EGCG/Zn-CS及其制备方法与应用

本发明涉及生物材料，具体而言，涉及一种egcg/zn-cs及其制备方法与应用。

背景技术：

1、人体在生命代谢中会产生大量的氧自由基，如超氧阴离子自由基、羟基自由基和脂质过氧化自由基，对细胞和大分子造成显著且不可逆的损伤，人体清除自由基的能力随着年龄的增长而不断下降，这也是各种疾病在老年时期发病率急速增高的主要原因之一。因此充足的抗氧化能力对于预防和抵消氧化应激而产生的有害影响至关重要，能够抵抗自由基的抗氧化物主要分为抗氧化酶类物质和非酶抗氧化物质，抗氧化酶类物质包括超氧化物歧化酶sod、过氧化氢酶cat、谷胱甘肽还原酶gr等，非酶抗氧化物质主要包括类胡萝卜素，多酚等天然物质以及锡、铜等营养素。茶多酚(tp)就是一种常见的多酚，是茶汤中最重要的有机化合物，同时也是一种有效的抗氧化剂，可以通过清除自由基和调节体内不同类型氧化酶的活性来预防和治疗疾病。这种特性归因于酚羟基结构，其中电子具有共轭效应，氢离子的结合能力减弱，更可能被解离，因此活性氢离子中和自由基和其他活性氧物种，达到清除自由基的目的。茶多酚中大部分成分是儿茶素，主要包括四种儿茶素(-)-表儿茶素(ec)，(-)-表没食子儿茶素(egc)，(-)-没食子酸表儿茶素(ecg)和(-)-表没食子儿茶素没食子酸酯(egcg)。

2、表没食子儿茶素没食子酸酯本身就具有一定的抗氧化和抗菌能力，但是抗氧化和抗菌能力相对较低。

技术实现思路

1、本发明所要解决的问题是如何提高表没食子儿茶素没食子酸酯的抗氧化性能。

2、为解决上述问题，本发明第一方面提供一种egcg/zn-cs的制备方法，包括以下步骤：

3、s1：在保护气氛围下，将表没食子儿茶素没食子酸酯和锌盐加入到水中，调节ph至6.5～8并继续反应，离心，去除上清液并收集沉淀物，获得egcg/zn；

4、s2：向壳聚糖水溶液中加入保护剂获得反应混合液，向反应混合液中加入eggc/zn并用微波辐照后获得egcg/zn-cs。

5、锌是人体必需的微量元素，有着很强的抗菌能力，在本发明中与表没食子儿茶素没食子酸酯络合后能够增强多酚的抗氧化和抗菌能力，壳聚糖与表没食子儿茶素没食子酸酯-锌配合物络合以后能够使其结构更加稳定。

6、优选地，所述步骤s1中，按质量份计，所述表没食子儿茶素没食子酸酯、锌盐和水的质量比为(200～300)：10000：(20～40)。

7、优选地，所述步骤s1中，所述锌盐选自乙酸锌、柠檬酸锌、硫酸锌、氯化锌、硝酸锌、亚硝酸锌、亚硫酸锌中的一种。

8、优选地，所述步骤s1中，所述保护气为氮气或氦气。

9、优选地，所述步骤s2中，所述保护剂为硼氢化钠或氮气，保护剂的作用在于保护表没食子儿茶素没食子酸酯-锌络合物中的酚羟基，使其能够与壳聚糖的氨基进行反应，形成三元配合物。

10、优选地，所述步骤s2中，按质量份计，所述壳聚糖、水和eggc/zn的质量比为(3×104～5×104)：(8×105～1.2×106)：(1.5×105:2.5×105)。

11、优选地，所述步骤s2中，微波辐照的功率为280～320w。

12、本发明第二方面提供一种前述制备方法制得的egcg/zn-cs。

13、本发明第三方面提供一种egcg/zn-cs的应用，所述应用包括以下方面：

14、a.使用egcg/zn-cs清除自由基；

15、b.使用egcg/zn-cs杀灭细菌。

16、优选地，所述自由基选自超氧阴离子自由基、羟基自由基、羧自由基、一氧化氮自由基中的一种或多种。

17、本发明具备的有益效果：本发明在表没食子儿茶素没食子酸酯的基础上制得表没食子儿茶素没食子酸酯-锌，提高了表没食子儿茶素没食子酸酯的自由基清除能力，本发明首次通过在表没食子儿茶素没食子酸酯-锌的基础上枝接壳聚糖形成三元配合物，使得表没食子儿茶素没食子酸酯-锌的自由基清除能力再次加强，这为后续自由基清除试剂或药物的研发提供了新的思路。

技术特征：

1.一种egcg/zn-cs的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤s1中，按质量份计，所述表没食子儿茶素没食子酸酯、锌盐和水的质量比为(200～300)：10000：(20～40)。

3.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤s1中，所述锌盐选自乙酸锌、柠檬酸锌、硫酸锌、氯化锌、硝酸锌、亚硝酸锌、亚硫酸锌中的一种。

4.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤s1中，所述保护气为氮气或氦气。

5.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤s2中，所述保护剂为硼氢化钠或氮气。

6.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤s2中，按质量份计，所述壳聚糖、水和eggc/zn的质量比为(3×104～5×104)：(8×105～1.2×106)：(1.5×105～2.5×105)。

7.如权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤s2中，微波辐照的功率为280～320w。

8.一种egcg/zn-cs，其特征在于，所述egcg/zn-cs通过权利要求1～7任一制备方法制得。

9.一种egcg/zn-cs的应用，其特征在于，所述应用包括以下方面：

10.如权利要求9所述的应用，其特征在于，所述自由基选自超氧阴离子自由基、羟基自由基、羧自由基、一氧化氮自由基中的一种或多种。

技术总结
本发明公开了一种EGCG/Zn‑CS及其制备方法与应用，属于生物材料技术领域，本发明所提供的EGCG/Zn‑CS是由表没食子儿茶素没食子酸酯、锌、壳聚糖组成的三元聚合物，具体制备方法为：S1：在保护气氛下，将表没食子儿茶素没食子酸酯和锌盐加入到水中，调节pH至6.5～8并继续反应，离心，去除上清液并收集沉淀物，获得EGCG/Zn；S2：向壳聚糖水溶液中加入保护剂获得反应混合液，向反应混合液中加入EGGC/Zn并用微波辐照后获得EGCG/Zn‑CS。经实验测定，本发明所提供的EGCG/Zn‑CS与EGCG/Zn和EGCG相比，具有更强的自由基清除能力和抗菌能力，本发明提供的EGCG/Zn‑CS的制备方法为后续自由基清除试剂或药物的研发提供了新的思路。

技术研发人员：赵静静,张剑锋
受保护的技术使用者：宁波大学
技术研发日：
技术公布日：2024/5/8