一种dsRNA在防治溴氰虫酰胺抗性烟粉虱中的应用

本发明涉及农药，具体是一种dsrna在防治溴氰虫酰胺抗性烟粉虱中的应用。

背景技术：

1、烟粉虱属于半翅目粉虱科，是一种世界性农业害虫，可危害400多种植物，传播200多种植物病毒。溴氰虫酰胺作为第一个广谱性的双酰胺类杀虫剂，可以通过结合并激活昆虫体内的鱼尼丁受体，引起内质网ca2+大量释放，致使细胞内外钙离子失衡，最终导致昆虫死亡，但目前烟粉虱已经对溴氰虫酰胺产生了明显的抗药性。

2、mirna(microrna)是内源性的非编码单链小rna，主要通过参与基因的转录后调控，来实现对靶基因的表达调节。mirna的功能具有多样性，可参与动植物的生长发育、机体疾病的发生和发展等。mirna的生物合成是一个复杂的过程，mirna基因在rna聚合酶的作用下转录生成长度约为几千个碱基的初级转录本(pri-mirna)，随后在drosha的作用下进一步被加工成长度为60-80个碱基且具有茎环结构的前体mirna(pre-mirna)，pre-mirna被转运到细胞质中，细胞质中的dicer识别pre-mirna，通过对茎环结构进行剪切和修饰，形成长度为20-24个碱基的双链mirna；双链mirna中的其中一条链被转载到rna诱导沉默复合体(risc)，最终生成成熟的、具有功能的单链mirna，risc中的argonaute(ago)将复合物引导至信使rna(mrna)并发挥其调节功能。

3、为了治理烟粉虱对溴氰虫酰胺杀虫剂的抗药性，本发明拟选择mirna生物合成途径中的上述三个关键蛋白drosha、dicer和ago来评估其在杀虫剂抗性中的作用，寻找新的溴氰虫酰胺抗性烟粉虱防治方法。

技术实现思路

1、针对上述问题，本发明发现并证实了mirna合成路径中的关键基因drosha、dicer1和ago2a与烟粉虱对溴氰虫酰胺的抗药性有关，当烟粉虱取食drosha、dicer1或ago2a的dsrna后，三个基因的表达水平降低，烟粉虱对溴氰虫酰胺抗性水平下降，为研发新的溴氰虫酰胺抗性烟粉虱防治方法奠定了良好的理论和应用基础。

2、本发明技术方案如下：

3、一种dsrna在防治溴氰虫酰胺抗性烟粉虱中的应用，所述dsrna为dsdrosha、dsdicer1或dsago2a中的一种或多种；其中，所述dsdrosha的核苷酸序列如seq id no.1所示，所述dsdicer1的核苷酸序列如seq id no.2所示，所述dsago2a的核苷酸序列如seq idno.3所示。

4、优选的，应用方法是通过对烟粉虱喂食dsdrosha、dsdicer1或dsago2a调控烟粉虱体内drosha、dicer1或ago2a的表达量，从而抑制mirna的合成。

5、优选的，所述喂食dsdrosha、dsdicer1或dsago2a的方法为：用含有dsdrosha、dsdicer1或dsago2a的蔗糖水喂食烟粉虱。

6、优选的，所述蔗糖水中蔗糖的浓度为0.17～0.23mg/l。

7、优选的，所述蔗糖水中蔗糖的浓度为0.2mg/l。

8、优选的，所述dsdrosha、dsdicer1或dsago2a在蔗糖水中的浓度为250ng/μl。

9、一种抑制生物体内mirna合成的方法，是用含有dsdrosha、dsdicer1或dsago2a的蔗糖水对生物体进行喂食。

10、优选的，所述蔗糖水中蔗糖的浓度为0.17～0.23mg/l。

11、优选的，所述蔗糖水中蔗糖的浓度为0.2mg/l。

12、优选的，所述dsdrosha、dsdicer1或dsago2a在蔗糖水中的浓度为250ng/μl。

13、有益效果：

14、本发明发现并证实了mirna合成路径中的关键基因drosha、dicer1和ago2a与烟粉虱对溴氰虫酰胺的抗药性有关，当烟粉虱取食drosha、dicer1或ago2a的dsrna后，可降低烟粉虱体内drosha、dicer1或ago2a的表达水平，进而抑制烟粉虱体内mirna的合成，最终降低烟粉虱对溴氰虫酰胺的抗性，为研发新的溴氰虫酰胺抗性烟粉虱防治方法奠定了良好的理论和应用基础。

技术特征：

1.一种dsrna在防治溴氰虫酰胺抗性烟粉虱中的应用，其特征在于，所述dsrna为dsdrosha、dsdicer1或dsago2a中的一种或多种；其中，所述dsdrosha的核苷酸序列如seqid no.1所示，所述dsdicer1的核苷酸序列如seq id no.2所示，所述dsago2a的核苷酸序列如seq id no.3所示。

2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，应用方法是通过对烟粉虱喂食dsdrosha、dsdicer1或dsago2a调控烟粉虱体内drosha、dicer1或ago2a的表达量，从而抑制mirna的合成。

3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述喂食dsdrosha、dsdicer1或dsago2a的方法为：用含有dsdrosha、dsdicer1或dsago2a的蔗糖水喂食烟粉虱。

4.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述蔗糖水中蔗糖的浓度为0.17～0.23mg/l。

5.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述蔗糖水中蔗糖的浓度为0.2mg/l。

6.如权利要求3所述的应用，其特征在于，所述dsdrosha、dsdicer1或dsago2a在蔗糖水中的浓度为250ng/μl。

7.一种抑制生物体内mirna合成的方法，其特征在于，是用含有dsdrosha、dsdicer1或dsago2a的蔗糖水对生物体进行喂食。

8.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述蔗糖水中蔗糖的浓度为0.17～0.23mg/l。

9.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述蔗糖水中蔗糖的浓度为0.2mg/l。

10.如权利要求7所述的方法，其特征在于，所述dsdrosha、dsdicer1或dsago2a在蔗糖水中的浓度为250ng/μl。

技术总结
本发明提供了一种dsRNA在防治溴氰虫酰胺抗性烟粉虱中的应用，属于农药技术领域，所述dsRNA为dsDrosha、dsDicer1或dsAgo2A中的一种或多种；本发明发现并证实了miRNA合成路径中的关键基因drosha、dicer1和Ago2A与烟粉虱对溴氰虫酰胺的抗药性有关，当取食dsDrosha、dsDicer1或dsAgo2A后，烟粉虱体内的drosha、dicer1或Ago2A表达量下降，从而抑制烟粉虱体内miRNA的合成，降低了烟粉虱对溴氰虫酰胺的抗性。

技术研发人员：郭磊,温赞荣,李凯欣,陈沫先
受保护的技术使用者：青岛农业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16