一种培养基及其制备方法与流程

本发明涉及微生物检测领域，具体涉及一种培养基及其制备方法。

背景技术：

1、金黄色葡萄球菌在自然界中分布广泛，且适应不同环境的能力较强，金黄色葡萄球菌是引发细菌性食物中毒的主要致病菌之一，对人类及动物生命健康、食品安全和公共卫生造成潜在威胁，还可以引起多种人体感染，主要为皮肤或黏膜感染以及败血性感染。因此对金黄色葡萄球菌进行快速而准确的检测十分重要。

2、现行gb4789.10分离金黄色葡萄球菌通常采用血平板、baird-parke培养基分离葡萄球菌，但因血平板需要新鲜羊血，通常食品检测、防疫检测站都不具备相应条件。而目前baird-parke培养基配方中均含有氯化锂。氯化锂是白色的晶体，具有潮解性，味咸，易溶于水、乙醇、丙酮、吡啶等有机溶剂，尽管其属于低毒类物质，但对眼睛和粘膜具有强烈的刺激和腐蚀作用，因此，氯化锂在一定程度上对于培养基的生产安全，使用安全都有影响。另外，培养基的透明度对实验结果的判断有很大影响，而现有的培养基的透明度使得在判断实验结果时需要仔细甄别，容易产生误判。因此，有必要对培养基进行进一步的改进。

技术实现思路

1、本发明通过反复实验对baird-parker培养基进行优化改进，去除了氯化锂的使用，让培养基配制起来更简单安全。因此，本发明的第一方面提供了一种培养基，其组成包括：胰蛋白胨、牛肉膏粉、酵母膏粉、丙酮酸钠、甘氨酸和琼脂，但不包括氯化锂。

2、进一步优化的，本发明提供的培养基还包括卡拉胶。

3、在本发明的一个具体实施方式中，本发明第一方面的培养基包括基础培养基和增菌剂，其中每升基础培养基的组分及含量为：胰蛋白胨12-14g，牛肉膏粉2-3g，酵母膏粉5-7g，丙酮酸钠10-12g，甘氨酸10-12g，琼脂12-15g，卡拉胶0.2-0.4g。

4、同时，本发明提供了一种基础培养基，该基础培养基为粉末状，包括：胰蛋白胨、牛肉膏粉、酵母膏粉、丙酮酸钠、甘氨酸和琼脂，且不包括氯化锂。

5、进一步优化的，上述基础培养基还包括卡拉胶。

6、在本发明的一种具体实施方式中，上述基础培养基包括：20.6-24％的胰蛋白胨、3.4％-5％的牛肉膏粉、8.6％-12％的酵母膏粉、17.2％-20.6％的丙酮酸钠、17.2％-20.6％的甘氨酸、20.6％-25.8％的琼脂、0.34％-0.69％的卡拉胶，按质量分数计。

7、本发明的第二方面提供了一种培养基的制备方法，该方法具体包括：将第一方面中的各成分加到蒸馏水或去离子水中，加热煮沸至完全溶解，再调节ph值至7.0±0.2，后分装灭菌保存。

8、本发明的有益效果在于：通过实验验证，本发明优化后的培养基中去除了氯化锂，解决了生产安全、使用安全、环境污染等由氯化锂所带来的相关问题，实现并优于原有效果。此外，本发明加入卡拉胶后的优化方案能进一步改善培养基平板的致密性问题，在接上金黄色葡萄球菌后，使得含有卵磷脂酶的葡萄球菌降解卵黄使菌落产生的透明圈更容易识别，从而更加容易判断实验结果，不容易出错，节省时间避免出错。

技术特征：

1.一种培养基，其特征在于，所述培养基包括胰蛋白胨、牛肉膏粉、酵母膏粉、丙酮酸钠、甘氨酸和琼脂，且不包括氯化锂。

2.如权利要求1所述的培养基，其特征在于，还包括卡拉胶。

3.如权利要求2所述的培养基，其特征在于，所述培养基包括基础培养基和增菌剂，每升所述基础培养基中包括：胰蛋白胨12-14g、牛肉膏粉2-3g、酵母膏粉5-7g、丙酮酸钠10-12g、甘氨酸10-12g、琼脂12-15g、卡拉胶0.2-0.4g。

4.如权利要求3所述的培养基，其特征在于，所述增菌剂为亚碲酸盐卵黄增菌液。

5.一种基础培养基，其特征在于，所述基础培养基为粉末状，包括：胰蛋白胨、牛肉膏粉、酵母膏粉、丙酮酸钠、甘氨酸和琼脂，且不包括氯化锂。

6.如权利要求5所述的基础培养基，其特征在于，所述基础培养基还包括卡拉胶。

7.如权利要求6所述的基础培养基，其特征在于，所述基础培养基包括：20.6-24％的胰蛋白胨、3.4％-5％的牛肉膏粉、8.6％-12％的酵母膏粉、17.2％-20.6％的丙酮酸钠、17.2％-20.6％的甘氨酸、20.6％-25.8％的琼脂、0.34％-0.69％的卡拉胶，按质量分数计。

8.一种培养基制备方法，其特征在于，包括：将如权利要求1或2所述的培养基的各组分加到蒸馏水或去离子水中，加热煮沸至完全溶解，再调节ph值至7.0±0.2，后分装灭菌保存。

9.如权利要求8中所述的制备方法，其特征在于，所述培养基的制备方法还包括增菌剂的制备，所述增菌剂的制备方法为每60ml亚碲酸盐卵黄增菌液采用30％卵黄盐水50ml与过滤除菌的1％亚碲酸钾溶液10ml混合制备得到。

技术总结
本发明提供了一种培养基及其制备方法，其中，该培养基的组成包括胰蛋白胨、牛肉膏粉、酵母膏粉、丙酮酸钠、甘氨酸和琼脂，但不包括氯化锂。该培养基还可进一步包括卡拉胶。同时，本发明还提供了上述培养基的制备方法。通过实验验证，本发明优化后的培养基中去除了氯化锂，解决了生产安全、使用安全、环境污染等由氯化锂所带来的相关问题，实现并优于原有效果。此外，本发明加入卡拉胶后的优化方案能进一步改善培养基平板的致密性问题，在接上金黄色葡萄球菌后，使得含有卵磷脂酶的葡萄球菌降解卵黄使菌落产生的透明圈更容易识别，从而更加容易判断实验结果，不容易出错，节省时间避免出错。

技术研发人员：蒋廉良,叶文意,李莹莹,肖钢军,陈高明,胡玉梅
受保护的技术使用者：深圳逗点生物技术有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15