一种六妹羊肚菌多糖、提取方法及其应用

本发明属于真菌多糖应用，具体涉及一种六妹羊肚菌多糖、提取方法及其应用。

背景技术：

1、菌类物质含有丰富的营养成分，对于改善人们膳食均衡具有的重要意义，是人类食物来源的重要组成部分。羊肚菌是一种珍惜食用菌，拥有人体所需的多种氨基酸，糖类，脂类等物质。多糖是羊肚菌中主要生物活性物质之一，具有抗氧化、抗肿瘤、免疫调节等生物活性。羊肚菌当前的研究主要集中在基因组分析、主成分分析、培育方法优化和活性分析方面；对于羊肚菌多糖组分的研究也多集中在菌丝体，对于子实体研究较少，并且研究主要集中于提取分离及初步结构分析，缺乏对其分离纯化、理化性质及结构鉴定的系统研究，免疫活性及机制研究较少。

技术实现思路

1、针对现有技术的不足，本发明的目的可以通过以下技术方案实现：

2、一种六妹羊肚菌多糖，所述六妹羊肚菌多糖主要是由→4)-α-d-glcp-(1→和→4,6)-α-d-glcp-(1→相互连接形成主链，支链主要由α-d-glcp-(1→连接在糖残基→4,6)-α-d-glcp-(1→的o-6位置构成；

3、所述六妹羊肚菌多糖的结构式为：

4、进一步地，所述六妹羊肚菌多糖msp-1-1的相对分子量为：1.2×107da。

5、一种六妹羊肚菌多糖的提取方法，所述提取方法包括下述步骤：

6、s1、将破壁粉粹的六妹羊肚菌粉末加入到乙醇溶液中，并加热、回流去除六妹羊肚菌粉末中的色素、脂肪以及小分子得到料液，对料液离心、过滤得到沉淀物一；

7、s2、向沉淀物一中加入蒸馏水，然后加热、回流、离心处理，提取上清液；对上清液进行浓缩处理，然后加入乙醇溶液进行醇沉处理；再离心处理得到沉淀物二；向沉淀物二中加入savage试剂，震荡20min，离心除去下层乳白色蛋白质沉淀；脱蛋白溶液经60℃旋转蒸发10min以去除有机试剂，然后将溶液装入透析袋中，然后放入蒸馏水中72h，冻干得到六妹羊肚菌粗多糖；

8、s3、六妹羊肚菌粗多糖用去离子水复溶；然后上样至deae-纤维素柱对六妹羊肚菌粗多糖进行阴离子交换层析；并使用纯水进行洗脱；洗脱完成后经透析、冷冻干燥处理后，再重新溶解于去离子水中，随后上样至sephacryl s-400hr凝胶柱中，以去离子水为洗脱液洗脱，再经透析、浓缩、冷冻干燥处理后获得纯化六妹羊肚菌多糖。

9、进一步地，步骤s1中六妹羊肚菌粉末与乙醇溶液的料液比为1:20。

10、进一步地，步骤s1中加热温度为60℃；回流时间为2h；步骤s1和s2中使用的乙醇溶液的体积分数为95％。

11、进一步地，步骤s2中，沉淀物一与蒸馏水的料液比为1:20；加热温度为80℃；回流时间为2h；上清液浓缩后的体积为原体积的1/5；加入的乙醇溶液与浓缩后的上清液的体积比为4:1。

12、进一步地，所述savage试剂中包含氯仿和正丁醇，所述氯仿和正丁醇的摩尔比为4:1。

13、上述所述的一种六妹羊肚菌多糖在制备免疫调节活性药物中的应用。

14、本发明的有益效果：

15、1、本发明侧重于云南省南华县人工栽培六妹羊肚菌子实体多糖纯化与结构分析并对提取纯化的多糖进行体内免疫活性调节探索。该研究可为羊肚菌多糖的研究与应用提供理论依据，为六妹羊肚菌资源化利用提供新途径，具有重要的理论研究价值及实际意义。

16、2、本发明提出的六妹羊肚菌多糖可以恢复环磷酰胺导致的免疫器官指数和外周血水平异常，增强巨噬细胞吞噬能力，并且提高小鼠脾淋巴细胞的增殖能力，逆转脾淋巴细胞亚群比例，同时促进血清和胸腺中iga和igm的分泌来发挥免疫调节活性。

技术特征：

1.一种六妹羊肚菌多糖，其特征在于，所述六妹羊肚菌多糖主要是由→4)-α-d-glcp-(1→和→4,6)-α-d-glcp-(1→相互连接形成主链，支链主要由α-d-glcp-(1→连接在糖残基→4,6)-α-d-glcp-(1→的o-6位置构成；

2.根据权利要求1所述一种六妹羊肚菌多糖，其特征在于，所述六妹羊肚菌多糖msp-1-1的相对分子量为：1.2×107da。

3.一种六妹羊肚菌多糖的提取方法，其特征在于，所述提取方法包括下述步骤：

4.根据权利要求3所述的一种六妹羊肚菌多糖的提取方法，其特征在于，步骤s1中六妹羊肚菌粉末与乙醇溶液的料液比为1:20。

5.根据权利要求3所述的一种六妹羊肚菌多糖的提取方法，其特征在于，步骤s1中加热温度为60℃；回流时间为2h；步骤s1和s2中使用的乙醇溶液的体积分数为95％。

6.根据权利要求3所述的一种六妹羊肚菌多糖的提取方法，其特征在于，步骤s2中，沉淀物一与蒸馏水的料液比为1:20；加热温度为80℃；回流时间为2h；上清液浓缩后的体积为原体积的1/5；加入的乙醇溶液与浓缩后的上清液的体积比为4:1。

7.根据权利要求3所述的一种六妹羊肚菌多糖的提取方法，其特征在于，所述savage试剂中包含氯仿和正丁醇，所述氯仿和正丁醇的摩尔比为4:1。

8.如权利要求1-2任一所述的一种六妹羊肚菌多糖在制备免疫调节活性药物中的应用。

技术总结
本发明属于真菌多糖应用技术领域，具体涉及一种六妹羊肚菌多糖、提取方法及其应用；所述六妹羊肚菌多糖主要是由→4)‑α‑D‑Glcp‑(1→和→4,6)‑α‑D‑Glcp‑(1→相互连接形成主链，支链主要由α‑D‑Glcp‑(1→连接在糖残基→4,6)‑α‑D‑Glcp‑(1→的O‑6位置构成；所述六妹羊肚菌多糖的结构式为：所述六妹羊肚菌多糖MSP‑1‑1的相对分子量为：1.2×10<supgt;7</supgt;Da。本发明提出的六妹羊肚菌多糖可以恢复环磷酰胺导致的免疫器官指数和外周血水平异常，增强巨噬细胞吞噬能力，并且提高小鼠脾淋巴细胞的增殖能力，逆转脾淋巴细胞亚群比例，同时促进血清和胸腺中IgA和IgM的分泌来发挥免疫调节活性。

技术研发人员：孙桂菊,向世琼,夏惠
受保护的技术使用者：东南大学
技术研发日：
技术公布日：2024/6/26