一种弧菌噬菌体及其应用的制作方法

本发明属于水产养殖，尤其涉及一种弧菌噬菌体及其应用。

背景技术：

1、低温养殖产业是我国北方地区水产养殖产业很重要的组成部分，如海参、海马、牡蛎、扇贝等，低温养殖一般产品附加值高，利润高，但是相应的生长周期通常较长，养殖动物较为脆弱，容易应激。

2、弧菌是一类常见嗜盐性的革兰氏阴性菌，其主要的栖息地是海水中，广泛存在于海水和海产品中，分布极广，是我国沿海地区海水鱼及贝类常见的致病菌，通常引起胃肠感染，也可以引起肠道外感染，会导致海水鱼类患有出血症。其中，副溶血弧菌和溶藻弧菌是海水中存在最广泛最普遍的致病菌，很大程度上阻挠目前的海水养殖行业的发展。

3、目前，对于副溶血弧菌和溶藻弧菌的预防和控制的主要方法是使用抗生素，虽然抗生素具有使用方便，广谱抑菌，见效快等优点，但是，抗生素对动物本身有影响，使用抗生素养殖动物会出现应激、不进食甚至发病死亡，同时抗生素的滥用也导致了严重的细菌耐药性，在防治弧菌所造成的的疾病时效果越来越差，急需开发新型抗弧菌的药物。

4、噬菌体是一种细菌病毒，不会破坏微生态环境，而且副溶血弧菌噬菌体的作用靶点在原核微生物细胞壁，对动植物细胞上没有相应的作用位点，极具安全性。利用细菌的天敌噬菌体来解决细菌具有广阔前景的生物防治途径。但是，目前市面常见的噬菌体药物发酵温度大多在37℃，噬菌体能够快速繁殖扩增温度也在30℃左右，而北方地区低温养殖业种水温越在15℃上下，目前已有的噬菌体药物难以适用于北方地区低温养殖环境。

技术实现思路

1、本发明针对现有噬菌体无法在低温下快速繁殖，无法适用于北方地区低温养殖环境的技术问题，提出一种弧菌噬菌体及其应用，该噬菌体不仅能够跨菌种特异性裂解裂解副溶血弧菌和溶藻弧菌，而且能够在低温下快速繁殖，适用于北方低温养殖环境，可用于制备抗菌剂或水体净化剂或饲料添加剂。

2、为了达到上述目的，本发明采用的技术方案为：

3、一种弧菌噬菌体，所述弧菌噬菌体为弧菌噬菌体rdp-bv-21181，其保藏编号为cgmcc no.45086，分类命名为副溶血弧菌噬菌体，于2022年4月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。

4、在一实施方式中，所述弧菌噬菌体rdp-bv-21181为能在低温条件下特异性裂解副溶血弧菌和溶藻弧菌的长尾噬菌体，其具有一个多面体立体对称的头部以及尾部，所述头部和尾部通过颈部相连，所述头部内包裹核酸，所述尾部有尾鞘，所述头部直径80±2nm，尾部160±5nm。

5、在一实施方式中，所述弧菌噬菌体rdp-bv-21181的全基因组长度为81716bp，其全基因序列如seq id no.1所示。

6、一种弧菌噬菌体rdp-bv-21181在低温条件下特异性裂解副溶血弧菌和溶藻弧菌中的应用。

7、在一实施方式中，所述低温条件为15℃，在15℃条件下发酵时，所述弧菌噬菌体rdp-bv-21181的效价为1014pfu/ml。

8、一种弧菌噬菌体rdp-bv-21181在制备抗菌剂、水体净化剂或饲料添加剂中的应用。

9、抗菌剂或水体净化剂，为以纯化的弧菌噬菌体rdp-bv-21181制备的单一制剂或以纯化的弧菌噬菌体rdp-bv-21181为主要成分制备的复配制剂，用于防治养殖环境中副溶血弧菌或溶藻弧菌的污染。

10、饲料添加剂，包含弧菌噬菌体rdp-bv-21181，通过将其添加至水产养殖饲料中，用于防治养殖过程中副溶血弧菌或溶藻弧菌的污染以及由副溶血弧菌或溶藻弧菌引发的疾病。

