一株增强鱼类耐盐胁迫能力的枯草芽孢杆菌及其应用

本发明涉及基因编辑技术和作物育种领域，具体地，涉及一株增强鱼类耐盐胁迫能力的枯草芽孢杆菌及其应用。

背景技术：

1、盐度是影响鱼类等水生生物生存环境的重要生态因子，也是影响鱼类各种生理活动(如呼吸、代谢、生长等)的重要非生物因素，迫使鱼体进行相应的生理活动调整，从基因水平到细胞水平，从酶含量到激素含量，以保持体液渗透压的动态平衡。盐胁迫会引起鱼体应激反应，如能量消耗加剧、代谢加速、耗氧增多等，并导致诸多后果：(1)鱼体渗透压变化，形成渗透胁迫和离子胁迫；(2)鱼体活性氧自由基(ros)的增多，形成氧化胁迫；(3)鱼体体质会变差，免疫能力和抵抗力下降，更易受病害影响甚至死亡。

2、目前鱼类应对各种渗透胁迫时如何保持水和离子平衡都已进行了比较深入研究。对鱼而言，通过耐盐锻炼、培育耐盐品种以及生化物质(如有机渗透剂等)诱导耐盐性等途径都可提高鱼类耐盐胁迫能力。而在植物中，有诸多研究报道枯草芽孢杆菌等根际促生菌已可以提高植物耐盐，但投喂枯草芽孢杆菌提高水生动物宿主耐盐性的研究则未见报道。

技术实现思路

1、本发明要解决的技术问题是筛选能提高鱼类耐盐胁迫能力的益生菌，并提供一株增强鱼类耐盐胁迫能力的枯草芽孢杆菌及其应用。

2、本发明的第一个目的是提供一株枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)scau-ohb2。

3、本发明的第二个目的是提供一种上述的枯草芽孢杆菌scau-ohb2在制备用于增强鱼类耐盐胁迫能力的产品中的应用。

4、本发明的第三个目的是提供一种微生物制剂。

5、本发明的第四个目的是提供一种上述的微生物制剂在增强鱼类耐盐胁迫能力中的应用。

6、本发明的第五个目的是提供一种功能饲料。

7、本发明的第六个目的是提供一种增强鱼类耐盐胁迫能力的方法。

8、为了实现上述目的，本发明是通过以下方案予以实现的：

9、本发明从罗非鱼肠道内容物中筛选出一株枯草芽孢杆菌，对其进行16s rdn a鉴定和全基因组测序、组装和注释，同时统计该菌株全基因组中相容性溶质关键基因的数量。随后，为探究枯草芽孢杆菌对罗非鱼耐盐胁迫能力的影响，连续21d向罗非鱼投喂添加枯草芽孢杆菌的饲料，21d后对罗非鱼进行急性盐胁迫处理，并观察急性盐胁迫后罗非鱼鳃组织形态结构、耐盐存活率和检测罗非鱼肝脏抗氧化能力。最后，为了进一步分析投喂添加枯草芽孢杆菌的饲料的时间对罗非鱼耐盐胁迫能力的影响，以更方便应用于生产，连续3d向罗非鱼投喂添加枯草芽孢杆菌的饲料，3d后对罗非鱼进行急性盐胁迫处理，测定罗非鱼盐胁迫后的累积死亡率。

10、因此，本发明要求保护以下内容：

11、一株枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)scau-ohb2，于2021年12月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为gdmcc no:62120。

