杂交瘤细胞株及其分泌的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体与应用

本发明涉及生物医药，尤其涉及一种杂交瘤细胞株及其分泌的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体与应用。

背景技术：

1、猫泛白细胞减少症(feline panleukopenia)是一种严重的猫科动物病毒感染疾病，由猫泛白细胞减少症病毒(feline panleukopenia virus，fpv)引起。猫泛白细胞减少症病毒感染的临床表现严重程度因病毒感染程度和猫的免疫状态而有所不同，对于未接种疫苗或免疫力较弱的猫，感染可能会导致严重并潜在致命的后果。由于猫泛白细胞减少症病毒具有较强的传染性和致病性，fpv易于在猫群中广泛传播，对于年龄较小或未接种疫苗的猫具有更高的感染风险。目前，针对猫泛白细胞减少症的治疗方法主要是采取支持性疗法，如液体补给、抗生素治疗和免疫增强剂，以缓解症状并增强免疫力。然而，这些方法仅提供临时的对症支持，无法直接干预病毒的复制过程或修复免疫系统的损伤，从而无法有效控制疾病的进展。

2、单克隆抗体技术已经在人类医药领域展示出了巨大的成功潜力。单克隆抗体是一种具有高度特异性和亲和力的抗体分子，能够与病原体特定的抗原结合，并发挥多种功能，如中和病毒、调节免疫反应等。在抗病毒治疗中，单克隆抗体可以通过中和病毒粒子的功能，直接抑制病毒的复制和传播。此外，单克隆抗体还可以调节免疫系统的功能，增强机体的免疫反应或抑制过度激活的炎症反应。

3、目前，针对猫泛白细胞减少症病毒的中和抗体的研究相对有限，市场上尚缺乏可用于治疗猫泛白细胞减少症的特异性单克隆抗体产品。公开号为cn114807053a的专利提供了一种猫细小病毒中和性单克隆抗体及其应用，该专利中提供的杂交瘤细胞能够分泌产生猫细小中和单克隆抗体，用于特异性地治疗fpv。但是，该专利中获得的单克隆抗体的中和效价较低，且不能对不同的fpv毒株起到交叉保护的效果，在实际应用中具有一定的局限性。

4、有鉴于此，有必要提供一种新的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体，以解决上述问题。

技术实现思路

1、针对上述现有技术的缺陷，本发明的目的在于提供一种杂交瘤细胞株及其分泌的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体与应用，使其对不同的fpv毒株均具有较高的中和效价。

2、为实现上述目的，本发明提供了一种杂交瘤细胞株，命名为杂交瘤细胞株fpv-2a6，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no：c2023297。

3、本发明还提供了一种猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体，由杂交瘤细胞株fpv-2a6分泌得到。

4、作为本发明的进一步改进，所述单克隆抗体的轻链可变区的氨基酸序列如seq idno:1所示；所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列如seq id no:2所示。

5、作为本发明的进一步改进，编码所述轻链可变区的氨基酸序列的核苷酸序列如seq id no:3所示；编码所述重链可变区的氨基酸序列的核苷酸序列如seq id no:4所示。

6、作为本发明的进一步改进，所述单克隆抗体的重链亚类为igg1、轻链亚型为κ链。

7、作为本发明的进一步改进，所述单克隆抗体对genbank id为oq815871的fpv-10毒株、genbank id为oq815872的fpv-15毒株、genbank id为oq815873的fpv-251毒株、genbankid为oq815874的fpv-271毒株和genbank id为oq815875的fpv-s2毒株均具有中和特性。

8、作为本发明的进一步改进，所述单克隆抗体对所述fpv-10毒株、fpv-15毒株、fpv-251毒株、fpv-271毒株和fpv-s2毒株的中和效价均不低于1:5010。

