本发明涉及微藻高附加值产物的提取领域,更特别地,涉及一种从微藻提取虾青素脂质体的方法。
背景技术:
1、虾青素是一种脂溶性酮式类胡萝卜素,呈红色。因其分子结构含有大量不饱和双键,而具有优越的抗氧化活性,有抗炎、抗癌、改善运动功能等多种生理活性,还可保护中枢神经系统、用于预防和治疗心血管和动脉粥样硬化等,基于其安全性及对人类和动物健康的有益效果,虾青素已经成为最重要的类胡萝卜素生产对象之一,并被广泛应用于食品保健、医药、安全着色和水产养殖等领域。
2、雨生红球藻(haematococcus pluvialis)被视作天然虾青素的主要来源,其提取出的虾青素95%以酯化形态存在,5%以游离形态存在,均为s构型。目前常用的提取方法主要有:溶剂萃取法、油提取法、超临界流体萃取、酶水解法。此外,还有其他方法如:磁场辅助提取、超声波辅助提取、高压处理法等。
3、已有虾青素提取方法一般仅关注虾青素的得率,所提取的虾青素具有容易被氧化、分散性不好以及生物利用度差等缺点。因此,需要研发一种新的虾青素提取方法。
技术实现思路
1、为解决以上问题,本发明提供了一种从微藻提取虾青素脂质体的方法,包括以下步骤:
2、s1:将所述微藻制成细胞悬液进行破碎,得到细胞破碎液;
3、s2:向所述细胞破碎液中加入酶进行酶解,得到酶解液;
4、s3:从所述酶解液中分离上清,得到虾青素脂质体悬液。
5、在一个具体实施方案中,s1中,通过高压均质匀浆的方式使所述微藻进行破碎。
6、在一个具体实施方案中,s1中所述细胞悬液在800bar以上的压力下进行匀浆1次或多次。800bar以上的压力下进行匀浆可使藻细胞基本破碎完全。
7、在一个具体实施方案中,所述细胞悬液中还包含表面活性剂。表面活性剂的加入可大大减少酶解时间,同时大大提高虾青素脂质体的得率。
8、在一个具体实施方案中,所述表面活性剂为triton x-100、吐温、span中的一种或多种组合。
9、在一个具体实施方案中,s2中所述酶为中性蛋白酶、蛋白酶k、木瓜蛋白酶中的一种或多种。
10、在一个具体实施方案中,s2中所述酶为中性蛋白酶,酶解体系的ph为7.8-8.2,酶工作浓度为1.2u·mg-1以上。
11、中性蛋白酶的加入可大大提高虾青素的得率,在上述ph和酶浓度的条件下,虾青素的得率处于较高水平。
12、在一个具体实施方案中,所述方法包括以下步骤:
13、s1:所述微藻制成细胞悬液,并在所述细胞悬液中加入0-0.2%吐温20,混匀,然后在高压下进行破碎,得到细胞破碎液;
14、s2:向所述细胞破碎液中加入1.2-2.4u·mg-1的中性蛋白酶,处理1-30min,得到酶解液;
15、s3:从所述酶解液获取上清,得到所述虾青素脂质体悬液。
16、上述条件组合可大大提高虾青素的得率,最高可使虾青素的得率提高至90%左右。所提取的虾青素均以脂质体的形式存在,并且所得到的脂质体具有均匀的粒径分布,以及良好的分散性和稳定性,脂质体颗粒之间不发生膜融合。
17、在一个具体实施方案中,所述方法还包括对s3得到的所述虾青素脂质体悬液进行巴氏消毒,然后加入保护剂,并在无氧环境保存的步骤。
18、在一个具体实施方案中,所述保护剂为5mg/ml以上的维生素c。
19、巴氏消毒可避免产品长期存放过程中长菌,加入5mg/ml以上的维生素c可延长虾青素脂质体的货架期。
20、在一个具体实施方案中,不去除所述虾青素脂质体中的蛋白组分。我们的实验中发现,所提取的虾青素脂质体中含有的蛋白组分可能与虾青素存在某种协同作用,增强抗氧化能力。
21、本发明还提供了上述方法制备的虾青素脂质体在制备食品中的应用。由于本发明的方法制备的虾青素脂质体具有良好的抗氧化性和生物利用度,因此可用作制备软饮料、凝胶糖果等食品的原料。
22、本发明的方法直接从雨生红球藻等微藻中以脂质体形式提取虾青素,得到的虾青素脂质体具有均匀的粒径分布、良好的分散性和稳定,提高了其生物利用度,有助于其在医药和食品工业中的更广泛应用,为虾青素的生产和应用开辟新的前景。
1.一种从微藻提取虾青素脂质体的方法,其特征在于,包括以下步骤:
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,s1中,通过高压均质匀浆的方式使所述微藻进行破碎。
3.根据权利要求2所述的方法,其特征在于,s1中所述细胞悬液在800bar以上的压力下进行匀浆1次或多次。
4.根据权利要求3所述的方法,其特征在于,所述细胞悬液中还含有表面活性剂。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述表面活性剂为triton x-100、吐温、span中的一种或多种组合。
6.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,s2中所述酶为中性蛋白酶、蛋白酶k、木瓜蛋白酶中的一种或多种。
7.根据权利要求6所述的方法,其特征在于,s2中所述酶为中性蛋白酶,酶解体系的ph为7.8-8.2,酶工作浓度为1.2u·mg-1以上。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于,包括以下步骤:
9.根据权利要求1-8中任一项所述的方法,其特征在于,还包括对s3得到的所述虾青素脂质体悬液进行巴氏消毒,然后加入保护剂并在无氧环境保存的步骤,所述保护剂为5mg/ml以上的维生素c。
10.权利要求1-9中任一项所述的方法制备的虾青素脂质体在制备食品中的应用。