提高酵母菌在盐胁迫条件下生长量的方法

本发明涉及微生物，具体而言，涉及一种提高酵母菌在胁迫条件下生长量的方法。

背景技术：

1、多变拟威克酵母 wickerhamiella versatilis广泛存在于豆瓣酱、酱油、鱼酱等盐渍发酵产品中。多变拟威克酵母在发酵过程中能够代谢产生乙醇、高级醇、酯类物质，对于产品香气的形成起到积极作用。然而在盐渍食品发酵过程中，微生物通常会遭受如盐胁迫、氧胁迫等极端环境的影响，这些极端环境严重影响微生物细胞生长与生理活性，从而影响产品品质。因此，提高多变拟威克酵母在盐胁迫极端环境下的生长性能具有重要意义。

2、基于此，特提出本发明。

技术实现思路

1、本发明的目的是提供提高酵母菌在盐胁迫条件下生长量的方法。

2、本发明采用的技术方案是：

3、提高酵母菌在盐胁迫条件下生长量的方法，包含：将浓度为1 g/l的谷氨酸添加至酵母菌盐胁迫培养体系中，接种酵母菌后进行盐胁迫培养。

4、优选的，所述酵母菌为多变拟威克酵母菌 wickerhamiella versatilismk063708。

5、优选的，酵母菌盐胁迫培养体系的成分为：15-25 g/l蛋白胨，15-25 g/l葡萄糖，8-12g/l酵母浸粉，120-180 g/l氯化钠，ph 5.8-6.5。

6、更优选的，酵母菌盐胁迫培养体系的成分为：20 g/l蛋白胨，20g/l葡萄糖，10g/l酵母浸粉，120-180g/l氯化钠，ph6.5。

7、优选的，酵母菌的接种量为2%。

8、优选的，接种酵母菌前需将酵母菌活化为种子液，活化方法为：将酵母菌接种于酵母菌培养基中，在28-32 ℃，100-150 rpm条件下活化24-48 h；活化后在3-5 ℃，4000-8000rpm条件下离心10-15min收集菌体，离心洗涤，并重悬调整种子液初始生物量约为106cfu/ml。

9、更优选的，在30 ℃，120 rpm条件下活化36 h；活化后在4 ℃，4000 rpm条件下离心15 min收集菌体。

10、优选的，所述盐胁迫培养条件为在28-32 ℃，100-150 rpm 条件下培养36-168 h。

11、更优选的，在30 ℃，120 rpm 条件下培养36-168 h。

12、本发明的有益效果：本发明将培养好的多变拟威克酵母菌种子液接种至添加谷氨酸的盐胁迫培养体系中进行培养。研究发现，向培养基中添加谷氨酸可以显著提高酵母菌在盐胁迫条件下的生物量。例如相较于将未添加谷氨酸的盐胁迫培养体系中，添加了谷氨酸的盐胁迫体系中多变拟威克酵母吸光值提高7.5倍和12.07倍。本发明方法，操作简单，便于实施，可用于提高多变拟威克酵母在盐胁迫环境下的生长性能。

技术特征：

1.提高酵母菌在盐胁迫条件下生长量的方法，其特征在于，包含：将浓度为1 g/l的谷氨酸添加至酵母菌盐胁迫培养体系中，接种酵母菌后进行盐胁迫培养。

2.根据权利要求1所述提高酵母菌在盐胁迫条件下的生长量的方法，其特征在于，所述酵母菌为多变拟威克酵母菌wickerhamiella versatilis mk063708。

3.根据权利要求1所述提高酵母菌在盐胁迫条件下生长量的方法，其特征在于，酵母菌盐胁迫培养体系的成分为：15-25 g/l蛋白胨，15-25 g/l葡萄糖，8-12 g/l酵母浸粉，120-180 g/l氯化钠，ph5.8-6.5。

4.根据权利要求3所述提高酵母菌在盐胁迫条件下生长量的方法，其特征在于，酵母菌盐胁迫培养体系的成分为：20 g/l蛋白胨，20g/l葡萄糖，10g/l酵母浸粉，120-180g/l氯化钠，ph6.5。

5.根据权利要求1所述提高酵母菌在盐胁迫条件下生长量的方法，其特征在于，酵母菌的接种量为2%。

6.根据权利要求1所述提高酵母菌在盐胁迫条件下生长量的方法，其特征在于，接种酵母菌前需将酵母菌活化为种子液，活化方法为：将酵母菌接种于酵母菌培养基中，在28-32℃，100-150 rpm条件下活化24-48 h；活化后在3-5 ℃，4000-80000 rpm条件下离心10-15min收集菌体，离心洗涤，并重悬调整种子液初始生物量约为106 cfu/ml。

7.根据权利要求6所述提高酵母菌在盐胁迫条件下生长量的方法，其特征在于，在30℃，120 rpm条件下活化36 h；活化后在4 ℃，4000 rpm条件下离心15 min收集菌体。

8.根据权利要求1所述提高酵母菌在盐胁迫条件下的生长量的方法，其特征在于，所述盐胁迫培养条件为在28-32 ℃，100-150 rpm 条件下培养36-168 h。

9.根据权利要求8所述提高酵母菌在盐胁迫条件下的生长量的方法，其特征在于，在30℃，120 rpm 条件下培养36-168 h。

技术总结
本发明属于微生物技术领域，公开了一种提高酵母菌在盐胁迫条件下生长量的方法。本发明将谷氨酸添加到多变拟威克酵母盐胁迫培养体系中，通过酶标仪测定吸光度来反映酵母菌的盐耐受能力。结果表明，在12%盐胁迫条件下培养36 h，多变拟威克酵母菌培养液吸光值为0.167，而相同条件下添加1 g/L谷氨酸后多变拟威克酵母培养液吸光值为1.267；在18%盐胁迫条件下培养168 h，多变拟威克酵母菌培养液吸光值为0.083，而相同条件下添加1 g/L谷氨酸后多变拟威克酵母培养液吸光值为1.002可以较为明显地提高多变拟威克酵母盐耐受能力。

技术研发人员：何强,沈思蔚,卢云浩,左澳腾,姜丽
受保护的技术使用者：四川大学
技术研发日：
技术公布日：2024/6/13