本发明属于合成生物学。具体涉及一种新的、具有促毛囊生长作用的重组人xvii型胶原蛋白、其制备方法及应用。
背景技术:
1、胶原蛋白是一种生物高分子蛋白,是动物结缔组织中的主要成分,广泛地分布在哺乳动物的皮肤、骨骼、肌腱、韧带、软骨和血管之中,它是结缔组织的主要蛋白成分,也是细胞外基质的重要组成成分。胶原蛋白与组织的形成、成熟、细胞间信息的传递以及关节润滑、伤口愈合、钙化作用、血液凝固和衰老等有着密切的关系,是生物科技产业最关键的原材料之一,在医学材料、化妆品、食品工业中均有广泛应用。
2、目前工业化使用的胶原蛋白主要是从动物皮肤、骨头、等组织中采用酸、碱性水解和酶水解的方法提取得到。其主要来源为动物组织,但从动物组织中提取的胶原蛋白存在动物源疾病等风险,同时大规模的制备会造成动物的需求量过大,供给侧的动物饲养造成巨大的压力。对于动物源疾病或者人传染疾病有交叉感染的风险。随着基因工程技术的日益成熟,采用分子生物学方法制备重组胶原蛋白逐渐替代了从动物组织中提取胶原蛋白的趋势。在原核或真核表达系统中生产的重组胶原蛋白具有比较好的细胞粘附性、组织相容性、皮肤透过性、稳定性、可促细胞形成和生长,与传统动物胶原蛋白相比较有其独特的优势。
3、与传统的动物胶原提取相比,基因工程重组制备胶原具备以下方面优势:1.生产的胶原种类繁多,可以是常见的牛、猪、鱼等来源的胶原蛋白,同样可以生产人源的胶原蛋白,在医疗器械等领域上具有更好的安全性及免疫优效性。2.可以有效的避免动物源疾病,重组胶原通常以简单的原核或者真核细胞为表达宿主,其细胞致病源由于与人的细胞结构差别巨大,不能相互传播。3.生产周期短,节约成本,可以快速放大,适于工业化大规模生产。与动物培养长动辄3-5个月相比,微生物培养周期仅需2、3天且培养简单,提供简单的c源、n源就能进行大规模培养,易于经行工业级的制备。因此重组胶原特别是重组人源胶原的制备是目前胶原生产研究的热点。
4、胶原蛋白在伤口愈合、器官发育和组织修复等方面扮演的重要角色,例如:美容整形用的医用胶原注射剂,烧伤、创伤治疗的胶原膜,创伤止血的胶原蛋白止血海绵等。同时胶原蛋白是皮肤细胞外基质的重要组成成分,具有保湿、补充皮肤胶原、抗衰老等方面的功效。基于胶原蛋白具有以上生物学功能,重组胶原蛋白在医药卫生领域(如止血、美容、药物传递、创伤修复、药物缓释等)有着广泛的应用。
技术实现思路
1、发明人在科研实践过程中筛选出了一个来源于天然人xvii型胶原蛋白的十二肽,该十二肽、以及由该十二肽的氨基酸序列多次重复构成的重组人xvii型胶原蛋白的促毛囊细胞生长活性明显高于发明人测试的同样来源于天然人xvii型胶原蛋白的其它十二肽和其它重组人xvii型胶原蛋白。
2、即,本发明包括:
3、1.一种具有促毛囊细胞生长活性的十二肽,其氨基酸序列如seq idno:1(slfsssissedi)所示。
4、2.一种重组人xvii型胶原蛋白,其由来自天然人xvii型胶原蛋白的短氨基酸序列作为重复单元进行多次重复而构成,其中,所述短氨基酸序列如seq id no:1(slfsssissedi)所示,重复次数为2次以上。
5、3.根据项2所述的重组人xvii型胶原蛋白,其中,重复次数为100次以下。
6、4.根据项2所述的重组人xvii型胶原蛋白,其中,重复次数为5~20次。
7、5.根据项2所述的重组人xvii型胶原蛋白,其中,重复次数为10~15次。例如可以为12次,其氨基酸序列如seq id no:2所示。
8、6.编码项2所述的重组人xvii型胶原蛋白的核酸。
9、7.包含项6所述的核酸的表达载体。
10、8.导入了项7所述的表达载体的宿主细胞。
11、9.根据项1所述的十二肽或根据项2所述的重组人xvii型胶原蛋白在制备用于防脱发、促生发或促毛囊细胞生长的化妆品中的用途。
12、10.根据项9所述的用途,其中,所述化妆品被制成适合施用于头皮的形式。例如可以为洗发水、洗发膏、洗发乳、洗发露。
1.一种具有促毛囊细胞生长活性的十二肽,其氨基酸序列如seq id no:1(slfsssissedi)所示。
2.一种重组人xvii型胶原蛋白,其由来自天然人xvii型胶原蛋白的短氨基酸序列作为重复单元进行多次重复而构成,其中,所述短氨基酸序列如seq id no:1(slfsssissedi)所示,重复次数为2次以上。
3.根据权利要求2所述的重组人xvii型胶原蛋白,其中,重复次数为100次以下。
4.根据权利要求2所述的重组人xvii型胶原蛋白,其中,重复次数为5~20次。
5.根据权利要求2所述的重组人xvii型胶原蛋白,其中,重复次数为10~15次,例如可以为12次,其氨基酸序列如seq id no:2所示。
6.编码权利要求2所述的重组人xvii型胶原蛋白的核酸。
7.包含权利要求6所述的核酸的表达载体。
8.导入了权利要求7所述的表达载体的宿主细胞。
9.根据权利要求1所述的十二肽或根据权利要求2所述的重组人xvii型胶原蛋白在制备用于防脱发、促生发或促毛囊细胞生长的化妆品中的用途。
10.根据权利要求9所述的用途,其中,所述化妆品被制成适合施用于头皮的形式,例如可以为洗发水、洗发膏、洗发乳、洗发露。