一种血液中未知序列甲基化程度的实时检测系统

本技术涉及血液检测设备，尤其涉及一种血液中未知序列甲基化程度的实时检测系统。

背景技术：

1、最著名的核酸表观遗传修饰是甲基化，启动子区域5-mc高甲基可以化沉默某些肿瘤抑制基因；另一方面，5-hmc循环水平的降低与实体肿瘤的发展密切相关。然而，5-mc和5-hmc相似的碱基配对特性和低丰度(分别为总dna碱基的1％和<的0.005％)使它们的测定成为一个显著的挑战。

2、目前市面上主要的癌症标志物(甲基化标志物浓度)检测仪器为各类试剂盒，但此种试剂盒过度依赖pcr(聚合酶链式反应)仪器，但pcr耗时长，检测效率低，费用高，容易污染，操作繁琐，因此需要配备专业的实验室和工作人员。不能无pcr快速实时地检测未知序列的肿瘤标志物。

技术实现思路

1、本实用新型主要解决现有技术的甲基化标志物浓度检测依赖pcr仪器，检测效率低，不能无pcr快速实时地检测未知序列的肿瘤标志物的技术问题，提出一种血液中未知序列甲基化程度的实时检测系统，以实现无需pcr扩增的高效定量检测，降低检测时间和成本，提高检测效率。

2、本实用新型提供了一种血液中未知序列甲基化程度的实时检测系统，包括：光纤光栅解调仪、第一储液室、第二储液室、光纤生物传感器、蠕动泵和混合竞争富集腔；

3、所述第一储液室盛有血液样本；所述第一储液室通过一根软管伸入混合竞争富集腔中；

4、所述第二储液室盛有cab-mbs的溶液；所述第二储液室通过一根软管伸入混合竞争富集腔中；

5、所述混合竞争富集腔中盛有生物素化单甲基化检测探针；

6、所述混合竞争富集腔还通过一根软管与蠕动泵连通；

7、所述光纤的一部分被修饰成为光纤生物传感器；所述光纤生物传感器在混合竞争富集腔中设置；

8、所述光纤连接光栅解调仪。

9、优选的，所述光纤具有光纤纤芯和光纤包层；

10、所述光纤的光纤生物传感器部分的光纤包层外镀金后形成金沉积层。

11、优选的，所述金沉积层的外周设置链霉亲和素聚合物修饰层。

12、优选的，所述光纤的光纤生物传感器部分的金沉积层的厚度为30-70nm。

13、优选的，所述光纤的光纤生物传感器部分的光纤纤芯蚀刻成为倾斜光栅；

14、所述倾斜光栅相位掩膜蚀刻成8°。

15、优选的，所述混合竞争富集腔置于磁架中。

16、优选的，所述生物素化单甲基化检测探针，包括：甲基化5-mc探针或甲基化5-hmc探针。

17、本实用新型提供的一种血液中未知序列甲基化程度的实时检测系统，将光纤应用到生物标志物检测上，利用直接竞争法，通过检测倾斜光栅和透射谱变化，解调分析从而判断不同的竞争结果，进而确定血液样品中低浓度未知序列全局甲基化5-mc(5-hmc)程度，可以实现无需pcr扩增的高效定量检测，从而使病床旁可联网、实时高效、检测极限低、灵敏度高、低耗损低价格的癌症标志物甲基化程度检测成为可能，提高检测效率。本实用新型采用光纤生物传感器，其优势在于小型化、高灵敏度、光纤生物传感器无需pcr扩增，大大降低了检测时间和成本，将实时快速的检测成为了可能。能够做到实时定量检测病人血液样本中低浓度未知序列的全局甲基化5-mc(5-hmc)程度。与此同时，其抗电磁干扰力强、可进行远程监测。设置倾斜光栅能够增强包层模共振，大大提高了检测灵敏度。使用的光纤光栅解调仪，用于检测光纤倾斜光栅透射谱变化，解调分析从而判断不同的竞争结果。

技术特征：

1.一种血液中未知序列甲基化程度的实时检测系统，其特征在于，包括：光纤光栅解调仪（1）、光纤（2）、第一储液室（3）、第二储液室（4）、光纤生物传感器（5）、蠕动泵（6）和混合竞争富集腔（8）；

2.根据权利要求1所述的血液中未知序列甲基化程度的实时检测系统，其特征在于，所述光纤（2）具有光纤纤芯（12）和光纤包层（11）；

3.根据权利要求2所述的血液中未知序列甲基化程度的实时检测系统，其特征在于，所述金沉积层（10）的外周设置链霉亲和素聚合物修饰层（14）。

4.根据权利要求3所述的血液中未知序列甲基化程度的实时检测系统，其特征在于，所述光纤（2）的光纤生物传感器（5）部分的金沉积层（10）的厚度为30-70nm。

5.根据权利要求3所述的血液中未知序列甲基化程度的实时检测系统，其特征在于，所述光纤（2）的光纤生物传感器（5）部分的光纤纤芯（12）蚀刻成为倾斜光栅（13）；

6.根据权利要求1所述的血液中未知序列甲基化程度的实时检测系统，其特征在于，所述混合竞争富集腔（8）置于磁架（9）中。

7.根据权利要求1所述的血液中未知序列甲基化程度的实时检测系统，其特征在于，所述生物素化单甲基化检测探针，包括：甲基化5-mc探针或甲基化5-hmc探针。

技术总结
本技术涉及血液检测设备技术领域，提供一种血液中未知序列甲基化程度的实时检测系统，包括：光纤光栅解调仪、第一储液室、第二储液室、光纤生物传感器、蠕动泵和混合竞争富集腔；所述第一储液室盛有血液样本；所述第一储液室通过一根软管伸入混合竞争富集腔中；所述第二储液室盛有CAb‑MBs的溶液；所述第二储液室通过一根软管伸入混合竞争富集腔中；所述混合竞争富集腔中盛有生物素化单甲基化检测探针；所述混合竞争富集腔还通过一根软管与蠕动泵连通；所述光纤的一部分被修饰成为光纤生物传感器；所述光纤生物传感器在混合竞争富集腔中设置；所述光纤连接光栅解调仪。本技术能够实现无需PCR扩增的高效定量检测。

技术研发人员：魏赫一,韩伯璇,孙铭雪,曹悦,段怡凡,孙一铭,吕游,张扬
受保护的技术使用者：大连理工大学
技术研发日：20230609
技术公布日：2024/1/15