一种鉴定黄瓜雌性强弱的引物组、试剂盒及其应用

本发明涉及生物，特别是涉及一种鉴定黄瓜雌性强弱的引物组、试剂盒及其应用。

背景技术：

1、华北密刺型黄瓜是我国黄瓜生产和消费量最大的品种，在蔬菜生产和供应保障中占有重要地位。长期以来我国市场上华北密刺型黄瓜的杂交一代商品种多为雌花、雄花都有的雌雄同株普通性型，近年来只有雌花而少或无雄花的强雌和全雌性型华北密刺型黄瓜由于产量高、制种纯度高且成本低，备受市场青睐。然而目前缺乏快捷准确、高通量检测华北密刺型黄瓜杂交一代商品种及品系雌性强弱的手段和引物，严重制约了强雌和全雌性型华北密刺型黄瓜的鉴定与选育。

技术实现思路

1、为了解决上述问题，本发明提供了一种鉴定黄瓜雌性强弱的引物组、试剂盒及其应用。本发明提供的引物组可以快速准确的检测华北密刺型黄瓜的雌性强弱，具有十分广阔的应用前景。

2、为了实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、本发明提供了一种鉴定黄瓜性型的引物组，包括第一引物对和第二引物对；所述第一引物对的正向引物的核苷酸序列如seq id no.1所示，所述第一引物对的反向引物的核苷酸序列如seq id no.2所示；所述第二引物对的正向引物的核苷酸序列如seq id no.3所示，所述第二引物对的反向引物的核苷酸序列如seq id no.4所示。

4、本发明提供了一种鉴定黄瓜性型的试剂盒，包括上述技术方案所述的引物组。

5、优选的，所述试剂盒还包括pcr扩增所用的其他试剂。

6、优选的，所述其他试剂包括2×sybr premix ex taq和ddh2o。

7、本发明提供了上述技术方案所述的引物组或上述技术方案所述的试剂盒在鉴定黄瓜性型中的应用。

8、优选的，所述黄瓜的品种包括华北密刺型黄瓜。

9、本发明提供了一种鉴定黄瓜性型的方法，包括如下步骤：

10、以待测黄瓜的基因组dna为模板，利用上述技术方案所述引物组中的第一引物对和第二引物对分别进行实时荧光定量pcr扩增，将第一引物对扩增的ct值减去第二引物对扩增的ct值，得到δct；

11、以2-δct值判定待测黄瓜的性型，所述判定包括：

12、当0.85< 2-δct<1.15时，判定为普通性型；

13、当2-δct>1.35时，判定为雌性性型。

14、优选的，当1.35< 2-δct<1.65时，判定为强雌性型；当2-δct>1.85时，判定为全雌性型。

15、优选的，所述待测黄瓜的品种包括华北密刺型黄瓜。

16、有益效果：

17、本发明提供了一种鉴定黄瓜性型的引物组，包括第一引物对和第二引物对；所述第一引物对的正向引物的核苷酸序列如seq id no.1所示，所述第一引物对的反向引物的核苷酸序列如seq id no.2所示；所述第二引物对的正向引物的核苷酸序列如seq id no.3所示，所述第二引物对的反向引物的核苷酸序列如seq id no.4所示。本发明提供的引物组可在黄瓜的种子或幼苗期进行早期鉴定，用于华北密刺型黄瓜材料尤其是杂交一代商品种的雌性强弱鉴定，并为加快强雌和全雌性型华北密刺型黄瓜材料选育提供技术支持。另外，本发明提供的检测方法具有高通量、准确、低成本、操作简单、节约人力和时间的优点，具有十分广阔的应用前景。

技术特征：

1.一种鉴定黄瓜性型的引物组，其特征在于，包括第一引物对和第二引物对；所述第一引物对的正向引物的核苷酸序列如seq id no.1所示，所述第一引物对的反向引物的核苷酸序列如seq id no.2所示；所述第二引物对的正向引物的核苷酸序列如seq id no.3所示，所述第二引物对的反向引物的核苷酸序列如seq id no.4所示。

2.一种鉴定黄瓜性型的试剂盒，其特征在于，包括权利要求1所述的引物组。

3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括pcr扩增所用的其他试剂。

4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，所述其他试剂包括2×sybr premix extaq和ddh2o。

5.权利要求1所述的引物组或权利要求2~4任一项所述的试剂盒在鉴定黄瓜性型中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述黄瓜的品种包括华北密刺型黄瓜。

7.一种鉴定黄瓜性型的方法，其特征在于，包括如下步骤：

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，当1.35< 2-δct<1.65时，判定为强雌性型；当2-δct>1.85时，判定为全雌性型。

9.根据权利要求7或8所述的方法，其特征在于，所述待测黄瓜的品种包括华北密刺型黄瓜。

技术总结
本发明涉及生物技术领域，特别是涉及一种鉴定黄瓜雌性强弱的引物组、试剂盒及其应用。本发明提供的引物组可在黄瓜的种子或幼苗期进行早期鉴定，用于华北密刺型黄瓜材料尤其是杂交一代商品种的雌性强弱鉴定，并为加快强雌和全雌性型华北密刺型黄瓜材料选育提供技术支持。另外，本发明提供的检测方法具有高通量、准确、低成本、操作简单、节约人力和时间的优点，具有十分广阔的应用前景。

技术研发人员：毛爱军,温常龙,王航,张建,杨静静,罗江,张成栋,黄继君,张晓飞,夏昌选,赵泓,田守蔚
受保护的技术使用者：北京市农林科学院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/16