一种黑莓种籽蛋白及其提取方法

本发明属于黑莓种籽深加工，具体地说，涉及一种黑莓种籽蛋白及其提取方法。

背景技术：

1、蛋白质是生命活动的基础和细胞的有机质，在生物体的新陈代谢中起着调节作用。蛋白质根据食物来源分为植物蛋白和动物蛋白。动物提供的肉、蛋和奶是动物蛋白质的重要来源，植物蛋白质的摄入主要通过种子中的蛋白质，如豆类、谷物、坚果等。近年来，植物蛋白因其来源广泛、生产周期短、价格低廉而备受关注。植物蛋白的饱和脂肪酸和热量比动物蛋白低得多，更引人注目的是它不含胆固醇。摄入比动物蛋白质更多的植物蛋白质可以降低患心血管疾病、糖尿病、癌症的风险，甚至有利于体重管理。研究还表明，植物蛋白在人类健康和营养中发挥着重要作用，这使得它在食品加工中成为一种功能性成分。

2、种籽蛋白是一种高质量的植物蛋白，具有抗菌、免疫、抗氧化、抗高血压、抗高脂血症、抗增殖等生物活性。种籽蛋白具有许多重要的功能特性，如乳化稳定性、发泡稳定性、胶凝性、保水保油性等。这些特性可以有效提高食品的质量和保存时间，甚至具有改善食品口感、增加弹性、保水吸油的营养特性。

3、黑莓是蔷薇科的一种小浆果。由于花青素含量高，具有抗氧化、抗炎、抗菌、抗癌等良好的生物活性，引起了人们的广泛关注。这种浆果被称为“生命果实”，通常以新鲜或加工的形式食用。在加工果汁、果酒、果醋等常规产品的过程中，会产生大量占20%~30%的果渣，这些果渣通常被丢弃或作为肥料处理，不仅会造成环境污染，还会浪费自然资源。先前的研究发现，黑莓果渣中种籽占比极大，其中含有碳水化合物、多酚、类黄酮、果胶、蛋白质等生物活性营养成分，有些成分甚至高于果渣和果汁的含量。然而，黑莓果渣多被粗犷利用，关于黑莓种籽中蛋白的提取及组成等尚未见报道，而传统的osborne 法并不适合所有种类的植物蛋白提取。为实现黑莓种籽的高附加值利用，探索适合黑莓种籽的蛋白提取方式具有重要意义。

技术实现思路

1、针对现有技术存在的上述问题，本发明的目的在于提供一种黑莓种籽蛋白及其提取方法。

2、为了解决上述问题，本发明所采用的技术方案如下：

3、一种黑莓种籽蛋白提取方法，包括以下步骤：

4、1) 黑莓籽粉在有机溶剂中密闭、无氧的压力容器中进行亚临界萃取处理，过滤，除去溶剂并干燥得到黑莓洗脱粉；

5、2) 将黑莓洗脱粉加入碱液中，用打浆机疏解3-5min，然后在40-50℃下超声处理1-2 h，过滤，取上清液，进行过氧化氢脱色处理，得到总蛋白液；

6、3) 向总蛋白液中加入调节液，调节至中性，搅拌、离心，得到上清液1和不溶物1，分离上清液1得到清蛋白；

7、向不溶物1中加入nacl溶液，搅拌、离心，得到上清液2和不溶物2，分离上清液2得到球蛋白；

8、向不溶物2中加入乙醇溶液，搅拌、离心，得到上清液3和不溶物3，分离上清液3得到醇溶蛋白；

9、向不溶物3中加入碱液，在35℃下搅拌、离心，分离上清液4得到谷蛋白。

10、可选地，步骤1)中所述亚临界萃取的有机溶剂为丁烷；黑莓籽与有机溶剂用量比为1kg:(1-2)l；萃取温度为40-50℃，压力0.3-0.6mpa，时间30-90min。

11、可选地，步骤1)中所述黑莓籽粉为过60目筛后黑莓籽的粉末。

12、可选地，步骤2)中所述黑莓洗脱粉与碱液质量比为1：(10-25)；碱液为ph为11-12；超声功率为300-600 w。

13、可选地，步骤2)中过氧化氢脱色处理中脱色温度35-45℃。

14、可选地，步骤3)中所述得到上清液1的过程中先在35℃下搅拌2 h，然后在10000r/min下离心30min。

15、可选地，步骤3)中所述得到上清液2的过程中，采用不溶物1的10倍质量的质量分数2％nacl溶液，先在35℃下搅拌2 h，然后在4000r/min下离心30min。

