抗CyclophilinA的单克隆抗体及其在治疗病毒性肺炎中的应用的制作方法

本发明属于生物医药领域，涉及抗cyclophilin a的单克隆抗体及其在治疗病毒性肺炎中的应用。

背景技术：

1、cyclophilin a（亲环素a，cypa）具有肽基脯氨酰顺/反异构酶活性，是一种在生物界广泛存在、高度保守的蛋白质。cypa与病毒诱导的炎症反应密切相关。a型和b型流感病毒、新冠病毒等常常引发病毒性肺炎，甚至引起细胞因子风暴，这可能导致急性呼吸窘迫综合征。然而，目前的抗病毒疗法还不足以预防或治疗这些并发症。细胞内cypa在病毒感染过程中能够增强细胞内核转录因子-κb (nf-κb) p65的稳定性，并促进p65的磷酸化及其入核过程，从而上调il-6、il-1β等促炎细胞因子的表达。此外，当受到病毒刺激时，cypa还能分泌到细胞外。胞外cypa（ecypa）对炎症的发展进程具有重要调控作用。例如，病毒感染后，ecypa的分泌量增加，ecypa与cd147可能以配体-受体的形式发生相互作用，启动下游细胞内erk等相关信号通路，从而促进炎症因子及趋化因子的分泌，参与调控宿主的炎症反应。

2、前期获得了一种抗cyclophilin a的单克隆抗体qh01（cn 113248617 b），对a型流感病毒诱导的小鼠肺炎具有一定的治疗效果。鉴于不同单克隆抗体与cypa的结合位点不同可能导致其抗炎作用的不同，仍然有必要筛选治疗效果更好的靶向cypa的特异性抗体，促进其在病毒性肺炎治疗中的应用。

3、因此，寻找新的靶向cypa的抗体有望用于治疗病毒性肺炎。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供抗cyclophilin a的单克隆抗体及其在治疗病毒性肺炎中的应用。

2、第一方面，本发明提供了分泌anti-cypa单克隆抗体（简称为cypa单抗或anti-cypa单抗）的杂交瘤细胞株sqhc14，其保藏号为cgmcc no. 45049。

3、第二方面，本发明提供了由第一方面所述杂交瘤细胞株sqhc14分泌的anti-cypa单克隆抗体。

4、第三方面，本发明提供了第二方面所述的anti-cypa单克隆抗体在如下至少一种中的应用；

5、1）制备治疗病毒性肺炎的产品；

6、2）制备抑制由病毒感染引发的炎症反应和/或白细胞趋化的产品；

7、上文抑制由病毒感染引发的炎症反应和/或白细胞趋化具体体现在降低细胞中白细胞介素1β（il-1β）和/或cc趋化因子配体2（ccl2）含量。

8、3）制备抑制由病毒感染引发的机体炎症反应的产品；

9、上文机体炎症反应进一步为肺炎，具体体现在肺指数下降，或降低机体中ccl2和il-1β的含量；

10、4）制备抑制炎症发生引起的白细胞粘附的产品；

11、5）制备抑制炎症发生引起的白细胞迁移的产品；

12、6）制备检测亲环素a的产品。

13、上文所述应用中，所述病毒为流感病毒或其他诱发肺炎的病毒。

14、第四方面，本发明提供了一种产品，其包括第二方面所述的anti-cypa单克隆抗体。

15、上文所述产品具有如下至少一种功能：

16、1）治疗病毒性肺炎；

17、2）抑制由病毒感染引发的炎症反应和/或白细胞趋化；

18、3）抑制由病毒感染引发的机体炎症反应；

19、4）抑制炎症发生引起的白细胞粘附；

20、5）抑制炎症发生引起的白细胞迁移；

21、6）检测亲环素a。

22、上文中，所述产品为试剂盒。

23、第五方面，本发明提供了一种检测亲环素a的方法，包括如下步骤：以第二方面所述的anti-cypa单克隆抗体作为抗体，检测待测样品中是否含有亲环素a。

24、本发明的实验证明，本发明提供了1种能分泌抗cypa单抗的杂交瘤细胞株，该杂交瘤细胞株能够分泌单抗（sqhc14），此单抗（sqhc14）可以特异性识别cypa，抑制病毒感染诱导的炎症因子分泌及白细胞迁移。

25、保藏说明

26、菌种名称：sqhc14

27、分类命名：小鼠杂交瘤细胞

28、保藏机构：中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心

29、保藏机构简称：cgmcc

30、地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号

31、保藏日期：2022年2月24日

32、保藏中心登记入册编号：cgmcc no. 45049

技术特征：

1.分泌anti-cypa单克隆抗体的杂交瘤细胞株sqhc14，其保藏号为cgmcc no. 45049。

2.由权利要求1所述杂交瘤细胞株sqhc14分泌的anti-cypa单克隆抗体。

3.权利要求2所述的anti-cypa单克隆抗体在如下至少一种中的应用；

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述病毒为流感病毒或其他诱发肺炎的病毒。

5.根据权利要求3或4所述的应用，其特征在于：所述产品为试剂盒。

6.一种产品，其包括权利要求2所述的anti-cypa单克隆抗体。

7.根据权利要求6所述的产品，其特征在于：

8.根据权利要求6或7所述的产品，其特征在于：所述产品为试剂盒。

9.一种检测亲环素a的方法，包括如下步骤：以权利要求2所述的anti-cypa单克隆抗体作为抗体，检测待测样品中是否含有亲环素a。

技术总结
本发明公开了抗Cyclophilin A的单克隆抗体及其在治疗病毒性肺炎中的应用。本发明提供了分泌anti‑CypA单抗的杂交瘤细胞SQHC14，其保藏号为CGMCC No.45049，还提供了所述杂交瘤细胞SQHC14分泌的anti‑CypA单抗。本发明的实验证明了，本发明提供了1种能分泌抗CypA单抗的杂交瘤细胞株，该杂交瘤细胞株能够分泌单抗SQHC14，此单抗SQHC14可以特异性识别CypA，抑制病毒感染诱导的炎症因子分泌及白细胞迁移。

技术研发人员：刘文军,孙蕾,白晓园,杨文贤,张鹤
受保护的技术使用者：深圳湾实验室
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15