CBX4作为靶标物在制备食管鳞癌预后评估、转移检测及靶向治疗药物的筛选中的应用

本发明属于生物医药，具体涉及cbx4作为靶标物在制备食管鳞癌预后评估、转移检测及靶向治疗药物的筛选中的应用。

背景技术：

1、食管癌主要包含两种病理类型：食管腺癌（esophageal adenocarcinoma，eac）和食管鳞癌（esophageal squamous cell carcinoma，escc）。食管癌患者中，约90%的病人是escc，而中国的食管鳞癌患者占全球总数一半[1,2]。食管癌早期无明显临床症状，患者初次就诊时已进展至中晚期，目前食管癌的治疗手段主要是手术结合放化疗，虽然手术仍是治疗食管癌的最佳治疗方案，但食管癌术后复发及转移是常见的，针对食管癌靶向治疗的药物有限，使食管癌的治疗难度增加[3-6]。因此，明确escc的发病机制，寻找特异性的治疗靶点尤为重要。

2、前期收集了31例escc组织和癌旁组织，并对样本进行了全基因组测序分析，发现cbx4是一个拷贝数扩增的基因[7]。cbx4蛋白包含560个氨基酸，是多梳蛋白家族成员之一，其家族成员还有cbx2、cbx6、cbx7、cbx8。cbx4结构包含n端的染色质域（chronmodomains）、c端pcr box（polycomb repressor box）以及两个sumo作用序列（sumo-interactingmotifs，sims）。n端的染色质域和sumo作用序列分别发挥其多梳和sumo e3连接酶的功能[8-10]。目前，cbx4在多种肿瘤研究中被报道，cbx4在肝癌、乳腺癌、肺癌中发挥促癌作用[11-14]，但cbx4在escc研究中很少被报道。

3、cbx4，又名pc2，定位于17q25.3染色体上，是多梳蛋白家族中唯一具有酶活性的蛋白，可充当sumo e3连接酶[20]。cbx4在不同肿瘤组织中发挥不同作用，其sumo化作用会参与细胞代谢、肿瘤进展等过程，sumo化的底物有prdm16、smad-interacting protein 1（sip1）、hif-1α、znf131、wwdomain-containing oxidoreductase（wwox）等[13,21-25]。除了cbx4的sumo化作用和参与多梳蛋白复合体（polycomb repressive complex，prc）发挥作用外[8,20,26]，文献报道在肿瘤组织中，cbx4会招募组蛋白乙酰化酶（histoneacetyltransferase，hat）和组蛋白去乙酰化酶（histone deacetylase，hdac）来发挥作用。

技术实现思路

1、本发明提供了cbx4作为靶标物在制备食管鳞癌预后评估、转移检测及靶向治疗药物的筛选中的应用。

2、本发明由如下技术方案实现的：cbx4作为靶标物在制备食管鳞癌预后评估试剂中的应用，所述cbx4高表达在制备食管鳞癌预后评估试剂中的用途。

3、cbx4表达量的临界值为cutoff=19.694，cbx4表达量＜19.694为低表达，cbx4表达量≥19.694为高表达；肿瘤分级、n分期、tnm分期及cbx4表达与患者预后相关。

4、本发明还提供了cbx4作为靶标物在制备食管鳞癌细胞转移检测试剂和药物筛选中的应用，所述cbx4作为靶标物在制备食管鳞癌细胞转移检测试剂中的应用，cbx4在食管鳞癌细胞中与nat10相互作用促进管鳞癌细胞发生上皮间质转化emt。

5、进一步的，所述cbx4在食管鳞癌细胞中过表达，nat10过表达，上皮细胞标志物e-cadherin表达明显下降，而间质细胞标志物vimentin、n-cadherin、snai1、slug的表达明显升高，该食管鳞癌细胞通过上皮间质转化emt促进escc细胞侵袭迁移，促进肺转移结节形成。

6、本发明还提供了cbx4作为靶标物在制备筛选抑制或减缓食管鳞癌细胞转移药物中的应用，所述抑制或减缓食管鳞癌细胞转移药物为cbx4基因抑制剂、抑制cbx4基因过表达组细胞增殖的抑制剂、抑制cbx4互作蛋白nat10过表达的抑制剂或cbx4下游靶基因的特异性抑制剂。进一步的，所述抑制cbx4互作蛋白nat10过表达的抑制剂为remodelin，其对食管鳞癌细胞作用的浓度为20 μm。

7、本发明通过一系列的实验和分析来探索cbx4在escc中的作用机制，为escc治疗寻找新的靶点。cbx4在escc中促进肿瘤转移，主要是通过与nat10相互作用来促进emt从而影响escc发生迁移、侵袭。cbx4在escc中可以用来预测患者的生存，cbx4在escc中的作用机制仍需进一步被探索，使cbx4在escc治疗中能成为一个潜在的靶点。cbx4在escc组织中表达量高于癌旁组织。cbx4表达与escc患者预后有关。体内细胞功能和体外动物实验证实cbx4促进escc细胞侵袭、迁移。深入机制研究发现cbx4通过与nat10相互作用，促进上皮间质转化从而促进escc细胞发生侵袭、迁移。

技术特征：

1.cbx4作为靶标物在制备食管鳞癌预后评估试剂中的应用，其特征在于：所述cbx4高表达在制备食管鳞癌预后评估试剂中的用途。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：cbx4表达量的临界值为cutoff=19.694，cbx4表达量＜19.694为低表达，cbx4表达量≥19.694为高表达；肿瘤分级、n分期、tnm分期及cbx4表达与患者预后相关。

3.cbx4作为靶标物在制备食管鳞癌细胞转移检测试剂和药物筛选中的应用，其特征在于：所述cbx4作为靶标物在制备食管鳞癌细胞转移检测试剂中的应用，cbx4过表达与nat10相互作用，食管鳞癌细胞发生上皮间质转化emt。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述cbx4在食管鳞癌细胞中过表达，nat10过表达，上皮细胞标志物e-cadherin表达明显下降，而间质细胞标志物vimentin、n-cadherin、snai1、slug的表达明显升高，该食管鳞癌细胞通过上皮间质转化emt促进escc细胞侵袭迁移，促进肺转移结节形成。

5.cbx4作为靶标物在制备筛选抑制或减缓食管鳞癌细胞转移药物中的应用，其特征在于：所述抑制或减缓食管鳞癌细胞转移药物为cbx4基因抑制剂、抑制cbx4基因过表达组细胞增殖的抑制剂、抑制cbx4互作蛋白nat10过表达的抑制剂或cbx4下游靶基因的特异性抑制剂。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述抑制cbx4互作蛋白nat10过表达的抑制剂为remodelin，其对食管鳞癌细胞作用的浓度为20 μm。

技术总结
本发明属于生物医药技术领域，提供了CBX4作为靶标物在制备食管鳞癌预后评估、转移检测及靶向治疗药物的筛选中的应用。CBX4作为靶标物在制备食管鳞癌预后评估试剂中的应用，所述CBX4高表达在制备食管鳞癌预后评估试剂中的用途。CBX4在ESCC中促进肿瘤转移，主要是通过与NAT10相互作用来促进EMT从而影响ESCC发生迁移、侵袭。CBX4在ESCC中可以用来预测患者的生存，CBX4在ESCC中的作用机制仍需进一步被探索，使CBX4在ESCC治疗中能成为一个潜在的靶点。

技术研发人员：马燕春,崔永萍,李香,成晓龙,贾志武,张玲,阎婷,杨健,孔鹏洲
受保护的技术使用者：山西医科大学
技术研发日：
技术公布日：2024/2/19