hsa-miR-708-3p在制备早发型精神分裂症辅助诊断产品中的应用

本发明涉及早发型精神分裂症诊断，具体涉及一种hsa-mir-708-3p在制备早发型精神分裂症辅助诊断产品中的应用。

背景技术：

1、精神分裂症是临床最常见的严重致残性重性精神疾患之一，多在青壮年和成年早期起病，严重危害人类身心健康，给家庭和社会带来沉重负担。

2、早发型精神分裂症，作为精神分裂症的一类亚型，特指18岁以前发病的精神分裂症。相较成年发病的精神分裂症患者，早发型精神分裂症患者表现出更显著的前驱期神经发育异常，相对更高的家族遗传负担，长期预后更差，整体生活质量更低，但受社会环境影响较小，可能更适合从遗传学角度探讨疾病的发病机制。

3、迄今为止，单纯依赖症状学的诊断体系仍然是精神分裂症诊断的金标准，如《精神障碍诊断与统计手册(第五版)》(dsm-5)和国际疾病分类(icd-10)等。但该诊断方法仍然主要依靠精神科医生的临床会谈，缺乏客观的生理、生化和病理指标，而这种较为主观的判断极易造成误诊及漏诊。早期的诊断和干预对于改善精神分裂症的预后十分重要。目前认为精神分裂症的遗传度高达80％以上，因此，基于基因调控层面探寻精神分裂症诊断的客观标志物是在目前医疗状况下提高该病诊疗水平的重要途径之一。

4、有鉴于此，特提出本发明。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种hsa-mir-708-3p在制备早发型精神分裂症辅助诊断产品中的应用，本发明hsa-mir-708-3p在早发型精神分裂症患者以及健康人群的外周血中表达具有显著差异，而且hsa-mir-708-3p在早发型精神分裂症中的诊断效能具有较高的灵敏度和特异度，对疾病具有良好的识别能力，此外hsa-mir-708-3p基因的功能探究表明其在早发型精神分裂症的神经发育过程中具有重要病理意义，与疾病高度相关，高度可靠，充实了hsa-mir-708-3p基因作为客观诊断生物标志物的证据，因此，hsa-mir-708-3p能够用于早发型精神分裂症的辅助诊断。

2、为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

3、本发明第一方面提供了一种上述hsa-mir-708-3p在制备早发型精神分裂症辅助诊断产品中的应用。

4、优选地，所述hsa-mir-708-3p的核苷酸序列如seq id no：1所示。

5、优选地，所述产品包括试剂盒和生物制剂。

6、本发明第二方面提供了一种用于早发型精神分裂症的辅助诊断产品，所述辅助诊断产品包括用于扩增所述hsa-mir-708-3p的扩增引物。

7、优选地，所述扩增引物包括上游引物和下游引物；

8、所述上游引物的序列如seq id no:2所示；

9、所述下游引物的序列如seq id no:3所示。

10、优选地，所述用于早发型精神分裂症的辅助诊断产品还包括rna提取试剂。

11、优选地，所述产品包括试剂盒和生物制剂。

12、本发明第三方面提供了一种斑马鱼神经发育障碍模型的构建方法，该构建方法包括如下步骤：

13、(a)将斑马鱼进行自然交配，得到胚胎，再经清洗、分期，建立hb9：egfp转基因系斑马鱼；

14、(b)向斑马鱼胚胎的单细胞期受精卵中注射hsa-mir-708-3p基因双链复合物，待受精卵进行孵化后，得到斑马鱼神经发育障碍模型。

15、优选地，所述hsa-mir-708-3p基因双链复合物的正义链核苷酸序列如seq id no:1所示，反义链核苷酸序列如seq id no:4所示。

16、与现有技术相比，本发明的有益效果至少包括：

17、本发明hsa-mir-708-3p在早发型精神分裂症患者以及健康人群的外周血中表达具有显著差异，然后，分别在验证集-1和验证集-2的多批样本中进行病理趋势的层层验证，验证结果和测序数据相互印证支持，进一步提高了hsa-mir-708-3p基因与早发型精神分裂症关系的可靠程度；再采用灵敏度、特异度、约登指数对应的最佳截断值以及受试者工作特征曲线(roc curve)下面积(auc)分析hsa-mir-708-3p基因对早发型精神分裂症的诊断价值，诊断效能评估结果显示hsa-mir-708-3p基因(auc＝0.9192，最佳截断值为9.567，灵敏度为97.22％，特异度为77.27％，因此，hsa-mir-708-3p在早发型精神分裂症中的诊断效能具有较高的灵敏度和特异度，因此，hsa-mir-708-3p能够用于早发型精神分裂症的辅助诊断。

18、本发明还将hsa-mir-708-3p基因注射到斑马鱼胚胎的单细胞期受精卵中，进行早期病理干预以拟合早发型精神分裂症神经发育障碍的发生发展特征，构建了一种神经发育障碍的斑马鱼模型；研究表明，hsa-mir-708-3p基因病理表达可导致颅脑外观畸形，脑室容积及眼眶发育面积减小，运动神经元轴突生长异常，发育缺陷死亡比例显著升高，5天存活率显著降低；可见，hsa-mir-708-3p对早发型精神分裂症具有重要的病理意义，与早发型精神分裂症高度相关，高度可靠，充实了hsa-mir-708-3p基因作为客观诊断生物标志物的证据，对疾病具有良好的识别能力。

技术特征：

1.hsa-mir-708-3p在制备早发型精神分裂症辅助诊断产品中的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述hsa-mir-708-3p的核苷酸序列如seqid no：1所示。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述产品包括试剂盒和生物制剂。

4.一种用于早发型精神分裂症的辅助诊断产品，其特征在于，包括用于扩增所述hsa-mir-708-3p的扩增引物。

5.根据权利要求4所述的用于早发型精神分裂症的辅助诊断产品，其特征在于，所述扩增引物包括上游引物和下游引物；

6.根据权利要求1所述的用于早发型精神分裂症的辅助诊断产品，其特征在于，还包括rna提取试剂。

7.根据权利要求1所述的用于早发型精神分裂症的辅助诊断产品，其特征在于，所述产品包括试剂盒和生物制剂。

8.一种斑马鱼神经发育障碍模型的构建方法，其特征在于，包括如下步骤：

9.根据权利要求8所述的构建方法，其特征在于，所述hsa-mir-708-3p基因双链复合物的正义链核苷酸序列如seq id no:1所示，反义链核苷酸序列如seq id no:4所示。

技术总结
本发明公开了一种hsa‑miR‑708‑3p在制备早发型精神分裂症辅助诊断产品中的应用；本发明hsa‑miR‑708‑3p在早发型精神分裂症患者以及健康人群的外周血中表达具有显著差异，而且hsa‑miR‑708‑3p在早发型精神分裂症中的诊断效能具有较高的灵敏度和特异度，对疾病具有良好的识别能力，此外hsa‑miR‑708‑3p基因的功能探究表明其在早发型精神分裂症的神经发育过程中具有重要病理意义，与疾病高度相关，高度可靠，充实了hsa‑miR‑708‑3p基因作为客观诊断生物标志物的证据，因此，hsa‑miR‑708‑3p能够用于早发型精神分裂症的辅助诊断。

技术研发人员：李泽萱,徐勇,刘莎,杜鑫哲
受保护的技术使用者：山西医科大学
技术研发日：
技术公布日：2024/8/1