外周血单核细胞中CFⅠm25在诊断冠心病中的应用

本发明属于分子标志物，特别涉及外周血单核细胞中cfⅰm25的提取和检测，以及其表达量检测制剂在制备冠心病诊断试剂中的应用。

背景技术：

1、cfⅰm25是剪切因子ⅰ中25kda的亚基，在真核生物前体mrna的3'端加工中发发挥关键作用。3'端加工机制在细胞和分子层面上对维持细胞稳态十分重要，其异常是许多肿瘤学、免疫学和神经学疾病的共同特征。

2、cn114152752a公开了cfim25在检测或治疗动脉粥样硬化中的应用。其利用westernblot技术检测了cfim25在动脉粥样硬化患者的主动脉组织中表达水平，利用油红染色及主动脉ct成像检测cfim25敲除小鼠的动脉粥样斑块的病变区域大小以及利用实时荧光定量pcr技术检测细胞增殖标记物ccnd1、igf1r表达量随cfim25沉默而增高且存在选择性多聚腺苷酸化。从而得出cfim25可作为动脉粥样硬化的治疗靶点的判断，操作简单，重复性好。

3、单核/巨噬细胞在冠心病的发生发展中发挥重要作用。既往研究表明，脂多糖刺激的巨噬细胞伴随着3'非翻译区域的缩短和翻译率的降低，表明3'非翻译区域的编辑与巨噬细胞对冠心病的调节之间存在潜在联系，这种联系可能是由cfⅰm25介导的。然而，目前cfⅰm25在冠心病中的作用尚不明确。

技术实现思路

1、解决的技术问题：本发明提供外周血单核细胞中cfⅰm25在诊断冠心病中的应用，该分子及其检测制剂可用作冠心病诊断生物标志物，可制备冠心病诊断试剂。

2、技术方案：核酸序列如seq id no.1所示的cfⅰm25作为分子标志物在制备通过外周血单核细胞检测冠心病产品中的应用。

3、上述产品为一种早期诊断试剂盒。

4、上述试剂盒中含有检测cfⅰm25表达量的实时定量pcr扩增引物。

5、上述引物如seq id no.2和seq id no.3所示。

6、通过外周血单核细胞检测冠心病的试剂盒，含有核酸序列如seq id no.1所示的cfⅰm25。

7、还含有如seq id no.2和seq id no.3所示的引物。

8、有益效果：本发明通过提取人外周血单核细胞中的cfⅰm25并进行检测，发现cfⅰm25表达量与冠状动脉病变的严重程度呈负相关，病变患者及正常对照中表达差异具有显著统计学意义，其表达量在病变患者中显著下调(p<0.05)。通过比较cfⅰm25在不同人群中的表达，可区分冠心病患者及正常人群，作为诊断的生物标志物。

9、本发明提供了一种适用于冠心病分子鉴定的标准鉴定方法，该分子能有效的区分正常人和冠心病患者，应用其表达水平进行诊断，可以早期发现冠心病患者，降低冠心病死亡率，改善患者预后。目前冠心病的主要诊断方法存在手术危险系数高、辐射大等风险，通过收集患者外周血进行检测，具有创伤小、成本低、对患者伤害小、可重复性好等优点，更易于被接受。

技术特征：

1.核酸序列如seq id no.1所示的cfⅰm25作为分子标志物在制备通过外周血单核细胞检测冠心病产品中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品为一种早期诊断试剂盒。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于，所述试剂盒中含有检测cfⅰm25表达量的实时定量pcr扩增引物。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于，所述引物如seq id no.2和seq id no.3所示。

5.通过外周血单核细胞检测冠心病的试剂盒，其特征在于，含有核酸序列如seq idno.1所示的cfⅰm25。

6.根据权利要求5所述试剂盒，其特征在于，还含有如seq id no.2和seq id no.3所示的引物。

技术总结
外周血单核细胞中CFⅠm25在诊断冠心病中的应用，属于分子生物学领域。该检测方法主要包括人体外周血单核细胞的提取以及实时荧光定量PCR技术。本发明基于足量的人群样本，提取外周血单核细胞中的CFⅠm25，同时收集冠脉造影结果，发现了CFⅠm25表达量与冠状动脉病变严重程度相关，并且有助于冠心病的诊断。这种间接诊断冠心病的技术，仅需使用少量外周血，对患者损伤小，诊断效率高，实验成本低，有助于早期发现冠心病患者，为临床诊断及治疗提供便利。

技术研发人员：洪梅,刘孟,陈箫箫,肖芳萍
受保护的技术使用者：南京医科大学第二附属医院
技术研发日：
技术公布日：2024/5/8