一种棕榈油酸甲酯的制备方法与流程

本发明涉及提取分离，具体涉及一种棕榈油酸甲酯的制备方法。

背景技术：

1、沙棘又名醋柳、酸刺、酸溜溜、圪针等，属胡颓子科沙棘属落叶灌木或小乔木。在营养食品、保健品、药品、化妆品等产品中开发应用，沙棘果油的脂肪酸组成及含量是衡量果实品质的一个重要指标。脂肪酸是沙棘果油中的主要成分，其主要分为饱和脂肪酸和不饱和脂肪酸。不饱和脂肪酸具有多种活性作用，如降低血脂、降低胆固醇、抗炎、提高免疫力等生理功效。沙棘果油中含有棕榈油酸、油酸等不饱和脂肪酸成分较多，棕榈油酸经过甲酯化为棕榈油酸甲酯，杜鹃等在筛选杀螨活性物质的过程中，发现提取出的棕榈油酸甲酯对朱砂叶螨有一定的致死作用，结果表明棕榈油酸甲酯具有较强的触杀和产卵抑制作用。

2、国内外对棕榈油酸甲酯的研究很少，目前还未有见有从沙棘果油中分离纯化棕榈油酸甲酯的方法，本试验对棕榈油酸甲酯进行富集，为后续棕榈油酸甲酯的生物活性提供研究前提，并提高沙棘果油的经济价值，可促进了沙棘果油资源开发和综合利用。

技术实现思路

1、鉴于此，本发明的目的在于提供一种棕榈油酸甲酯的制备方法，该方法采用柱层析与半制备液相相结合，可最大程度富集棕榈油酸甲酯。

2、本发明是通过以下技术方案实现的：

3、一种棕榈油酸甲酯的制备方法，包括如下步骤：

4、(1)将沙棘果油加入正己烷混合均匀，加入氢氧化钾-甲醇溶液水浴反应，静置分层，取上清液，经浓缩旋干去除溶剂，得沙棘果油甲酯化样品；

5、(2)将沙棘果油甲酯化样品经c18柱层析分离，以60％甲醇、80％甲醇、100％甲醇依次梯度洗脱，根据检测图谱收集含有棕榈油酸甲酯组分的洗脱液并浓缩至干，得棕榈油酸甲酯粗品；

6、(3)将棕榈油酸甲酯粗品加溶剂溶解后通过半制备液相色谱进行分离纯化，收集不同时间出峰的制备液，浓缩得棕榈油酸甲酯。

7、采用沙棘果油原料直接进行c18柱层析，其分离效果不好，得率很低，故本发明采用沙棘果油甲酯化后再进行分离纯化，先将沙棘果油样品与氢氧化钾-甲醇溶液反应，制备出沙棘果油甲酯化样品，更稳定，经液相可快速方便测定出棕榈油酸甲酯组分，甲酯化方法具有操作简单、效率高、重现性好的优点。

8、优选地，步骤(1)中，所述水浴反应的温度为40-50℃，反应时间为30-40min。

9、优选地，步骤(1)中，所述氢氧化钾-甲醇溶液的质量浓度为1-2mol/l，沙棘果油与氢氧化钾-甲醇溶液的质量体积比为1:10-1:30。

10、优选地，步骤(1)中，所述沙棘果油与正己烷的质量体积比为1:40-1:60。

11、优选地，步骤(2)中，样品与c18柱填料的质量比为1:25-1:50。

12、优选地，步骤(2)中，c18柱的规格为10mmi.d.×250mm，5μm。

13、原料杂质较多时，只进行单次过柱分离无法将杂质完全分离开，本发明采用反复柱层析的方式以达到较高的分离水平，经过反复过柱，棕榈油酸甲酯含量逐渐提高。

14、优选地，步骤(2)中，将得到的棕榈油酸甲酯粗品反复经c18柱层析分离，过柱次数为2-3次。

15、为进一步分离纯化，本发明对柱层析得到的棕榈油酸甲酯粗品采用半制备液相色谱制备，最大程度的富集棕榈油酸甲酯。

16、优选地，步骤(3)中，所述半制备液相色谱的色谱条件为：色谱柱为shiseido c18；以甲醇∶水＝80∶20为流动相等度洗脱；检测波长为205nm。

17、优选地，步骤(3)中，所述溶剂为甲醇。

18、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

19、本发明提供了一种棕榈油酸甲酯的制备方法，该方法先将沙棘果油甲酯化，再采用柱层析结合半制备液相色谱对棕榈油酸甲酯进行分离纯化，可最大程度的富集得到棕榈油酸甲酯，为后续棕榈油酸甲酯的生物活性提供研究前提，并提高沙棘果油的经济价值，可促进了沙棘果油资源开发和综合利用；

20、该方法工艺简单，洗脱剂简单易得，提取分离效率高，成本较低，且可回收利用，绿色环保。

技术特征：

1.一种棕榈油酸甲酯的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

2.根据权利要求1所述的棕榈油酸甲酯的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，所述水浴反应的温度为40-50℃，反应时间为30-40min。

3.根据权利要求1所述的棕榈油酸甲酯的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，所述氢氧化钾-甲醇溶液的质量浓度为1-2mol/l，沙棘果油与氢氧化钾-甲醇溶液的质量体积比为1:10-1:30。

4.根据权利要求1所述的棕榈油酸甲酯的制备方法，其特征在于：步骤（1）中，所述沙棘果油与正己烷的质量体积比为1:40-1:60。

5.根据权利要求1所述的棕榈油酸甲酯的制备方法，其特征在于：步骤（2）中，样品上样量与c18柱填料的质量比为1:25-1:50。

6.根据权利要求1所述的棕榈油酸甲酯的制备方法，其特征在于：步骤（2）中，c18柱的规格为10 mmi.d.×250 mm，5 mm。

7.根据权利要求1所述的棕榈油酸甲酯的制备方法，其特征在于：步骤（2）中，将得到的棕榈油酸甲酯粗品反复经c18柱层析分离，过柱次数为2-3次。

8.根据权利要求1所述的棕榈油酸甲酯的制备方法，其特征在于：步骤（3）中，所述半制备液相色谱的色谱条件为：色谱柱为shiseido c18；以甲醇∶水=80∶20为流动相等度洗脱；检测波长为205 nm。

9.根据权利要求1所述的棕榈油酸甲酯的制备方法，其特征在于： 步骤（3）中，所述溶剂为甲醇。

技术总结
本发明公开了一种棕榈油酸甲酯的制备方法，该方法先将沙棘果油甲酯化，再采用柱层析结合半制备液相色谱对棕榈油酸甲酯进行分离纯化，可最大程度的富集得到棕榈油酸甲酯，为后续棕榈油酸甲酯的生物活性提供研究前提，并提高沙棘果油的经济价值，可促进了沙棘果油资源开发和综合利用；该方法工艺简单，洗脱剂简单易得，提取分离效率高，成本较低，且可回收利用，绿色环保。

技术研发人员：张怡评,施丽君,黄文文,方华,陈伟珠,晋文慧,赵敏,洪专
受保护的技术使用者：自然资源部第三海洋研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/2/21