后生元复合物、抑菌喷鼻剂或口腔抑菌喷剂等，具有重要的应用价值。

技术研发人员：蒋敏,李恒,钱建瑛,龚劲松,许泓瑜
受保护的技术使用者：无锡清淞泉生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16