11、与现有技术相比，本发明的优点和积极效果在于：

12、1、本发明提供一种弧菌噬菌体rdp-bv-21181，该噬菌体不仅能跨菌种裂解特异性裂解裂解副溶血弧菌和溶藻弧菌，而且能够在低温下快速繁殖，适用于北方低温养殖环境；

13、2、本发明提供一种弧菌噬菌体rdp-bv-21181，该噬菌体对水产养殖动物养殖环境中的副溶血弧菌和溶藻弧菌具有较高的裂解率(裂解率高达97％)，同时具有较宽的裂解谱，即能特异性裂解不同来源的副溶血弧菌和溶藻弧菌，比如分离自发病南美白对虾、金刚虾、海参、牡蛎等水产动物的副溶血弧菌和溶藻弧菌；

14、3、本发明提供一种弧菌噬菌体rdp-bv-21181能够用于制备抗菌剂或水体净化剂或饲料添加剂，防治水产养殖动物养殖环境以及养殖过程中的副溶血弧菌或溶藻弧菌的污染以及由于副溶血弧菌或溶藻弧菌引发的疾病。

技术特征：

1.一种弧菌噬菌体，其特征在于，所述弧菌噬菌体为弧菌噬菌体rdp-bv-21181，其保藏编号为cgmcc no.45086，分类命名为副溶血弧菌噬菌体，于2022年4月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。

2.根据权利要求1所述的弧菌噬菌体，其特征在于，所述弧菌噬菌体rdp-bv-21181为能特异性裂解副溶血弧菌和溶藻弧菌的长尾噬菌体，其具有一个多面体立体对称的头部以及尾部，所述头部和尾部通过颈部相连，所述头部内包裹核酸，所述尾部有尾鞘，所述头部直径80±2nm，尾部160±5nm。

3.根据权利要求1所述的弧菌噬菌体，其特征在于，所述弧菌噬菌体rdp-bv-21181的全基因组长度为81716bp，其全基因序列如seq id no.1所示。

4.一种如权利要求1-3中任一项所述的弧菌噬菌体rdp-bv-21181在低温条件下特异性裂解副溶血弧菌和溶藻弧菌中的应用。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述低温条件为15℃，在15℃条件下发酵时，所述弧菌噬菌体rdp-bv-21181的效价为1014pfu/ml。

6.一种如权利要求1-3中任意一项所述的弧菌噬菌体rdp-bv-21181在制备抗菌剂、水体净化剂或饲料添加剂中的应用。

7.抗菌剂或水体净化剂，其特征在于，为以纯化的如权利要求1-3中任意一项所述弧菌噬菌体rdp-bv-21181制备的单一制剂或以纯化的如权利要求1-3中任意一项所述弧菌噬菌体rdp-bv-21181为主要成分制备的复配制剂，用于防治养殖环境中副溶血弧菌或溶藻弧菌的污染。

8.饲料添加剂，其特征在于，包含如权利要求1-3中任意一项所述弧菌噬菌体rdp-bv-21181，通过将其添加至水产养殖饲料中，用于防治养殖过程中副溶血弧菌或溶藻弧菌的污染以及由副溶血弧菌或溶藻弧菌引发的疾病。

技术总结
本发明提出一种弧菌噬菌体及其应用，属于水产养殖技术领域，能够解决噬菌体无法在低温下快速繁殖，无法适用于北方地区低温养殖环境的技术问题。该弧菌噬菌体为弧菌噬菌体RDP‑BV‑21181，其保藏编号为CGMCC No.45086，分类命名为副溶血弧菌噬菌体，于2022年4月20日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心。该噬菌体能在低温条件下特异性裂解副溶血弧菌和溶藻弧菌的长尾噬菌体，其具有一个多面体立体对称的头部以及尾部，所述头部和尾部通过颈部相连，所述头部内包裹核酸，所述尾部有尾鞘。该噬菌体能够用于制备抗菌剂或水体净化剂或饲料添加剂。

技术研发人员：杜新永,刘长太,李爽,宋新慧,腾雨晴
受保护的技术使用者：青岛润达生物科技有限公司
技术研发日：
技术公布日：2024/3/11