一种基于二氰基衍生物的粘度敏感型探针、合成方法及其在制备脂滴标记产品中的应用

本发明涉及一种基于二氰基衍生物粘度敏感型染料的合成及其在脂滴标记中的应用，属于有机小分子荧光探针。

背景技术：

1、脂滴，是细胞内中性脂的主要贮存场所，承担着能量平衡调节和脂质代谢的重要角色。脂滴并非细胞内一个简单的能量贮存器，而是一个复杂、活动旺盛、动态变化的多功能细胞器，在调节细胞信号、维护细胞结构完整性、控制蛋白质处理以及调节细胞生死中发挥着积极作用。脂滴的健康状态对维持细胞的正常功能至关重要，脂滴的结构或功能的异常改变与多种人类疾病紧密相关，特别是与代谢病态和细胞生理状态的失衡有关。

2、在调控脂滴的正常功能中，脂滴的粘度发挥着关键作用。粘度是脂滴与其它细胞结构进行物质和能量交换的基础物理特性，其异常可能干扰脂质的正常代谢和细胞内信号的传递，导致细胞机能失调。脂滴粘度的变化不仅影响自身的功能，还可能促使脂滴异常积累，触发或加剧包括心血管疾病、糖尿病以及肿瘤在内的多种疾病状态。因此，开发用于脂滴成像的粘度敏感型探针为相关疾病提供新的治疗策略具有重要的科学价值和临床意义。

3、现有技术中基于二氰基衍生物制备的粘度敏感型荧光探针，存在ph和光稳定性不理想或者脂滴成像效果不好。

技术实现思路

1、针对现有技术存在的不足，本发明提供一种基于二氰基衍生物的粘度敏感型探针、合成方法及其在脂滴标记中的应用，实现以下发明目的：制备的基于二氰基衍生物的粘度敏感型探针，ph和光稳定性好，对脂滴的成像效果好。

2、为解决上述技术问题，本发明采取以下技术方案：

3、一种基于二氰基衍生物的粘度敏感型探针，所述探针的结构式如下：

4、。

5、所述探针的合成方法为将化合物2和对二乙胺基苯甲醛溶于乙腈中，加入哌啶，在n2条件下，94-96℃回流反应4.8-5.2h，反应结束后，提纯得到探针ldcn；所述化合物2为{2-1-[4-(二甲基氨基)苯基]亚乙基]-丙二腈}。

6、所述化合物2与对二乙胺基苯甲醛的摩尔比为1:1.1-1.3；所述化合物2与哌啶的摩尔比为1:1.8-2.2；所述化合物2与乙腈的摩尔体积比为1mmol:4.5-5.5ml。

7、所述化合物2的制备方法为二甲氨基苯乙酮与丙二腈溶于无水乙醇中，加入哌啶和乙酸，88-92℃下回流反应5.8-6.2h，反应完成后，冷却至室温，抽滤得到化合物2。

8、所述二甲氨基苯乙酮与丙二腈的摩尔比为1:1.1-1.3；所述二甲氨基苯乙酮与哌啶的摩尔比为1:0.18-0.22；所述二甲氨基苯乙酮与乙酸的摩尔比为1:0.18-0.22；所述二甲氨基苯乙酮与无水乙醇的摩尔体积比为1mmol:0.8-1.2ml。

9、所述的探针在制备脂滴标记产品中的应用。

10、探针的合成路线：

11、 。

12、与现有技术相比，本发明取得以下有益效果：

13、（1）本发明荧光探针ldcn对粘度具有很好的响应性，可以作为粘度敏感型脂滴探针。

14、（2）本发明荧光探针ldcn在ph值为4-10 的范围内具有良好的稳定性，在紫外线（365nm，强度为90μw/cm2）的连续照射下具有良好的光稳定性。

15、（3）本发明荧光探针ldcn具有很好的植物脂滴标记效果，对于植物内脂滴具有很好的靶向作用，可以进行植物脂滴检测。

16、（4）本发明荧光探针ldcn对于hela细胞内脂滴具有很好的靶向作用，可以进行细胞内脂滴检测。

技术特征：

1.一种基于二氰基衍生物的粘度敏感型探针，其特征在于：所述探针的结构式如下：

2.权利要求1所述探针的合成方法，其特征在于：所述探针的合成方法为将化合物2和对二乙胺基苯甲醛溶于乙腈中，加入哌啶，在n2条件下，94-96℃回流反应4.8-5.2h，反应结束后，提纯得到探针ldcn；所述化合物2为{2-1-[4-(二甲基氨基)苯基]亚乙基]-丙二腈}。

3.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于：所述化合物2与对二乙胺基苯甲醛的摩尔比为1:1.1-1.3；所述化合物2与哌啶的摩尔比为1:1.8-2.2；所述化合物2与乙腈的摩尔体积比为1mmol:4.5-5.5ml。

4.根据权利要求2所述的合成方法，其特征在于：所述化合物2的制备方法为二甲氨基苯乙酮与丙二腈溶于无水乙醇中，加入哌啶和乙酸，88-92℃下回流反应5.8-6.2h，反应完成后，冷却至室温，抽滤得到化合物2。

5.根据权利要求4所述的合成方法，其特征在于：所述二甲氨基苯乙酮与丙二腈的摩尔比为1:1.1-1.3；所述二甲氨基苯乙酮与哌啶的摩尔比为1:0.18-0.22；所述二甲氨基苯乙酮与乙酸的摩尔比为1:0.18-0.22；所述二甲氨基苯乙酮与无水乙醇的摩尔体积比为1mmol:0.8-1.2ml。

6.权利要求1所述的探针在制备脂滴标记产品中的应用。

技术总结
本发明提供一种基于二氰基衍生物的粘度敏感型探针、合成方法及其在制备脂滴标记产品中的应用，所述探针简称为LDCN，所述探针的合成方法为将化合物2和对二乙胺基苯甲醛溶于乙腈中，加入哌啶，在N<subgt;2</subgt;条件下，94‑96℃回流反应4.8‑5.2h，反应结束后，提纯得到探针LDCN；所述化合物2为{2‑1‑[4‑(二甲基氨基)苯基]亚乙基]‑丙二腈}。本发明荧光探针LDCN对粘度具有很好的响应性，作为粘度敏感型脂滴探针，可以进行荧光检测、脂滴成像等应用。

技术研发人员：贺远,王建勇,杨云豪,许春平,李龙科,李林,陈国瑀,石超男,刘春奎,史晓芙
受保护的技术使用者：郑州轻工业大学
技术研发日：
技术公布日：2024/9/9