一种农杆菌浸润防喷溅装置的制作方法

本技术属于分子生物学领域，具体涉及一种农杆菌浸润防喷溅装置。

背景技术：

1、农杆菌浸润介导的瞬时表达方法是近年来发展形成的一种快速有效的分析基因表达的方法。与农杆菌介导法等传统的转基因过程相比，瞬时表达具有很多优点：操作简易和周期短，一般只需要2-3天；表达效率高，不需要转基因和组培程序，能在完整植株或离体叶片上进行。目前农杆菌浸润介导的瞬时表达法已经在烟草、拟南芥、莴苣、番茄、马铃薯、葡萄、草莓、梨等植物中得到应用。瞬时表达代替稳定表达，可应用于多个方面的研究，主要包括外源基因的表达、转基因载体的初筛、启动子分析、转录后基因沉默、无毒基因鉴定、抑制子功能鉴定、细胞定位和基因相互作用等方面。

2、农杆菌浸润法接种植物的技术流程主要分为：载体构建、农杆菌培养、注射器注射浸润和瞬时表达。首先获得目的基因序列并构建到表达载体中，再转化到农杆菌细胞中。将含表达载体的农杆菌转接于液体培养基培养至对数生长期，离心收集菌体，加入浸润缓冲液，室温静置2～3h后用于浸润。将农杆菌菌液吸入注射器中，用针头在植株叶片上扎两个孔，用无针头的注射器注射叶片，依靠注射器的压力将菌液通过锥头孔注入叶片的叶脉之间。一般在注射后2-3天内进行检测或者进一步分析，检测部位一般为注射部位。

3、不同植物、不同生长时期、不同生长环境以及不同部位的叶片进行农杆菌的浸润难度都有比较大的差别。而且不同熟练程度的操作者在农杆菌浸润操作过程中成功率也大不相同。农杆菌浸润看似简单的操作，但由于需要注射器较强的压力将菌液压入叶肉细胞中，稍不注意就会发生农杆菌喷溅到周围环境或者操作者眼睛、面部或者身上，带来潜在的生物安全性问题。因此一般在操作过程中需要佩戴护目镜、口罩、防护帽及实验服，给操作带来不便，同时喷溅到环境中的农杆菌含有表达载体等可以转基因的元件，也可能带来一定的生物安全性隐患，急需一种可以防止喷溅的装置改善这一问题。

技术实现思路

1、本实用新型解决农杆菌浸润过程中发生农杆菌喷溅到周围环境或者操作者眼睛、面部或者身上的问题，提供一种农杆菌浸润防喷溅装置，防止农杆菌浸润过程中菌液喷溅到操作者或周围环境，保证操作者的安全，同时保证农杆菌正常的浸润过程，有效的减少农杆菌菌液喷射到周围环境引发的生物安全性问题。

2、本实用新型要求保护的技术方案如下：

3、一种农杆菌浸润防喷溅装置，其特征在于，包括顶端开口的喇叭口型防喷罩1以及嵌入防喷罩1顶端开口内其外径和防喷罩1顶端内径大小一致且成中空圆柱状的硅胶安装件2；所述的防喷罩1通过硅胶安装件2套入注射器3的锥头5与浸润装置相连，所述硅胶安装件2与锥头5和空筒4相连接的外表面紧贴合；所述防喷罩1的总体高度与注射器3的锥头5高度相同，硅胶安装件2的高度小于防喷罩1的高度；所述硅胶安装件2内径和注射器3的锥头5外径大小相同。

