四妙勇安汤调控miR-548j-5p/IL-17A信号轴在治疗脉管炎中的应用

本发明属于生物医药和分子生物学，具体涉及四妙勇安汤调控mir-548j-5p/il-17a信号轴在治疗脉管炎中的应用。

背景技术：

1、公开该背景技术部分的信息仅仅旨在增加对本发明的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。

2、血栓闭塞性脉管炎(thromboangiitis obliterans，tao)是一种慢性、进展性、节段性的外周血管疾病，主要影响患者上、下肢中小动静脉，多发于20至40岁的青壮年，通常有吸烟史，广泛分布于中东、远东、东南亚、东欧和南美洲等地区。临床表现通常始于远端小动脉狭窄或闭塞引起的缺血症状，早期典型症状主要有小腿间歇性跛行、夜间静息痛，随着疾病的发展肢体末端出现缺血性溃疡、截肢，甚至死亡。前瞻性研究发现，34％的tao患者将在诊断后15年内经历截肢，平均死亡年龄为52岁。迄今为止，tao的分子生物学机制仍不明确，缺乏敏感且具备特异性的早期诊断性标志物，阻碍了对tao患者及时、有效的治疗。

3、四妙勇安汤最早记录于东汉的《华佗神医秘传》中，后于清代收录到《验方新编》中，由金银花、玄参、当归和甘草按3：3：2：1的比重组成的中药方剂，是治疗湿热毒盛型“脱疽”的常用方，具有清热解毒、活血化瘀、通络止痛的作用。现代研究证明，四妙勇安汤在治疗外周血管疾病时具有抗炎、降脂、稳定斑块等药理作用。同时有临床观察显示，四妙勇安汤在治疗tao患者方面有良好的治疗效果。因此，阐明四妙勇安汤对tao患者的作用机制，有助于为探索tao的生物标志物和靶向治疗提供方向。

技术实现思路

1、针对现有技术存在的不足，本发明提供四妙勇安汤调控mir-548j-5p/il-17a信号轴在治疗脉管炎中的应用。本发明通过研究发现，tao患者外周血单个核细胞(pbmcs)中il-17a的表达是增加的。同时，通过mirna芯片分析发现，mir-548j-5p在tao患者中是下调的mirna。进一步研究发现mir-548j-5p可以通过结合il-17a的3′utr来抑制其表达。在此基础上，对四妙勇安汤治疗tao的作用机制进行了动物体内、外实验，结果表明四妙勇安汤能够促进mir-548j-5p的表达，从而抑制il-17a，进而对tao大鼠起到治疗作用。基于上述研究成果，从而完成本发明。

2、具体的，本发明涉及以下技术方案：

3、本发明的第一个方面，提供检测mir-548j-5p和/或il-17a的试剂在制备用于筛查、(辅助)诊断、检测、监测或预测血栓闭塞性脉管炎进展的产品中的应用。

4、本发明的第二个方面，提供一种用于筛查、(辅助)诊断、检测、监测或预测血栓闭塞性脉管炎进展的系统，所述系统包括：

5、获取模块，其被配置为：获取受试者待测样品中mir-548j-5p和/或il-17a的表达水平；

6、评估模块，其被配置为：根据获取模块获得的mir-548j-5p和/或il-17a的表达水平判断所述受试者的患病情况。

7、本发明的第三个方面，提供含有四妙勇安汤的制剂在如下至少一种中的应用：

8、(a1)促进血管内皮细胞中mir-548j-5p和/或enos的表达或制备促进内皮细胞中mir-548j-5p和/或enos的表达的产品；

9、(a2)抑制血管内皮细胞中il-17a、tf和/或vwf的表达或制备抑制内皮细胞中il-17a、tf和/或vwf表达的产品；

10、(a3)治疗血栓闭塞性脉管炎的药物。

11、以上一个或多个技术方案的有益技术效果：

12、上述技术方案研究从表观遗传角度研究了mir-548j-5p与il-17a在血栓闭塞性脉管炎发生中的作用及四妙勇安汤的靶向调控机制，为临床诊断及治疗提供新的靶点与途径，具有良好的实际应用之价值。

技术特征：

1.检测mir-548j-5p和/或il-17a的试剂在制备用于筛查、(辅助)诊断、检测、监测或预测血栓闭塞性脉管炎进展的产品中的应用。

2.一种用于筛查、(辅助)诊断、检测、监测或预测血栓闭塞性脉管炎进展的系统，其特征在于，所述系统包括：

3.如权利要求2所述系统，其特征在于，所述受试者为人。

4.如权利要求2所述系统，其特征在于，所述待测样品包括外周血单个核细胞。

5.含有四妙勇安汤的制剂在如下至少一种中的应用：

6.如权利要求5所述应用，其特征在于，所述含有四妙勇安汤的制剂包括四妙勇安汤冻干粉或四妙勇安汤药物血清。

7.如权利要求6所述应用，其特征在于，所述四妙勇安汤药物血清为将四妙勇安汤对大鼠进行灌胃后，心脏取血后获得。

8.如权利要求6所述应用，其特征在于，所述四妙勇安汤的原料组成，按质量份数计，包括：金银花80-100份、玄参80-100份、当归50-70份、甘草20-40份；进一步的，所述四妙勇安汤的原料组成，按质量份数计，包括：金银花90份、玄参90份、当归60份、甘草30份。

9.如权利要求6所述应用，其特征在于，所述血管内皮细胞为人脐静脉内皮细胞。

10.如权利要求6所述应用，其特征在于，所述(a1)-(a2)中，所述产品为药物或试验试剂，所述试验试剂供基础科学实验研究使用。

技术总结
本发明属于生物医药和分子生物学技术领域，具体涉及四妙勇安汤调控miR‑548j‑5p/IL‑17A信号轴在治疗脉管炎中的应用。本发明通过研究发现，血栓闭塞性脉管炎患者外周血单个核细胞中IL‑17A的表达是增加的。同时，通过miRNA芯片分析发现，miR‑548j‑5p在血栓闭塞性脉管炎患者中是下调的miRNA。进一步研究发现miR‑548j‑5p可以通过结合IL‑17A的3′UTR来抑制其表达。在此基础上，对四妙勇安汤治疗TAO的作用机制进行了动物体内、外实验，结果表明四妙勇安汤能够促进miR‑548j‑5p的表达，从而抑制IL‑17A，进而对血栓闭塞性脉管炎大鼠起到治疗作用。

技术研发人员：李霞,王彬,李昊阳,张振,褚楚,张云虹,刘鑫馗,周苗苗,范楠楠,秦丽萍,牛亮仲,李莉华,李芳
受保护的技术使用者：山东中医药大学
技术研发日：
技术公布日：2024/4/17