一种具有提升血红蛋白含量功能的骨肽及制备方法与应用与流程

本发明涉及生物，具体涉及一种具有提升血红蛋白含量功能的骨肽及制备方法与应用。

背景技术：

1、临床上治疗缺铁性贫血的主要方式为病因治疗及补铁治疗，其中补铁治疗又分为口服补铁及静脉注射补铁，静脉注射补铁虽然具有即时的效果，但容易引发过敏等作用，故现主要以口服补铁剂为主。

2、目前，常见的补铁剂主要为：无机铁剂、小分子有机铁剂。无机铁剂成本较低，但在口服后，药品会在胃部快速解离为游离的二价铁离子，游离铁毒性，治疗周期长，生物利用度低较低；同时需要格外注意食物禁忌，防止后续摄入的食物与铁离子发生反应，导致药物失效。

3、使用有机小分子铁剂虽然能够提高患者对铁的吸收率，但仍然有着容易发出铁腥味的缺陷，适口度较差，同时也有着吸收存在饱和现象，在服用时具有饮食禁忌，gi副作用等，其依旧具有较长的治疗周期。

4、随着营养与健康需求的变化和安全意识的增强，现需要一种补铁效果好、周期短、口感好、安全性更高的口服补铁剂原料。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种具有提升血红蛋白含量功能的骨肽及制备方法与应用，以解决现有技术中口服类补铁剂适口性差、效果较差、治疗周期较长以及具有用药禁忌的技术问题。

2、为解决上述技术问题，本发明具体提供下述技术方案：

3、本发明提供了一种具有提升血红蛋白含量功能的骨肽，所述骨肽的氨基酸序列如序列表seq id no.1所示。

4、本发明还提供了一种具有提升血红蛋白含量功能的骨肽的制备方法，包括如下步骤：

5、取动物骨骼，在蒸汽中蒸煮6h，温度为115℃-120℃，冷却后加水，研磨为骨糊；

6、将所述骨糊内依次加入6％盐酸(10mol/l)、12％乳酸(10mol/l)、15％柠檬酸，酸化24-48h，加水，煮沸2h，得到混合溶液；

7、使用氢氧化钠将所述混合溶液的ph调节至7.5，加胰蛋白酶0.02％，37℃条件下酶解6h，灭活20分钟，使用1.0um陶瓷膜过滤，得到骨胶原蛋白肽提取液；

8、通过层析色谱对所述骨胶原蛋白肽提取液进行分离纯化，得到多肽片段，鉴定后记为具有提升血红蛋白含量功能的骨肽。

9、作为本发明的一种优选方案，所述分离纯化包括如下条件：

10、填料为葡聚糖凝胶sephadex g15或葡聚糖凝胶sephadex g25，填充直径为20mm，填充高度为500mm；上样量为1-3ml，以水为洗脱液，洗脱速度为0.5-1.0ml/min。

11、作为本发明的一种优选方案，所述填料为葡聚糖凝胶sephadex g15。

12、作为本发明的一种优选方案，所述上样量为2ml。

13、作为本发明的一种优选方案，所述洗脱速度为0.5ml/min。

14、作为本发明的一种优选方案，所述动物骨骼为猪骨或牛骨中的任意一种或多种。

15、本发明提供了一种骨肽在提升血红蛋白功能上的应用；

16、作为本发明的一种优选方案，所述多肽片段能够激活骨髓微环境的相关因子，使造血干细胞分化为红细胞、血小板以及白细胞，增加红细胞数量，从而增加血液中血红蛋白的含量。

17、本发明与现有技术相比较具有如下有益效果：

18、本发明在动物骨骼中获得一种胶原蛋白多肽，核苷酸序列如序列表seqid no.1所示，其使用方式为直接服用，骨肽含有的功能性肽段被人体吸收后，经过血液循环作用于骨髓微环境，提升环境中的血管内皮生长因子与血小板内皮黏附分子的含量，调节造血干细胞的静息状态，使处于g0期的造血干细胞从睡眠状态进入细胞增殖、分化周期，增加造血干细胞g2/m期细胞数量，使造血干细胞增殖、分化为造血祖细胞增殖、分化为红细胞、血小板、白细胞，增加红细胞数量，从而增加血液中血红蛋白的含量；

19、本发明中的骨肽易于吸收，能够显著提升缺铁性贫血样本的血红蛋白含量，具有较好的补血作用，缩短治疗周期；且在进入肠胃后不会分解为游离铁，不会发出铁腥味，具有较好的适口性；使用时禁忌少，安全性好，生物利用度高。

20、本发明通过对动物骨骼进行酸化和酶解工艺提取胶原蛋白多肽，并通过分离纯化工艺进行纯化，形成碎片化的片段，采用液质联用色谱法进行多肽序列鉴定，并对该多肽序列进行药效学试验，表明分离纯化后的胶原蛋白多肽对缺铁性贫血模型动物的体重显著增长，并能显著升高模型动物的血红蛋白含量，且其补贴作用优于硫酸亚铁。

技术特征：

1.一种具有提升血红蛋白含量功能的骨肽，其特征在于，

2.一种根据权利要求1所述具有提升血红蛋白含量功能的骨肽的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

3.根据权利要求1所述的一种具有提升血红蛋白含量功能的骨肽的制备方法，其特征在于，

4.根据权利要求3所述的一种具有提升血红蛋白含量功能的骨肽的制备方法，其特征在于，

5.根据权利要求1所述的一种具有提升血红蛋白含量功能的骨肽的制备方法，其特征在于，

6.根据权利要求1所述的一种具有提升血红蛋白含量功能的骨肽的制备方法，其特征在于，

7.根据权利要求1所述的一种具有提升血红蛋白含量功能的骨肽的制备方法，其特征在于，

8.一种根据权利要求1-7所述的骨肽在提升血液中血红蛋白含量上的应用。

9.根据权利要求8所述的一种骨肽在提升血液中血红蛋白含量上的应用，其特征在于，

技术总结
本发明公开了一种具有提升血红蛋白含量功能的骨肽以及骨肽的制备方法，包括包括如下步骤：取猪骨，在蒸汽中蒸煮，冷却后加水，研磨为骨糊；将骨糊内依次加入6％盐酸(10mol/L)、12％乳酸(10mol/L)、15％柠檬酸，酸化24‑48h，加水煮沸，得到混合溶液；将混合溶液的pH调节至7.5，加胰蛋白酶0.02％，酶解，灭活，过滤，得到骨胶原蛋白肽提取液；通过层析色谱对骨胶原蛋白肽提取液进行分离纯化，得到多肽片段，鉴定后记为具有提升血红蛋白含量功能的骨肽。发明实现了缺铁性贫血样本的血红蛋白含量的显著提升，具有较好的补血作用，缩短治疗周期，具有较好的适口性，安全性好，生物利用度高。

技术研发人员：许志,刘雪辉,郭元满,许必祥,黄昆,李欣,曾祥素,贺静,王筱宇,龙顺东,陈亚祥,曾奇,夏绍轩
受保护的技术使用者：湖南天劲制药有限责任公司
技术研发日：
技术公布日：2024/5/8