9、作为本发明的进一步改进，所述单克隆抗体为纯化后的鼠源单克隆抗体，所述鼠源单克隆抗体通过向小鼠腹腔注射所述杂交瘤细胞株fpv-2a6的方式获得。

10、作为本发明的进一步改进，所述纯化的方式为亲和层析纯化。

11、本发明还提供了所述单克隆抗体在制备用于预防或治疗猫泛白细胞减少症的药物中的应用。

12、本发明的有益效果是：

13、本发明提供的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体由能够稳定传代并分泌单抗的杂交瘤细胞株fpv-2a6分泌产生，是针对fpv的特异性抗体，具有较高的亲和力和中和能力，可在细胞水平和动物水平上抑制病毒的复制和传播，从而有效治疗猫泛白细胞减少症。该单克隆抗体与fcv、fhv等其他病毒不发生交叉反应，但对于不同的fpv毒株具有交叉保护能力，且均能够达到较高的中和效价。利用本发明提供的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体能够显著改善感染猫泛白细胞减少症病毒的患猫的健康状况，有效减轻病情并提高生存率，且无明显的副作用，具有重要的临床意义和广阔的市场前景。此外，本发明提供的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体还具有荧光特异性，能够对猫泛白细胞减少症病毒所感染组织进行免疫组织化学染色。

技术特征：

1.一种杂交瘤细胞株，其特征在于：命名为杂交瘤细胞株fpv-2a6，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为cctcc no：c2023297。

2.一种猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体，其特征在于：由权利要求1所述的杂交瘤细胞株fpv-2a6分泌得到。

3.根据权利要求2所述的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体，其特征在于：所述单克隆抗体的轻链可变区的氨基酸序列如seq id no:1所示；所述单克隆抗体的重链可变区的氨基酸序列如seq id no:2所示。

4.根据权利要求3所述的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体，其特征在于：编码所述轻链可变区的氨基酸序列的核苷酸序列如seq id no:3所示；编码所述重链可变区的氨基酸序列的核苷酸序列如seq id no:4所示。

5.根据权利要求2所述的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体，其特征在于：所述单克隆抗体的重链亚类为igg1、轻链亚型为κ链。

6.根据权利要求2所述的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体，其特征在于：所述单克隆抗体对genbank id为oq815871的fpv-10毒株、genbank id为oq815872的fpv-15毒株、genbank id为oq815873的fpv-251毒株、genbank id为oq815874的fpv-271毒株和genbankid为oq815875的fpv-s2毒株均具有中和特性。

7.根据权利要求6所述的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体，其特征在于：所述单克隆抗体对所述fpv-10毒株、fpv-15毒株、fpv-251毒株、fpv-271毒株和fpv-s2毒株的中和效价均不低于1:5010。

8.根据权利要求2所述的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体，其特征在于：所述单克隆抗体为纯化后的鼠源单克隆抗体，所述鼠源单克隆抗体通过向小鼠腹腔注射所述杂交瘤细胞株fpv-2a6的方式获得。

9.根据权利要求8所述的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体，其特征在于：所述纯化的方式为亲和层析纯化。

10.一种权利要求2～9中任一权利要求所述的单克隆抗体在制备用于预防或治疗猫泛白细胞减少症的药物中的应用。

技术总结
本发明提供了一种杂交瘤细胞株及其分泌的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体与应用。该杂交瘤细胞株命名为杂交瘤细胞株FPV‑2A6，保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：C2023297。本发明提供的猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体由杂交瘤细胞株FPV‑2A6分泌得到，是针对FPV的特异性抗体，具有较高的亲和力和中和能力，可在细胞水平和动物水平上抑制病毒的复制和传播，从而有效治疗猫泛白细胞减少症。该单克隆抗体对于不同的FPV毒株具有交叉保护能力，且均能够达到较高的中和效价。

技术研发人员：曹胜波,李佳康,周登元,李秋燕,曾悦,王莹,彭佳佳,李禄滢,石泰然
受保护的技术使用者：华中农业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/2/21