新的对抗寨卡病毒的疫苗和用于对抗寨卡病毒的DNA抗体构建体的组合

本发明涉及编码寨卡(zika)病毒抗原的抗体及其功能片段的重组核酸序列。本发明还涉及寨卡疫苗与组合物的组合，所述组合物包含用于在体内产生一种或多种合成抗体及其功能片段的重组核酸序列。本发明的组合物提供了用于诱导免疫应答，以及用于预防性和/或治疗性地使个体对寨卡病毒免疫的改进方法。

背景技术：

1、寨卡病(zika disease)是由寨卡病毒感染引起的，可以通过被感染的蚊子叮咬传播给人类或在人类之间进行性传播。寨卡病毒感染与严重的出生缺陷有关。目前，批准了治疗性抗体用于治疗多种疾病。不幸的是，纯化抗体的制造和运输成本过高。此外，抗体疗法必须每周至每月重新施用-这是确保有效治疗以预防或降低患者发展寨卡病的风险的一个具有挑战性的因素。

2、因此，本领域需要预防和/或治疗寨卡感染的改进疗法。本发明满足这种需求。

技术实现思路

1、本发明的一个方面提供了一种组合物，其包含编码寨卡病毒抗原的抗体及其功能片段的重组核酸序列。

2、本发明的一个方面提供了在哺乳动物中引发针对寨卡病毒的免疫应答的组合物与包含编码抗体、其片段、其变体或其组合的重组核酸序列的组合物的组合。可以将所述组合物施用给有需要的受试者以促进合成抗体的体内表达和形成。在一个实施方案中，所述核酸分子包含编码抗zikv-包膜(抗zikv e)蛋白抗体的核苷酸序列。

3、本发明的一个方面提供了能够表达在哺乳动物中引发针对寨卡病毒的免疫应答的多肽的核酸构建体。所述核酸构建体由编码核苷酸序列和与编码核苷酸序列可操作连接的启动子组成。所述编码核苷酸序列表达多肽，其中所述多肽包括共有寨卡抗原，包括前体膜-包膜(prm+env或prme)。所述启动子调节哺乳动物中所述多肽的表达。

4、本发明的另一方面提供了能够在哺乳动物中产生针对寨卡病毒的免疫应答的核酸分子。在一个实施方案中，所述核酸分子包含能够在哺乳动物中表达共有寨卡抗原的核酸序列和药学上可接受的赋形剂。在一个实施方案中，所述核酸分子包含与编码共有寨卡抗原的编码序列可操作地连接的启动子。在一个实施方案中，共有寨卡抗原由共有prme组成。

5、本发明的另一方面提供了在哺乳动物中引发针对寨卡病毒的免疫应答的方法，其包括向哺乳动物的组织递送核酸分子，所述核酸分子包含能够在哺乳动物细胞中表达寨卡病毒的共有抗原以在哺乳动物中引发免疫应答的核酸序列，并且对所述组织的细胞进行电穿孔以允许所述核酸分子进入细胞内。

6、本发明涉及编码一种或多种合成抗体的核酸分子，其中所述核酸分子包含选自下组的至少一种：a)编码抗zikv包膜(e)蛋白合成抗体的核苷酸序列；和b)编码抗zikv包膜(e)合成抗体的片段的核苷酸序列。

7、在一个实施方案中，所述核酸分子包含编码切割结构域的核苷酸序列。

8、在一个实施方案中，核酸分子包含编码抗zikv e抗体的可变重链区和可变轻链区中的一个或多个的核苷酸序列。

9、在一个实施方案中，所述核酸分子包含编码与seq id no:1,seq id no:2,seq idno:3,seq id no:4,seq id no:5,seq id no:6,seq id no:7,seq id no:8,seq id no:9,seq id no:10,seq id no:11,seq id no:12,seq id no:13,seq id no:14,seq id no:15,seq id no:16,seq id no:17,seq id no:18,seq id no:21和seq id no:22中的一个或多个至少90％同源的一个或多个序列的核苷酸序列。

10、在一个实施方案中，所述核酸分子包含编码抗zikv e抗体的可变重链区和可变轻链区的核苷酸序列。在一个实施方案中，所述核酸分子包含编码与seq id no:11、seq idno:12、seq id no:13、seq id no:14、seq id no:15、seq id no:16、seq id no:17、seq idno:18、seq id no:21和seq id no:22中的一个或多个至少90％同源的一个或多个序列的核苷酸序列。

11、在一个实施方案中，所述核酸分子包含编码多肽的核苷酸序列，所述多肽包含：可变重链区；ires元件；和可变轻链区。在一个实施方案中，所述ires元件是病毒ires或真核ires之一。

12、在一个实施方案中，所述核酸分子包含：

13、a)在核酸序列的整个长度上与编码选自下组的序列的核酸序列具有至少约95％同一性的核苷酸序列：seq id no:1、seq id no:2、seq id no:3、seq id no:4、seq id no:5、seq id no:6、seq id no:7、seq id no:8、seq id no:9、seq id no:10、seq id no:11、seq id no:12、seq id no:13、seq id no:14、seq id no:15、seq id no:16、seq id no:17、seq id no:18、seq id no:21和seq id no:22；

