一株粪产碱杆菌DY-8在促进植物生长中的应用的制作方法

本发明属于农业微生物应用领域，具体涉及一株粪产碱杆菌dy-8在促进植物生长中的应用。

背景技术：

1、以植物根际促生菌(plant growth-promoting rhizobacteria，pgpr)为核心的微生物肥料是一类以微生物生命活动及其产物使农作物得到特定肥料效应的微生物活体制品。微生物通过固氮、解磷、产氨、分泌吲哚乙酸(iaa)、铁载体等作用促进植物养分吸收和生长发育，从而提高植物产量，如pseudomonas、bacillus、rhizobium等。

2、微生物肥料的特性使其可部分替代化学肥料，促进农业绿色可持续化发展。微生物具有物种资源丰富、功能多样、安全环保经济等特点，而微生物肥料开发利用的关键在于高效促生菌株的筛选，作为后续研制生物肥料的优质菌种资源。本发明粪产碱杆菌(alcaligenes faecalis)在生长过程中能产生一些碱性代谢物质，从而提高其生长环境ph值；此外，该菌具有产iaa、铁载体、氨、促进植物叶绿素合成等功能，在促植物生长方面具有较大潜力。

技术实现思路

1、本发明的主要目的是，针对现有技术存在的问题与不足，提供一株粪产碱杆菌dy-8应用于酸性土壤，在氮肥减量施用过程中，提升土壤ph值，缓解土壤酸化加剧，同时保障作物产量和质量，提升叶绿素含量。

2、本发明的目的是通过以下方式实现的。

3、一方面，本发明提供了粪产碱杆菌dy-8在提升植物叶绿素含量中的应用。

4、所述的粪产碱杆菌(alcaligenes faecalis)dy-8，保藏号为cctcc no：m2020786。

5、第二个方面，本发明还提供了粪产碱杆菌dy-8在促进植物生长中的应用。

6、所述的促进植物生长包括提高蔬菜产量。

7、第三个方面，本发明提供了所述的粪产碱杆菌dy-8在氮肥减施中的应用。

8、第四个方面，本发明提供了粪产碱杆菌dy-8在产iaa、铁载体、氨中的应用。

9、第五个方面，本发明还提供了粪产碱杆菌dy-8的发酵菌液的应用，即将所述的粪产碱杆菌dy-8制备成发酵菌液再应用于前述四个方面。

10、具体是将所述的菌株dy-8接种于营养肉汤(nb)培养基中，于25～35℃，转速170～180rpm，培养时间24～48h获得发酵液，发酵液有效活菌数为0.8～9.0×109cfu/ml，发酵液ph值为8.25～8.75之间，将菌液稀释后制成菌液，使有效活菌数为8.0～8.9×108cfu/ml，菌液ph值为8.00～8.75之间。

11、本发明提供的菌株dy-8分类命名为：粪产碱杆菌dy-8(alcaligenes faecalisdy-8)，保藏号为cctcc no：m2020786。于2020年11月27日保藏于中国典型培养物保藏中心(cctcc)，保藏地址为湖北省武汉市武汉大学。

12、所述的粪产碱杆菌(alcaligenes faecalis)dy-8是从湖南省湘潭市某酸性农田土壤中分离得到的，该菌株dy-8生长速度较快，在平板中呈现米黄色，菌表面呈迁徙状，在液体培养基中呈橘黄色，在初始ph 6～8，25～35℃范围内可快速生长。

13、将本发明菌株dy-8接种于营养肉汤(nb)培养基(胰蛋白胨10.0g/l,酵母浸粉5g/l，氯化钠10.0g/l，去离子水1000ml，其ph为7.0±0.1)中，于25～35℃，转速170～180rpm，培养时间24～48h获得发酵液，发酵液有效活菌数为0.8～9.0×109cfu/ml，发酵液ph值为8.25～8.75之间，将菌液稀释后制成菌液，使有效活菌数为8.0～8.9×108cfu/ml。

14、上述菌液为将粪产碱杆菌dy-8在微生物培养基中培养得到的物质，即发酵产物，包含粪产碱杆菌dy-8及粪产碱杆菌dy-8的代谢物。

15、上述制备好的菌液ph值为8.00～8.75之间。

16、依照蔬菜常规氮肥总用量及基肥和追肥用量，确定好氮肥减量比例及配施上述制备的粪产碱杆菌(alcaligenes faecalis)dy-8菌液的用量，将肥料在菌液中充分溶解后再进行穴施。本发明的粪产碱杆菌(alcaligenes faecalis)dy-8能有效缓解氮肥引起的土壤酸化，提升土壤ph值，并提高蔬菜的产量。

17、本发明提供的粪产碱杆菌(alcaligenes faecalis)dy-8从酸性稻田土壤中筛选分离获得，培养周期短，培养基成分简单，成本低，在稳定期培养基ph达到8.25～8.75。在氮肥减量配施所述菌株，不仅对施用氮肥引起的土壤酸化问题有显著的改良效果，使土壤ph值显著提高0.25～1.50个单位，还可以显著提高蔬菜产量，以及植物叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量，具有广阔的应用前景。

18、本发明利用粪产碱杆菌dy-8制成的菌剂，可以显著提高土壤环境ph值，并促进植物生长。由于其含有多种天然发酵活性物质，能够在根区土壤繁殖形成有利于作物生长的微生物优势菌群，改善和恢复土壤微生态平衡，可用来改善酸性土壤理化性质。本发明的粪产碱杆菌dy-8本发明改良酸性土壤和促进植物生长的机理是：①粪产碱杆菌dy-8可产生大量碱性代谢产物，能有效提升土壤ph值；②粪产碱杆菌dy-8能产生iaa、铁载体和氨等物质，促进植物生长，此外，还能够提升叶绿素含量。

技术特征：

1.一株粪产碱杆菌dy-8在提升植物叶绿素含量中的应用，所述的粪产碱杆菌(alcaligenes faecalis)dy-8，保藏号为cctcc no：m2020786。

2.一株粪产碱杆菌dy-8在促进植物生长中的应用，所述的粪产碱杆菌(alcaligenesfaecalis)dy-8，保藏号为cctcc no：m2020786。

3.根据权利要求2的应用，所述的促进植物生长，包括提高蔬菜产量。

4.一株粪产碱杆菌dy-8在氮肥减施中的应用，所述的粪产碱杆菌(alcaligenesfaecalis)dy-8，保藏号为cctcc no：m2020786。

5.一株粪产碱杆菌dy-8在产iaa、铁载体、氨中的应用，所述的粪产碱杆菌(alcaligenes faecalis)dy-8，保藏号为cctcc no：m2020786。

6.一种粪产碱杆菌dy-8的发酵菌液的应用，其特征在于，将权利要求1-5任一项所述的粪产碱杆菌dy-8制备成发酵菌液再应用于提升植物叶绿素含量、促进植物生长、氮肥减施、产iaa、产铁载体、产氨中至少一种。

7.根据权利要求6所述的应用，其特征在于，

技术总结
本发明公开了一株粪产碱杆菌DY‑8在促进植物生长中的应用，所述粪产碱杆菌(Alcaligenes faecalis)DY‑8菌种保藏号为CCTCC No：M2020786。氮肥减量配施所述菌株，不仅使土壤pH值显著提高0.25～1.50个单位，还可以显著提高植物产量以及植物叶绿素含量。所述菌株在减少氮肥施用、改良土壤酸化，尤其是促进植物生长和提升植物叶绿素含量方面具有广阔的应用前景。

技术研发人员：邓燕,蒋慧丹,陈希
受保护的技术使用者：湖南省农业生物技术研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/10/10