本发明涉及微生物,具体涉及一种大洋芽孢杆菌及其在生产纳米硒、种植中药材和处理污水中的应用。
背景技术:
1、硒在人体中具有众多不同的功能:(1)延缓衰老、延年益寿:谷胱甘肽过氧化物酶具有强的抗氧化作用,是重要的自由基清除剂,而硒是谷胱甘肽过氧化物酶不可或缺的组成成分;(2)增强免疫力及抗炎作用:硒在机体中能合成一种硒蛋白,该蛋白具有调节免疫及发炎路径的效果,比如常见的内风湿性关节炎可通过补充硒以降低发病的概率;(3)降糖作用:硒能防止胰岛β细胞的氧化破坏,使其维持功能的正常运作,促进糖分的代谢以降低血糖;(4)保护肝脏的功能:硒本身是一种强的抗氧化剂,具有清除自由基的能力,能够保护肝细胞的结构完整,同时促进肝功能的恢复。
2、纳米硒的常用制备方法为抗坏血酸、硫代硫酸钠等还原剂与亚硒酸钠进行反应生成纳米硒,但这类方法所得的纳米硒易转变成具有毒性的灰黑色单质硒,需要通过加入表面活性剂或稳定剂才可以维持其理化性质,但其制备过程容易引入其他毒性物质,对环境具有一定的危害。
技术实现思路
1、本发明的主要目的是提出一种大洋芽孢杆菌及其在生产纳米硒、种植中药材和处理污水中的应用,旨在提供一种安全、高效的制备生物纳米硒的方式。
2、为实现上述目的,本发明提出一种大洋芽孢杆菌,所述大洋芽孢杆菌为oceanobacillus profundus a82,保藏编号为cctcc no:m 20211530,保藏日期为2021年12月03日。
3、为实现上述目的,本发明还提出一种制备生物纳米硒的方法,包括以下步骤:使用大洋芽孢杆菌在含有亚硒酸钠的培养基中发酵培养,得到纳米硒;其中,所述大洋芽孢杆菌为如上所述的oceanobacillus profundus a82。
4、可选地,使用大洋芽孢杆菌在含有亚硒酸钠的培养基中发酵培养,得到纳米硒的步骤,包括:
5、将活化的大洋芽孢杆菌接种于发酵培养基中,向其中加入亚硒酸钠溶液,形成待培养物;
6、将所述待培养物震荡培养,得发酵液;
7、对所述发酵液进行离心后收集沉淀,向所述沉淀中加入液氮进行研磨,然后用双蒸水重新悬浮后超声处理,再用滤膜过滤,而后向滤液中加入正己烷,混合均匀后静置分层,分离下层水相,得生物纳米硒。
8、可选地,将如上所述的大洋芽孢杆菌活化后接种于发酵培养基中,向其中加入亚硒酸钠溶液,形成待培养物的步骤中:
9、所述发酵培养基包括酵母粉、蛋白胨和氯化钠,所述酵母粉、蛋白胨和氯化钠在所述发酵培养基中的浓度均为2~18g/l,所述发酵培养基的ph为5.0~7.0;和/或,
10、所述大洋芽孢杆菌的接种量为1~5%;和/或,
11、所述亚硒酸钠在所述发酵培养基中的终浓度为2~8mmol/l。
12、可选地,将所述待培养物震荡培养,得发酵液的步骤中:
13、所述震荡培养的温度为32~37℃、转速为150~200rpm、时间为24~72h。
14、可选地,对所述发酵液进行离心后收集沉淀,向所述沉淀中加入液氮进行研磨,然后用双蒸水重新悬浮后超声处理,再用滤膜过滤,而后向滤液中加入正己烷,混合均匀后静置分层,分离下层水相,得生物纳米硒的步骤中:
15、所述离心时的温度为3~5℃、转速为10000~15000rpm、时间为10~20min;和/或,
16、所述超声处理的功率为50~100w,模式为7son/3soff,时间为5~15min;和/或,
17、所述滤膜的孔径为0.8~10μm;和/或,
18、所述正己烷与所述滤液的体积比为(1~3):4。
19、进一步地,本发明还提出一种用于种植中药材的营养液,包括生物纳米硒,所述生物纳米硒由如上所述的制备生物纳米硒的方法制得。
20、可选地,所述生物纳米硒在所述用于种植中药材的营养液中的浓度为5~15mmol/l。
21、更进一步地,本发明还提出一种种植中药材的方法,包括以下步骤:在中药材的种植培养期间,向中药材表面喷施如上所述的用于种植中药材的营养液。
22、此外,本发明还提供一种含硒污水的处理方法,包括以下步骤:使用如上所述的大洋芽孢杆菌处理含硒污水。
23、本发明提供的大洋芽孢杆菌oceanobacillus profundus a82筛选自湖北恩施的富硒土壤中,该菌株可以用于合成生物纳米硒,具有生产能力强、发酵时间短的优点,提供了一种安全、高效的合成生物纳米硒的方法;此外,该菌株可以用于处理含硒污水,该菌株合成的生物纳米硒可以用于种植中药材。
1.一种大洋芽孢杆菌,其特征在于,所述大洋芽孢杆菌为oceanobacillus profundusa82,保藏编号为cctcc no:m 20211530,保藏日期为2021年12月03日。
2.一种制备生物纳米硒的方法,其特征在于,包括以下步骤:使用大洋芽孢杆菌在含有亚硒酸钠的培养基中发酵培养,得到纳米硒;其中,所述大洋芽孢杆菌为如权利要求1所述的oceanobacillus profundus a82。
3.如权利要求2所述的制备生物纳米硒的方法,其特征在于,使用大洋芽孢杆菌在含有亚硒酸钠的培养基中发酵培养,得到纳米硒的步骤,包括:
4.如权利要求3所述的制备生物纳米硒的方法,其特征在于,将活化的大洋芽孢杆菌接种于发酵培养基中,向其中加入亚硒酸钠溶液,形成待培养物的步骤中:
5.如权利要求3所述的制备生物纳米硒的方法,其特征在于,将所述待培养物震荡培养,得发酵液的步骤中:
6.如权利要求3所述的制备生物纳米硒的方法,其特征在于,对所述发酵液进行离心后收集沉淀,向所述沉淀中加入液氮进行研磨,然后用双蒸水重新悬浮后超声处理,再用滤膜过滤,而后向滤液中加入正己烷,混合均匀后静置分层,分离下层水相,得生物纳米硒的步骤中:
7.一种用于种植中药材的营养液,其特征在于,包括生物纳米硒,所述生物纳米硒由如权利要求2至6中任意一项所述的制备生物纳米硒的方法制得。
8.如权利要求7所述的用于种植中药材的营养液,其特征在于,所述生物纳米硒在所述用于种植中药材的营养液中的浓度为5~15mmol/l。
9.一种种植中药材的方法,其特征在于,包括以下步骤:在中药材的种植培养期间,向中药材表面喷施如权利要求7至8中任意一项所述的用于种植中药材的营养液。
10.一种含硒污水的处理方法,其特征在于,包括以下步骤:使用如权利要求1所述的大洋芽孢杆菌处理含硒污水。