12、优选地，所述枯草芽孢杆菌scau-ohb2基因组中含有1个甜菜碱脱氢酶基因、3个吡咯啉-5-羧酸还原酶基因和2个脯氨酸脱氢酶基因。

13、上述的枯草芽孢杆菌scau-ohb2在制备用于增强鱼类耐盐胁迫能力的产品中的应用。

14、优选地，所述增强鱼类耐盐胁迫能力为提高鱼类在盐胁迫环境下的存活率和/或增强鱼类鳃组织的耐盐性。

15、一种微生物制剂，所述微生物制剂中含有上述的枯草芽孢杆菌scau-ohb2。

16、优选地，所述微生物制剂中枯草芽孢杆菌scau-ohb2的有效活菌数为0.8×107～1.2×107cfu/g。

17、更优选地，所述微生物制剂中枯草芽孢杆菌scau-ohb2的有效活菌数为1×107cfu/g。

18、上述的微生物制剂在增强鱼类耐盐胁迫能力中的应用。

19、优选地，所述增强鱼类耐盐胁迫能力为提高鱼类在盐胁迫环境下的存活率和/或增强鱼类鳃组织的耐盐性。

20、一种功能饲料，所述功能饲料含有上述的枯草芽孢杆菌scau-ohb2。

21、优选地，所述功能饲料中枯草芽孢杆菌scau-ohb2的有效活菌数为0.8×107～1.2×107cfu/g。

22、更优选地，所述微生物制剂中枯草芽孢杆菌scau-ohb2的有效活菌数为1×107cfu/g。

23、一种增强鱼类耐盐胁迫能力的方法，所述方法为给鱼类施用上述的枯草芽孢杆菌scau-ohb2、微生物制剂和功能饲料中的一种或几种。

24、本发明的技术方案具有以下有益效果：

25、本发明公开了一株增强鱼类耐盐胁迫能力的枯草芽孢杆菌及其应用，该枯草芽孢杆菌scau-ohb2于2021年12月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为gdmccno:62120。该枯草芽孢杆菌scau-ohb2不仅对鱼体安全无害，还能够显著提高鱼体在急性盐胁迫下的存活率和鳃组织的耐盐性。本发明为增强鱼类耐盐胁迫能力提供了一种新的选择，也为培育出具有耐盐优良性状的鱼类种质提供了新的方法。

技术特征：

1.一株枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)scau-ohb2，其特征在于，于2021年12月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为gdmccno:62120。

2.权利要求1所述的枯草芽孢杆菌scau-ohb2在制备用于增强鱼类耐盐胁迫能力的产品中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述增强鱼类耐盐胁迫能力为提高鱼类在盐胁迫环境下的存活率和/或增强鱼类鳃组织的耐盐性。

4.一种微生物制剂，其特征在于，所述微生物制剂中含有权利要求1所述的枯草芽孢杆菌scau-ohb2。

5.根据权利要求4所述的微生物制剂，其特征在于，所述微生物制剂中枯草芽孢杆菌scau-ohb2的有效活菌数为0.8×107～1.2×107cfu/g。

6.权利要求4～5所述的微生物制剂在增强鱼类耐盐胁迫能力中的应用。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，所述增强鱼类耐盐胁迫能力为提高鱼类在盐胁迫环境下的存活率和/或增强鱼类鳃组织的耐盐性。

8.一种功能饲料，其特征在于，所述功能饲料含有权利要求1所述的枯草芽孢杆菌scau-ohb2。

9.根据权利要求8所述的功能饲料，其特征在于，所述功能饲料中枯草芽孢杆菌scau-ohb2的有效活菌数为0.8×107～1.2×107cfu/g。

10.一种增强鱼类耐盐胁迫能力的方法，其特征在于，所述方法为给鱼类施用权利要求1所述的枯草芽孢杆菌scau-ohb2、权利要求4～5所述的微生物制剂和权利要求8～9所述的功能饲料中的一种或几种。

技术总结
本发明公开了一株增强鱼类耐盐胁迫能力的枯草芽孢杆菌及其应用，该枯草芽孢杆菌SCAU‑Ohb2于2021年12月13日保藏于广东省微生物菌种保藏中心，保藏编号为GDMCC NO:62120。该枯草芽孢杆菌SCAU‑Ohb2不仅对鱼体安全无害，还能够显著提高鱼体在急性盐胁迫下的存活率和鳃组织的耐盐性。本发明为增强水产动物耐盐胁迫能力提供了一种新的选择，也为培育出具有耐盐优良性状的鱼类种质提供了新的方法。

技术研发人员：黄仙德,何漪咏,张晓勇,李姚,梁执正,谢晶晶,龚家仪
受保护的技术使用者：华南农业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/2/19