16、可选地，步骤3)中所述得到上清液3的过程中，采用不溶物2的10倍质量的质量分数75％乙醇，先在35℃下搅拌2 h，然后在4000r/min下离心30min。

17、根据上述方法得到的黑莓种籽蛋白。

18、相比于现有技术，本发明的有益效果为：

19、本发明首创性的对黑莓种籽蛋白进行了提取，并且针对黑莓种籽质地坚硬且含有高价值黑莓籽油的特点设计了特殊的提取工艺，利用亚临界萃取方法不仅实现了黑莓籽的脱脂处理，并且，将黑莓籽油完好不受破坏的保存在亚临界萃取所得上清液中，减少了油脂氧化劣变或活性成分的损失，并且亚临界萃取较温和的处理环境液可避免蛋白质被破坏，可实现黑莓种籽的多重利用。将黑莓洗脱粉加至碱液中，并配合打浆和超声，可破坏纤维-蛋白的结构并打开氢键，相比未处理的黑莓洗脱粉，显著提高了蛋白的溶出率；同时，经过滤除去部分纤维类物质，降低了黑莓籽粉的处理难度，提高蛋白提取效率。本发明对四种蛋白提取率高，提取出了具有不同的功能特性的蛋白。

技术特征：

1.一种黑莓种籽蛋白提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种黑莓种籽蛋白提取方法，其特征在于，步骤1)中所述亚临界萃取的有机溶剂为丁烷；黑莓籽与有机溶剂用量比为1kg:(1-2)l；萃取温度为40-50℃，压力0.3-0.6mpa，时间30-90min。

3.根据权利要求1所述的一种黑莓种籽蛋白提取方法，其特征在于，步骤1)中所述黑莓籽粉为过60目筛后黑莓籽的粉末。

4. 根据权利要求1所述的一种黑莓种籽蛋白提取方法，其特征在于，步骤2)中所述黑莓洗脱粉与碱液质量比为1：(10-25)；碱液为ph为11-12；超声功率为300-600 w。

5.根据权利要求1所述的一种黑莓种籽蛋白提取方法，其特征在于，步骤2)中过氧化氢脱色处理中脱色温度35-45℃。

6. 根据权利要求1所述的一种黑莓种籽蛋白提取方法，其特征在于，步骤3)中所述得到上清液1的过程中先在35℃下搅拌2 h，然后在10000r/min下离心30min。

7. 根据权利要求1所述的一种黑莓种籽蛋白提取方法，其特征在于，步骤3)中所述得到上清液2的过程中，采用不溶物1的10倍质量的质量分数2％nacl溶液，先在35℃下搅拌2h，然后在4000r/min下离心30min。

8. 根据权利要求1所述的一种黑莓种籽蛋白提取方法，其特征在于，步骤3)中所述得到上清液3的过程中，采用不溶物2的10倍质量的质量分数75％乙醇，先在35℃下搅拌2 h，然后在4000r/min下离心30min。

9.根据权利要求1-8方法得到的黑莓种籽蛋白。

技术总结
本发明属于黑莓种籽深加工技术领域，具体涉及一种黑莓种籽蛋白及其提取方法。本发明首先将黑莓籽粉在有机溶剂中进行亚临界萃取处理，经净化干燥得到黑莓洗脱粉；再将黑莓洗脱粉加入碱液中，先用打浆机疏解，再在40‑50℃下超声处理，过滤，取上清液，进行脱色处理，得到总蛋白液；然后依次提取其中的清蛋白、球蛋白、醇溶蛋白和谷蛋白。本发明首创性的对黑莓种籽蛋白进行了提取，并且针对黑莓种籽的特点设计了特殊的提取工艺，利用亚临界萃取方法不仅实现了黑莓籽的脱脂处理，并且，将黑莓籽油完好保存，可实现黑莓种籽的多重利用。将黑莓洗脱粉加至碱液中，并配合打浆疏解与超声作用，显著提高了蛋白的溶出率，降低黑莓籽粉的处理难度。

技术研发人员：赵俸艺,吴文龙,王邵熠,闾连飞,李维林
受保护的技术使用者：江苏省中国科学院植物研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/1/22