14、在一个实施方案中，所述核苷酸序列编码前导序列。在一个实施方案中，所述核酸分子包含表达载体。

15、本发明还提供了包含本文所述的任何核酸分子的组合物。

16、在一个实施方案中，所述组合物包含药学上可接受的赋形剂。

17、本发明还涉及预防或治疗受试者的疾病的方法，所述方法包括向受试者施用本文所述的核酸分子或组合物。

18、在一个实施方案中，所述疾病是寨卡病毒感染。

19、在一个实施方案中，所述方法还包括向受试者施用抗生素药剂。在一个实施方案中，在施用所述核酸分子或组合物后不到10天施用抗生素。

20、在一个实施方案中，所述方法还包括向受试者施用抗生素药剂。在一个实施方案中，在施用所述核酸分子或组合物后不到10天施用抗生素。

技术特征：

1.一种核酸分子，其编码一种或多种合成抗体，其中所述核酸分子包含选自由以下组成的组的至少一种：

2.根据权利要求1所述的核酸分子，其还包含编码切割结构域的核苷酸序列。

3.根据权利要求1所述的核酸分子，其中所述核酸分子包含编码抗zikv e抗体的核苷酸序列。

4.根据权利要求3所述的核酸分子，其中所述抗zikv e抗体包含与选自由seq id no:11-22组成的组的序列具有至少90％同源性的氨基酸序列或其免疫原性片段。

5.根据权利要求4所述的核酸分子，其中所述抗zikv e抗体包含选自由seq id no:11-22组成的组的氨基酸序列或其免疫原性片段。

6.根据权利要求1所述的核酸分子，其中所述抗zikv e蛋白合成抗体包含可变重(vh)链和可变轻(vl)链。

7.根据权利要求6所述的核酸分子，其中抗zikv e蛋白合成抗体vh链包含与选自由seqid no:1、seq id no:3、seq id no:5、seq id no:7和seq id no:9组成的组的序列具有至少90％同源性的氨基酸序列或其免疫原性片段。

8.根据权利要求7所述的核酸分子，其中抗zikv e蛋白合成抗体vh链包含选自由seqid no:1、seq id no:3、seq id no:5、seq id no:7和seq id no:9组成的组的序列或其免疫原性片段。

9.根据权利要求6所述的核酸分子，其中抗zikv e蛋白合成抗体vl链包含与选自由seqid no:2、seq id no:4、seq id no:6、seq id no:8和seq id no:10组成的组的序列具有至少90％同源性的氨基酸序列或其免疫原性片段。

10.根据权利要求9所述的核酸分子，其中抗zikv e蛋白合成抗体vl链包含选自由seqid no:2、seq id no:4、seq id no:6、seq id no:8和seq id no:10组成的组的序列或其免疫原性片段。

11.根据权利要求1所述的核酸分子，其中所述核苷酸序列编码前导序列。

12.根据权利要求1-11中任一项所述的核酸分子，其中所述核酸分子包含表达载体。

13.一种组合物，其包含权利要求1-12中任一项所述的核酸分子。

14.根据权利要求13所述的组合物，其还包含药学上可接受的赋形剂。

15.根据权利要求13所述的组合物，其中所述组合物还包含第二核酸分子，其中所述第二核酸分子编码共有寨卡抗原。

16.根据权利要求15所述的组合物，其中所述共有寨卡抗原包含与选自由seq id no:23、seq id no:25、seq id no:27、seq id no:29、seq id no:31、seq id no:33和seq idno:39组成的组的序列具有至少90％同源性的氨基酸序列或其免疫原性片段。

17.根据权利要求15所述的组合物，其中所述共有寨卡抗原包含选自由seq id no:23、seq id no:25、seq id no:27、seq idno:29、seq id no:31、seq id no:33和seq id no:39组成的组的氨基酸序列或其免疫原性片段。

18.根据权利要求15所述的组合物，其中所述第二核酸分子包含与选自由seq id no:24、seq id no:26、seq id no:28、seq id no:30、seq id no:32、seq id no:34、seq idno:35、seq id no:36、seq id no:37和seq id no:38组成的组的序列具有至少90％同源性的核酸序列或其免疫原性片段。

19.根据权利要求15所述的组合物，其中所述第二核酸分子包含选自由seq id no:24、seq id no:26、seq id no:28、seq id no:30、seq id no:32、seq id no:34、seq id no:35、seq id no:36、seq id no:37和seq id no:38组成的组的核酸序列或其免疫原性片段。

20.一种预防或治疗受试者的疾病的方法，其包括施用权利要求1-19中任一项所述的组合物。

21.一种诱导免疫应答的方法，其包括以有效诱导个体的免疫应答的量向所述个体施用权利要求13-19中任一项所述的组合物。

22.根据权利要求21所述的方法，其中所述免疫应答是持久的。

23.根据权利要求21所述的方法，其中所述免疫应答是全身性的。

技术总结
本申请涉及新的对抗寨卡病毒的疫苗和用于对抗寨卡病毒的DNA抗体构建体的组合。具体地，本文公开了包含编码针对寨卡病毒抗原的抗体及其功能片段的重组核酸序列的组合物。本发明还涉及包含第一组合物和第二组合物的组合的组合物，所述第一组合物引发哺乳动物的对抗寨卡病毒的免疫应答，所述第二组合物包含编码抗体、其片段、其变体或其组合的重组核酸序列。在一些情况下，所述核酸分子包含编码抗ZIKV‑包膜(抗ZIKV E)蛋白抗体的核苷酸序列。

技术研发人员：大卫·韦纳,卡鲁皮亚·穆苏马尼,严健
受保护的技术使用者：宾夕法尼亚大学理事会
技术研发日：
技术公布日：2024/9/19