一种浒苔多糖裂解酶及其应用

本申请涉及生物，尤其涉及一种浒苔多糖裂解酶及其应用。

背景技术：

1、浒苔(enteromorpha prolifera)是我国黄海、东海分布最主要的大型绿藻之一，具有食、药用价值(本草纲目、临海异物志等)。浒苔生长迅速，富含胶质多糖，被认为是极具前途的可再生碳源，在生物医药和生物能源方面具有极大的应用潜力。浒苔多糖是浒苔细胞壁的主要组分，是一种硫酸杂多糖，含量最高可达藻体细胞干重的50％。近年来大量文献报道了浒苔多糖具有清除自由基、降血脂、降血糖、抗脂质过氧化及预防脂肪肝等生物活性，以及在生物能源方面的应用。但是大分子的浒苔多糖由于分子量大，不容易被吸收，在应用方面受到很大的限制。有研究表明，多糖分子量大小与其抗肿瘤活性、抗血栓活性、抗氧化活性等作用之间有显著的相关性，而且只有在一定的分子量范围内才有较高的生物学活性。

2、目前，关于浒苔多糖裂解的方法主要有酸解法和酶解法。由于酸解法存在反应条件较难控制、活性基团易丢失及环境污染等问题，酶解法成为了浒苔多糖水解的优选。但是，酶解需要在水溶液中完成，浒苔多糖酶解的第一步是配制浒苔多糖水溶液，而浒苔多糖分子量大，在水中溶解度小，很难溶解，这严重影响了浒苔多糖酶解的工业化应用。因此浒苔多糖酶解工业化应用亟需耐高温浒苔多糖裂解酶。现有技术中缺少可以耐受热水，尤其是沸水而保持活性的浒苔多糖裂解酶，因此发掘一种耐高温的的浒苔多糖裂解酶并实现其工程化应用具有重要的研究前景和意义。

技术实现思路

1、鉴于上述现有技术的不足，本申请的目的在于提供一种浒苔多糖裂解酶及其应用，旨在解决现有技术缺少耐高温浒苔多糖裂解酶的问题。

2、本申请的技术方案如下：

3、本申请的第一方面，提供一种浒苔多糖裂解酶，所述浒苔多糖裂解酶具有：

4、(i)如seq id no.1所示的氨基酸序列；或

5、(ii)如(i)所述的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个氨基酸获得的氨基酸序列，且与(i)所述的氨基酸序列功能相同的氨基酸序列；或

6、(iii)与如(i)或(ii)所述的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或100％序列同一性的氨基酸序列。

7、可选地，氨基酸序列如seq id no.1所示的所述浒苔多糖裂解酶的编码基因的核苷酸序列如seqidno.2所示。

8、可选地，所述浒苔多糖裂解酶从tamlana fucoidanivorans cw2-9中克隆并重组表达获得。

9、本申请的第二方面，提供一种核酸，包含编码本申请提供的多糖裂解酶的核苷酸序列。

10、本申请的第三方面，提供一种载体，包含编码本申请提供的浒苔多糖裂解酶的核苷酸序列。

11、本申请的第四方面，提供一种宿主细胞，包含本申请提供的核酸或载体。

12、本申请的第五方面，提供一种上述浒苔多糖裂解酶在裂解浒苔多糖中的应用。

13、本申请的有益效果：

14、本申请提供的浒苔多糖裂解酶具有较高的温度耐受性，在沸水浴后仍具有较高的酶活力。能够在高温裂解浒苔多糖。添加本申请提供的浒苔多糖裂解酶，可以使浒苔多糖更易溶解，不易形成凝胶。此外，本申请浒苔多糖裂解酶裂解浒苔多糖产生的寡糖，具有较好的抗氧化活性和益生活性。

技术特征：

1.一种浒苔多糖裂解酶，其特征在于，所述浒苔多糖裂解酶具有：

2.根据权利要求1所述的浒苔多糖裂解酶，其特征在于，氨基酸序列如seq id no.1所示的所述浒苔多糖裂解酶的编码基因的核苷酸序列如seq id no.2所示。

3.根据权利要求1所述的浒苔多糖裂解酶，其特征在于，所述浒苔多糖裂解酶从tamlana fucoidanivorans cw2-9中克隆并重组表达获得。

4.核酸，其特征在于，所述核酸包含编码权利要求1至3任一项所述的浒苔多糖裂解酶的核苷酸序列。

5.载体，其特征在于，所述载体包含编码权利要求1至3任一项所述的浒苔多糖裂解酶的核苷酸序列。

6.宿主细胞，其特征在于，所述宿主细胞包含权利要求4所述的核酸或权利要求5所述的载体。

7.一种权利要求1至3任一项所述的浒苔多糖裂解酶在裂解浒苔多糖中的应用。

技术总结
本申请涉及生物技术领域，具体公开一种浒苔多糖裂解酶及其应用。其中浒苔多糖裂解酶具有(i)如SEQ ID No.1所示的氨基酸序列；或(ii)如(i)所述的氨基酸序列经取代、缺失或添加一个或多个氨基酸获得的氨基酸序列，且与(i)所述的氨基酸序列功能相同的氨基酸序列；或(iii)与如(i)或(ii)所述的氨基酸序列具有至少80％、至少85％、至少90％、至少95％或100％序列同一性的氨基酸序列。本申请提供的浒苔多糖裂解酶在经过沸水浴后仍具有较高的酶活力，能耐受高温条件，将浒苔多糖裂解成寡糖，且裂解得到的寡糖具有较好的抗氧化活性和益生活性。

技术研发人员：徐艳,王淑珍,郭佳玲,严汉彬,李翰
受保护的技术使用者：河源职业技术学院
技术研发日：
技术公布日：2024/5/8