具有清除自由基、缓解便秘作用的副干酪乳杆菌GF027冻干粉的制备方法及应用与流程

本发明属于微生物，尤其涉及具有清除自由基、缓解便秘作用的副干酪乳杆菌gf027冻干粉的制备方法及应用。

背景技术：

1、副干酪乳杆菌gf027保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为cgmcc no .22831，保藏时间为2021年07月06日，保藏地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号。专利cn202311142064.0中公开了副干酪乳杆菌gf027可以帮助提高记忆，改善和提高儿童的生长发育，增加血清中的igf-1水平，对儿童的生长发育有促进作用。同时，该专利中还给出了副干酪乳杆菌gf027的发酵培养方法，给出了副干酪乳杆菌gf027发酵培养基为：葡萄糖20g/l、牛肉浸粉5g/l、酵母浸粉902 10g/l、胰蛋白胨10g/l、玉米浆粉15g/l，乙酸钠5g/l、柠檬酸氢二铵2g/l、磷酸氢二钾2g/l、硫酸镁0.1g/l、硫酸锰0.05g/l。但由于副干酪乳杆菌gf027菌体较为丝滑，凝聚力偏低，难以进行离心沉降，离心获得的菌体量较少，生产工艺存在一定的瓶颈。并且，已公开的副干酪乳杆菌gf027发酵培养基为液体发酵，培养基中含有大量无机盐、蛋白胨等成分，导致发酵产物需要再次处理（如离心等操作）获得菌体后才能使用，从而难以利用其他具有活性功效的菌体代谢产物且口感不佳。因此，如何对发酵工艺进行改进是充分利用副干酪乳杆菌gf027亟需解决的问题。

2、便秘是临床上常见的一种消化系统疾病，主要指排便次数少、排便频率低。排便同时伴有腹痛、腹泻等症状。近年来，随着对便秘发病机制的不断探索，发现肠道菌群失调与便秘密不可分，便秘同时伴有肠道菌群失调，肠道菌群失调也会引起便秘的发生，二者互为因果。便秘患者的肠道菌群失调的现象也引起了微生物学家的重视。研究发现口服微生态制剂能够调节肠道菌群，促进肠道菌群代谢产生短链脂肪酸(scfas)，起到抑制病原菌生长并降低肠道ph促进肠蠕动的功效。因此，服用益生菌来预防和缓解便秘成为一种新思路，如现有技术已报道的副干酪乳杆菌l.casei431和副干酪乳杆菌adp-1就具有一定的肠道保护作用，但目前，对于副干酪乳杆菌gf027冻干粉是否具有缓解便秘的功效尚未报道。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明的目的在于提供一种副干酪乳杆菌gf027冻干粉的制备方法，通过采用改进的半固体发酵培养基，省去了离心步骤，可以在发酵产物中直接加入冻干保护剂，得到食品级副干酪乳杆菌gf027冻干粉。

2、本发明的目的还在于提供副干酪乳杆菌gf027冻干粉在制备dpph自由基清除和缓解便秘的产品中的应用。

3、为了实现上述发明目的，本发明提供了以下技术方案：

4、本发明提供了一种副干酪乳杆菌gf027冻干粉的制备方法，包括以下步骤：副干酪乳杆菌gf027接种到半固体发酵培养基中，发酵结束后，直接加入冻干保护剂，充分混匀后进行冷冻干燥；

5、所述半固体发酵培养基按质量份数计，包括以下组分：600~800份β-环糊精、80~120份麦芽粉、80~120份葡萄糖、80~120份玉米胚芽粉和400~600份大枣清汁；所述冻干保护剂包括脱脂乳粉、海藻糖和抗性淀粉。

