一株代谢亚油酸产共轭亚油酸且具有增强肠道屏障功能的罗伊氏粘液乳杆菌及其应用

本发明属于微生物，具体涉及一株代谢亚油酸产共轭亚油酸且具有增强肠道屏障功能的罗伊氏粘液乳杆菌及其应用。

背景技术：

1、肠道屏障的定义为：能够阻止肠腔中的毒素和病原菌透过肠黏膜侵入到组织器官和血液系统的结构及功能的总和，对人体健康起着重要的作用。肠屏障的破坏会瓦解肠上皮细胞的紧密性，破坏黏液层，甚至上皮细胞间的紧密连接，促使肠道通透性增加。同时，树突状细胞在肠上皮细胞下方的固有层引发炎症等疾病。

2、共轭亚油酸(cla)是一类活性代谢物，对肠道屏障具有一定的调节作用。cla是亚油酸的同分异构体，其中c9,t11-cla具极强免疫调节活性。部分乳杆菌和双歧杆菌可将亚油酸(la)转化生成cla。无论是乳杆菌还是双歧杆菌，在它们产生的cla中，c9,t11-cla同分异构体通常占据绝对优势。产cla的菌株通过调控pparγ的表达和活性，参与调控脂肪生成、炎症和代谢平衡等相关的基因，可通过ikb-α相关途径抑制nf-κb的激活和入核，在调控促炎性炎症反应和修复肠道屏障过程中都发挥着关键作用，通过提高紧密连接蛋白claudin-1、occludin和zo-1的表达量，改善肠粘膜完整性和通透性进而对肠屏障受损起到缓解作用。乳杆菌被报道具有增强肠道屏障功能，缓解肠道炎症的作用，并且乳杆菌也可代谢亚油酸产共轭亚油酸。因此，乳杆菌产生的cla可能是其发挥增强肠道屏障功能，缓解肠道炎症的关键效应分子。因此，鉴于乳杆菌具有代谢亚油酸产共轭亚油酸的优点，靶向筛选产cla并增强肠道屏障功能的益生菌具有非常广泛的应用前景。

技术实现思路

1、鉴于此，本发明的目的在于提供一株代谢亚油酸(la)产共轭亚油酸(cla)且具有增强肠道屏障功能的罗伊氏粘液乳杆菌(limosilactobacillus reuteri)及其应用。

2、为了达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

3、本发明提供一株代谢亚油酸产共轭亚油酸的罗伊氏粘液乳杆菌(limosilactobacillus reuteri)dpul-m94，于2023年9月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，菌株保藏编号为cctcc m 20231623，保藏地址：中国武汉大学。

4、基于上述技术方案，进一步地，所述的罗伊氏粘液乳杆菌dpul-m94能够代谢亚油酸产共轭亚油酸。

5、本发明另一方面提供一种后生元，所述的后生元包括亚油酸和上述的罗伊氏粘液乳杆菌dpul-m94或其提取物。

6、基于上述技术方案，进一步地，所述的亚油酸和罗伊氏粘液乳杆菌dpul-m94或其提取物的质量比为1:10-1:100。

7、本发明还提供上述的罗伊氏粘液乳杆菌dpul-m94、上述的后生元在制备增强肠道屏障功能、预防或治疗肠道屏障损伤的药物中的应用。

8、基于上述技术方案，进一步地，所述增强肠道屏障功能包括调节免疫屏障、机械屏障和化学屏障。

9、基于上述技术方案，进一步地，所述的增强肠道屏障功能包括降低炎症因子inos、il-1β、il-6和tnf-α的mrna的过度表达，上调抗炎因子il-10的mrna的表达。

10、基于上述技术方案，进一步地，所述的增强肠道屏障功能包括上调肠道细胞中ppar-γ的mrna水平，通过iκb-α降低nf-κb的激活导致促炎细胞因子的分泌减少，促进结肠紧密连接蛋白和和粘蛋白的表达，进而发挥增强肠道屏障的作用。

11、基于上述技术方案，进一步地，所述预防或治疗肠道屏障损伤包括改善回肠、结肠组织学病变以及提高回肠、结肠的紧密连接蛋白和粘蛋白的表达量。

12、本发明的有益效果如下：

13、本发明提供一株代谢亚油酸产共轭亚油酸的罗伊氏粘液乳杆菌dpul-m94，所述的罗伊氏粘液乳杆菌dpul-m94在体内外能够代谢亚油酸并产共轭亚油酸，可单独或与la联合使用制备增强肠道屏障功能的合生元或后生元产品，通过促进杯状细胞和粘蛋白的增加，改善粘液层的损伤程度，促进ppar-γ的增加，促进结肠紧密连接蛋白的表达等多种途径，进而发挥增强肠道屏障的作用，具有非常好的应用前景。

技术特征：

1.一株代谢亚油酸产共轭亚油酸的罗伊氏粘液乳杆菌(limosilactobacillusreuteri)dpul-m94，于2023年9月6日保藏于中国典型培养物保藏中心，菌株保藏编号为cctcc m 20231623。

2.根据权利要求1所述的罗伊氏粘液乳杆菌dpul-m94，其特征在于，所述的罗伊氏粘液乳杆菌dpul-m94能够代谢亚油酸产共轭亚油酸。

3.一种后生元，其特征在于，所述的后生元包括亚油酸和权利要求1所述的罗伊氏粘液乳杆菌dpul-m94或其提取物。

4.根据权利要求3所述的后生元，其特征在于，所述的亚油酸和罗伊氏粘液乳杆菌dpul-m94或其提取物的质量比为1:10-1:100。

5.权利要求1或2所述的罗伊氏粘液乳杆菌dpul-m94、权利要求3或4所述的后生元在制备增强肠道屏障功能、预防或治疗肠道屏障损伤的药物中的应用。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述增强肠道屏障功能包括调节免疫屏障、机械屏障和化学屏障。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的增强肠道屏障功能包括降低炎症因子inos、il-1β、il-6和tnf-α的mrna的过度表达，上调抗炎因子il-10的mrna的表达。

8.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述的增强肠道屏障功能包括上调肠道细胞中ppar-γ的mrna水平，通过iκb-α降低nf-κb的激活导致促炎细胞因子的分泌减少，促进结肠紧密连接蛋白和和粘蛋白的表达，进而发挥增强肠道屏障的作用。

9.根据权利要求5所述的应用，其特征在于，所述预防或治疗肠道屏障损伤包括改善回肠、结肠组织学病变以及提高回肠、结肠的紧密连接蛋白表达量。

技术总结
本发明公开了一株代谢亚油酸产共轭亚油酸且具有增强肠道屏障功能的罗伊氏粘液乳杆菌及其应用，属于微生物技术领域。本发明的罗伊氏乳杆菌DPUL‑M94可以在体外代谢LA产生CLA；能够下调促炎因子IL‑1β，IL‑6和TNF‑α的水平，增加抗炎细胞因子IL‑10的水平可以缓解LPS诱导RAW264.7炎症模型，调控PPARγ的表达，抑制NF‑κB通路的激活，促进粘蛋白和紧密连接蛋白的增加，且罗伊氏乳杆菌DPUL‑M94可以在体内代谢LA产生CLA改善乳鼠受损的肠屏障，具有很好的应用前景。

技术研发人员：妥彦峰,管成,牟光庆,钱方
受保护的技术使用者：大连工业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/6/23