一种TGase酶响应型多肽及其水凝胶制备方法、应用与流程

本发明涉及多肽，具体为一种tgase酶响应型多肽及其水凝胶制备方法、应用。

背景技术：

1、多肽是由α-氨基酸以肽键连接在一起形成的化合物，是蛋白质水解的中间产物。一般肽中含有的氨基酸的数目为二到一百,根据肽中氨基酸的数量的不同,肽有多种不同的称呼，多肽通常由三个以上氨基酸分子脱水缩合而成。多肽的分子量低于10000道尔顿，能购透过半透膜，且不易被三氯乙酸及硫酸铵所沉淀。多肽水凝胶是由多肽制备而来的一种重要的生物材料，多肽水凝胶广泛应用于药物传递、组织工程和生物医学领域。目前的多肽水凝胶通常是基于ph、温度或离子强度等外部刺激响应的，其制备和应用受到限制。传统的多肽水凝胶在响应性和稳定性方面存在一定的挑战，尤其是在复杂的生物体内水凝胶的性能容易受到影响。因此，需要对水凝胶的构建进行创新，以满足不同应用领域的需求。

2、为了解决上述问题，增强水凝胶的响应性和稳定性，使其在生物医学等领域具有广泛的应用潜力，本发明提供了一种tgase酶响应型多肽及其水凝胶制备方法、应用。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种tgase酶响应型多肽及其水凝胶制备方法、应用，以解决上述背景技术中提出的问题。

2、为了解决上述技术问题，本发明提供如下技术方案：一种tgase酶响应型多肽及其水凝胶的制备方法、应用。

3、一种tgase酶响应型多肽，所述tgase酶响应型多肽的序列为fmoc-ffqgkk，具体为fmoc-phe-phe-gln-gly-lys-lys。

4、较为优化地，所述tgase酶响应型多肽的制备方法为，包括以下步骤：

5、步骤一：采用fmoc固相合成法，取氨基酸、树脂、含哌啶的n,n-二甲基甲酰胺、o-苯并三氮唑-四甲基脲六氟磷酸酯、n,n-二异丙基乙胺，至多肽自动合成仪容器内，合成得到混合液；

6、步骤二：取三氟乙酸、三异丙基硅烷、水混合均匀，得到切割液；将混合液加入至切割液中，在25-30℃下搅拌4-5h，过滤，收集滤液，加入(-80)～(-75)℃的冰乙醚，在7000-7500rmp、3-5℃下离心5-10min，弃上清，洗涤沉淀，真空干燥，得到多肽粗产物，纯化、冷冻干燥，得到多肽。

7、较为优化地，所述氨基酸为苯丙氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、赖氨酸的混合。

8、较为优化地，所述三氟乙酸、三异丙基硅烷、水的质量比为95：(2.5-3)：(2.5-3)。

9、较为优化地，所述切割液和混合液的质量比为2：1。

10、一种tgase酶响应型水凝胶，所述tgase酶响应型水凝胶中包括tgase酶响应型多肽。

11、较为优化地，所述tgase酶响应型水凝胶的制备方法为：取多肽，加入超纯水，搅拌均匀，形成多肽溶液，在22-25℃下放置22-24h后，得到tgase酶响应型水凝胶。

12、较为优化地，所述多肽溶液的浓度为0.5-15mg/ml。

13、较为优化地，所述tgase酶响应型水凝胶可以应用于药物缓释。

14、一种tgase酶响应型水凝胶的应用，所述tgase酶响应型水凝胶可以应用于体表皮肤疾病治疗药物、体内脏器疾病治疗药物中的任意一种。

15、与现有技术相比，本发明所达到的有益效果是：

16、(1)谷氨酰胺转移酶tgase广泛存在人体内的细胞与组织中，但在一些疾病条件下容易出现高表达，其可以有效催化谷氨酰胺q和赖氨酸k发生酰基转移反应生成共价键，根据上述特性亟待寻找一种tgase酶响应型多肽，以此为基础展开相关疾病的治疗。

17、本发明提供了一种tgase酶响应型多肽及其制备方法，所述tgase酶响应型多肽的序列为fmoc-ffqgkk。通过uplc-ms/ms验证，fmoc-ffqgkk能够与tgase发生反应产生新的分子，tgase催化q和k生成异肽键会脱去一个nh3分子，因此，本发明制备的tgase酶响应型多肽fmoc-ffqgkk为tgase酶响应型多肽。

18、进一步将该tgase酶响应型多肽制备成水凝胶，所述tgase酶响应型水凝胶可以应用于药物缓释、体表皮肤疾病的治疗、体内脏器疾病的治疗中的任意一种。

技术特征：

1.一种tgase酶响应型多肽，其特征在于：所述tgase酶响应型多肽的序列为fmoc-phe-phe-gln-gly-lys-lys。

2.根据权利要求1所述的一种tgase酶响应型多肽，其特征在于：所述tgase酶响应型多肽的制备方法为，包括以下步骤：

3.根据权利要求2所述的一种tgase酶响应型多肽，其特征在于：所述氨基酸为苯丙氨酸、谷氨酰胺、甘氨酸、赖氨酸的混合。

4.根据权利要求2所述的一种tgase酶响应型多肽，其特征在于：所述三氟乙酸、三异丙基硅烷、水的质量比为95：(2.5-3)：(2.5-3)。

5.根据权利要求2所述的一种tgase酶响应型多肽，其特征在于：所述切割液和混合液的质量比为2：1。

6.一种tgase酶响应型水凝胶，其特征在于：所述tgase酶响应型水凝胶中包括权利要求1-5中任意一项所述的tgase酶响应型多肽。

7.根据权利要求6所述的一种tgase酶响应型水凝胶，其特征在于：所述tgase酶响应型水凝胶的制备方法为：取多肽，加入超纯水，搅拌均匀，形成多肽溶液，在22-25℃下放置22-24h后，得到tgase酶响应型水凝胶。

8.根据权利要求7所述的一种tgase酶响应型水凝胶的制备方法，其特征在于：所述多肽溶液的浓度为0.5-15mg/ml。

9.一种tgase酶响应型水凝胶的应用，其特征在于：所述tgase酶响应型水凝胶可以应用于体表皮肤疾病治疗药物、体内脏器疾病治疗药物中的任意一种。

技术总结
本发明涉及多肽技术领域，公开了一种TGase酶响应型多肽及其水凝胶制备方法、应用。谷氨酰胺转移酶TGase广泛存在人体内的细胞与组织中，但在一些疾病条件下容易出现高表达，可以有效催化谷氨酰胺Q和赖氨酸K发生酰基转移反应生成共价键。本发明提供了一种TGase酶响应型多肽及其制备方法，所述TGase酶响应型多肽的序列为Fmoc‑FFQGKK。Fmoc‑FFQGKK能够与TGase发生反应产生新的分子，TGase催化Q和K生成异肽键会脱去一个NH<subgt;3</subgt;分子，见过检测验证，本发明制备得到的TGase酶响应型多肽Fmoc‑FFQGKK为TGase酶响应型多肽。

技术研发人员：陈林伟,朱莉,王觉进,王琴
受保护的技术使用者：泰州市人民医院
技术研发日：
技术公布日：2024/2/21