6、优选的，所述大枣清汁由大枣熬煮后去渣得到。

7、优选的，所述副干酪乳杆菌gf027接种量为8~12%。

8、优选的，所述发酵温度为35~39℃，至ph值下降到3.7~3.9时发酵结束。

9、优选的，所述脱脂乳粉：海藻糖：抗性淀粉的质量比为80~120:40~60:40~60。

10、优选的，所述冻干保护剂的添加量为发酵培养基质量的10~15%。

11、本发明还提供了上述制备方法制备得到的副干酪乳杆菌gf027冻干粉。

12、本发明还提供了上述副干酪乳杆菌gf027冻干粉在制备具有dpph自由基清除功效的产品中的应用。

13、本发明还提供了上述副干酪乳杆菌gf027冻干粉在制备缓解便秘的药物中的应用。

14、本发明还提供了一种预防和/或缓解便秘的药物，以上述副干酪乳杆菌gf027冻干粉为活性成分。

15、与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：

16、本发明针对副干酪乳杆菌gf027的发酵瓶颈，对副干酪乳杆菌gf027进行进一步优化，采用改进的半固体发酵培养基进行发酵，省去了发酵后离心获得菌体的步骤，可以在发酵产物中直接加入冻干保护剂，得到副干酪乳杆菌gf027冻干粉。并且，本发明优化后的发酵培养基成分均为食品级原料，可以直接得到口感较佳的食品级副干酪乳杆菌gf027冻干粉。

17、本发明制备得到的副干酪乳杆菌gf027冻干粉的活菌含量高，并且副干酪乳杆菌gf027代谢产物具有良好的清除dpph自由基的功效，清除率可达57.92%，副干酪乳杆菌gf027冻干粉可用于制备具有dpph自由基清除功效的产品。同时该副干酪乳杆菌gf027冻干粉具有预防和/或缓解便秘的功效，可以缩短便秘小鼠排黑便时间，增加排便粒数，提高粪便含水率。

技术特征：

1.一种副干酪乳杆菌gf027冻干粉的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：副干酪乳杆菌gf027接种到半固体发酵培养基中，发酵结束后，直接加入冻干保护剂，充分混匀后进行冷冻干燥；

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述大枣清汁由大枣熬煮后去渣得到。

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述副干酪乳杆菌gf027接种量为8~12%。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述发酵温度为35~39℃，至ph值下降到3.7~3.9时发酵结束。

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述脱脂乳粉：海藻糖：抗性淀粉的质量比为80~120:40~60:40~60。

6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述冻干保护剂的添加量为半固体发酵培养基质量的10~15%。

7.权利要求1~6任意一项所述的制备方法制备得到的副干酪乳杆菌gf027冻干粉。

8.权利要求7所述的副干酪乳杆菌gf027冻干粉在制备具有dpph自由基清除功效的产品中的应用。

9.权利要求7所述的副干酪乳杆菌gf027冻干粉在制备缓解便秘的药物中的应用。

10.一种预防和/或缓解便秘的药物，其特征在于，以权利要求7所述的副干酪乳杆菌gf027冻干粉为活性成分。

技术总结
本发明提供了具有清除自由基、缓解便秘作用的副干酪乳杆菌GF027冻干粉的制备方法及应用，属于微生物技术领域。本发明将副干酪乳杆菌GF027接种到半固体发酵培养基中，发酵结束后，直接加入冻干保护剂，充分混匀后进行冷冻干燥，得到副干酪乳杆菌GF027冻干粉。本发明通过采用改进的半固体发酵培养基，省去了菌体离心步骤，可以在发酵产物中直接加入冻干保护剂，得到食品级副干酪乳杆菌GF027冻干粉。本发明所得副干酪乳杆菌GF027冻干粉具有清除DPPH自由基和缓解便秘的作用，可用于后期相关产品的开发。

技术研发人员：韩清波,郭芳先,崔强,马乐辉,李华文,刘瑞峰,刘金昉,王震,陈艺,刘飒,李云旭
受保护的技术使用者：潍坊君薇生物科技有限责任公司
技术研发日：
技术公布日：2024/5/10