DHX9作为急性髓系白血病早期诊断和预后评估标志物的应用

本发明属于生物，具体涉及dhx9基因作为急性髓系白血病早期诊断和预后评估标志物的应用。

背景技术：

1、急性髓性白血病(aml)是成年人最常见的一类造血系统肿瘤疾病，是由髓系造血细胞恶性克隆增殖引起的高度异质性疾病，其病情发展迅速，自然病程仅数月。传统的化疗5年生存率仅为20～35％，而目前最有效的治疗方法异基因造血干细胞移植资源有限，且移植后仍存在复发可能。现有新的靶向药物如针对idh、flt3、bcl2为靶点的药物用于临床治疗，但疗效并不太理想，可能是由于上述靶点不是aml发生的驱动基因的缘故。

2、现有aml诊断和预后评估指标应用于临床，如t(8；21)、inv(16)、t(15；17)、t(9；11)和获得性的体细胞基因突变等。但仍有50～70％ aml患者细胞遗传学为正常染色体核型，没有白血病融合基因。目前为止，白血病缺乏较好通用标志物，因此，寻找与aml相关的分子标志物有助于研究aml的发病机制，探究新的治疗靶标，并对临床预后具有重要意义。

技术实现思路

1、为实现上述目的，本发明涉及的内容如下：

2、dhx9作为一种生物标志物，可应用于早期急性髓系白血病的诊断和预后评估。

3、dhx9作为生物标志物在制备用于急性髓系白血病早期诊断和/或预后评估的试剂盒中的用途。

4、dhx9特异性引物和/或探针在制备用于急性髓系白血病早期诊断和/或预后评估的试剂盒中的用途。

5、本发明首次发现dhx9在急性髓系白血病患者的骨髓和外周血中显著高表达，可作为早期急性髓系白血病的诊断标志物，用于判断患者是否患有急性髓系白血病。

6、本发明还发现，相较于低风险、较好预后的急性髓系白血病患者，dhx9在具有遗传学不良预后的患者体内显著高表达，表明dhx9可作为预后标志物判断患者是否有不良预后。

7、本发明提供dhx9基因在作为早期急性髓系白血病的诊断和预后评估标志物中的应用。

8、本发明还提供一种急性髓系白血病早期诊断和预后评估产品，该产品包括dhx9基因特异性检测引物和dhx9特异性检测探针。所述探针特异性检测dhx9的基因表达水平。

9、此外，本发明还提供内对照检测基因abl1基因的特异性检测引物和特异性检测探针。

10、本发明还提供一种探针组合，所述探针组合包括实时荧光定量pcr检测dhx9探针(dhx9-p)和实时荧光定量pcr检测abl1探针(abl1-p)。

11、本发明涉及的一种早期白血病标志物dhx9，其基因序列如seq id no.1所示。

12、本发明提供的生物标志物dhx9基因引物核苷酸序列如下所示：

13、dhx9-f：ataaagagtgaagaagttccagct(seq id no.2)

14、dhx9-r：ttcaagttggctcctcggtc(seq id no.3)

15、其内参基因abl1实时荧光定量pcr的引物核苷酸序列下所示：

16、abl1-f：catcacgccagtcaacagtct(seq id no.4)

17、abl1-r：ggtacaccctcccttcgtatct(seq id no.5)

18、本发明提供的生物标志物dhx9基因及其内参基因abl1实时荧光定量pcr的探针核苷酸序列如下所示：

19、dhx9-p：agcatctccgcccccacttactgatactcc(seq id no.6)

20、abl1-p：cctgtgtcccgcaatgccgctgagtatct(seq id no.7)

21、上述探针的5’端标记的荧光基团选自fam，vic中的一种，上述探针的3’端标记的荧光基团选自tamra，bhq1中的一种。

22、根据上述本发明提供的用途，其中所述dhx9特异性引物和/或探针包括：

23、1)seq id no.6所示探针，和/或

24、2)seq id no.2、3所示的引物。

25、根据上述本发明提供的用途，其中所述dhx9特异性引物和/或探针包括上述中任一项的探针组合。

26、本发明提供的探针具有以下优势：

27、本方法采用taqman实时荧光定量pcr对dhx9基因表达水平的检测，实现对急性髓系白血病的早期诊断和预后评估，对白血病的早期发现和预后评估提供参考价值。

28、本方法特异性强，敏感性强，结果稳定，具有广泛的临床应用前景。本发明提供的用于急性髓系白血病早期诊断的dhx9标志物，其区分白血病病人骨髓/外周血和正常对照的auc达0.706，区分中高危风险的白血病病人骨髓/外周血和正常对照的auc达0.813。本发明提供的方法可用于早期急性髓系白血病预后评估，高表达dhx9的患者与细胞遗传学高风险不良预后相关。

技术特征：

1.dhx9作为生物标志物在制备用于急性髓系白血病早期诊断和/或预后评估的试剂盒中的用途。

2.dhx9特异性引物和/或探针在制备用于急性髓系白血病早期诊断和/或预后评估的试剂盒中的用途。

3.一种探针组合，所述探针组合包括实时荧光定量pcr检测dhx9探针(dhx9-p)和实时荧光定量pcr检测abl1探针(abl1-p)。

4.根据权利要求3所述的探针组合，其特征在于，所述探针特异性检测dhx9的基因表达水平。

5.根据权利要求3或4所述的探针组合，其特征在于，所述探针dhx9-p序列为seq idno.6所示。

6.根据权利要求3或4所述的探针组合，其特征在于，所述探针abl1-p序列为seq idno.7所示。

7.根据权利要求3-6所述的探针组合，其特征在于，所述探针的5’端标记的荧光基团选自fam，vic中的一种。

8.根据权利要求3-6所述的探针组合，其特征在于，所述探针的3’端标记的荧光基团选自tamra，bhq1中的一种。

9.根据权利要求2所述的用途，其中所述dhx9特异性引物和/或探针包括：

10.根据权利要求2所述的用途，其中所述dhx9特异性引物和/或探针包括权利要求3-8任一项所述的探针组合。

技术总结
本发明涉及DHX9基因作为急性髓系白血病早期诊断和预后评估标志物的应用，属于生物技术领域。本发明首次公开了DHX9基因作为一种生物标志物，在制备用于急性髓系白血病早期诊断和/或预后评估的试剂盒中的用途。本发明还提供了一种用于检测DHX9基因的特异性探针，具有特异性强，敏感性强，结果稳定的优势，具有广泛的临床应用前景。

技术研发人员：祝怀平,熊雅岑
受保护的技术使用者：中国科学技术大学
技术研发日：
技术公布日：2024/7/11