4、优选地，所述防喷罩1为完全透明的塑料材质。

5、优选地，所述硅胶安装件2顶端和防喷罩1顶端齐平设置。

6、优选地，所述硅胶安装件2竖直方向上的某一中间位置和防喷罩1顶端齐平设置。

7、优选地，所述硅胶安装件2外表面和所述防喷罩1顶端内表面紧配合。

8、优选地，所述硅胶安装件2高度低于注射器3的锥头5的高度。

9、有益效果：

10、本实用新型提供一种农杆菌浸润防喷溅装置，包括顶端开口的喇叭口型防喷罩1、嵌入防喷罩1顶端开口内其外径和防喷罩1顶端内径大小一致且成中空圆柱状的硅胶安装件2；所述的防喷罩1通过硅胶安装件2套入注射器3的锥头5与浸润装置相连，所述硅胶安装件2与锥头5和空筒4相连接的外表面紧贴合；所述防喷罩1的总体高度与注射器3的锥头5高度相同，在农杆菌浸润过程中，防喷罩1在浸润点周围形成一个密闭空间，防止农杆菌浸润过程中菌液喷溅到操作者或周围环境，保证了操作者的安全，解决了农杆菌浸润过程中发生农杆菌喷溅到周围环境或者操作者眼睛、面部或者身上的问题，有效的减少农杆菌菌液喷射到周围环境引发的生物安全性问题，防护效果好；嵌入防喷罩1顶端开口内的硅胶安装件2的外径与防喷罩1顶端开口内径相同，硅胶安装件2内径与注射器3的锥头5外径相同，可以稳固、方便的安装于浸润装置上；本实用新型提供的农杆菌浸润防喷溅装置结构简单，操作方便。

11、所述防喷罩1为完全透明的塑料材质，具有较好的支撑性。

12、所述硅胶安装件2外表面和所述防喷罩1顶端内表面紧配合，可自由拆卸，使用方便。

技术特征：

1.一种农杆菌浸润防喷溅装置，其特征在于，包括顶端开口的喇叭口型防喷罩(1)以及嵌入防喷罩(1)顶端开口内其外径和防喷罩(1)顶端内径大小一致且成中空圆柱状的硅胶安装件(2)；所述的防喷罩(1)通过硅胶安装件(2)套入注射器(3)的锥头(5)与浸润装置相连，所述硅胶安装件(2)与锥头(5)和空筒(4)相连接的外表面紧贴合；所述防喷罩(1)的总体高度与注射器(3)的锥头(5)高度相同，硅胶安装件(2)的高度小于防喷罩(1)的高度；所述硅胶安装件(2)内径和注射器(3)的锥头(5)外径大小相同。

2.根据权利要求1所述的一种农杆菌浸润防喷溅装置，其特征在于，所述防喷罩(1)为完全透明的塑料材质。

3.根据权利要求2所述的一种农杆菌浸润防喷溅装置，其特征在于，所述硅胶安装件(2)顶端和防喷罩(1)顶端齐平设置。

4.根据权利要求3所述的一种农杆菌浸润防喷溅装置，其特征在于，所述硅胶安装件(2)竖直方向上的某一中间位置和防喷罩(1)顶端齐平设置。

5.根据权利要求4所述的一种农杆菌浸润防喷溅装置，其特征在于，所述硅胶安装件(2)外表面和所述防喷罩(1)顶端内表面紧配合。

6.根据权利要求1-5任一所述的一种农杆菌浸润防喷溅装置，其特征在于，所述硅胶安装件(2)高度低于注射器(3)的锥头(5)的高度。

技术总结
本技术涉及分子生物学领域，具体涉及一种农杆菌浸润防喷溅装置，包括顶端开口的喇叭口型防喷罩以及嵌入防喷罩顶端开口内其外径和防喷罩顶端内径大小一致且成中空圆柱状的硅胶安装件；所述的防喷罩通过硅胶安装件套入注射器的锥头与浸润装置相连，所述硅胶安装件与锥头和空筒相连接的外表面紧贴合；所述防喷罩的总体高度与注射器的锥头高度相同，硅胶安装件的高度小于防喷罩的高度；所述硅胶安装件内径和注射器的锥头外径大小相同。本技术提供的农杆菌浸润防喷溅装置，防止农杆菌浸润过程中菌液喷溅到操作者或周围环境，保证操作者的安全，有效减少农杆菌菌液喷射到周围环境引发的生物安全性问题。

技术研发人员：黄昌军,袁诚,曾建敏,于海芹,刘勇,姜宁,盖晓彤,童治军,方敦煌,隋学艺,白戈,张光海,姚恒,赵璐,王丙武,高玉龙
受保护的技术使用者：云南省烟草农业科学研究院
技术研发日：20230427
技术公布日：2024/1/15