一种复合发酵菌剂及其在制备青贮饲料中的应用

本发明属于微生物发酵，具体涉及一种复合发酵菌剂及其在制备青贮饲料中的应用。

背景技术：

1、青贮饲料是将植物秸秆、青饲草料等经过切碎、密封、发酵而成，主要用于喂养反刍动物，其比新鲜饲料耐储存，且营养成分优于干饲料。植酸又称肌醇六磷酸，是植物组织中的一种含磷化合物，如在玉米秸秆中的含量高达2%。植酸有降低矿物元素的吸收和蛋白质的消化等抗营养作用，同时高磷粪便加重对环境的污染。为减少植酸的副作用，常在饲料中添加植酸酶。此外，青贮饲料在发酵过程中如控制不好发酵条件，常会造成风味不佳、适口性差，甚至青贮饲料腐败的问题。

技术实现思路

1、本发明的目的是解决现有技术的不足，提供一种复合发酵菌剂及其在制备青贮饲料中的应用，具体采用以下的技术方案：

2、本发明的第一方面，提供了一种复合发酵菌剂，其特征在于，由植物乳杆菌（ lactobacillus plantarum）r6、酿酒酵母（ saccharomyces cerevisiae）和枯草芽孢杆菌（ bacillus subtilis）组成；其中，所述植物乳杆菌r6已于2024年3月22日保藏于中国微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院，保藏编号为cgmcc no.30096。

3、上述酿酒酵母（ saccharomyces cerevisiae）和枯草芽孢杆菌（ bacillus  subtilis）均是购买于中国微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心，其中酿酒酵母已于1952年1月1日保藏于中国微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院，保藏编号为cgmcc no.2.216；所述枯草芽孢杆菌已于1972年3月1日保藏于中国微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院，保藏编号为cgmcc no.1.821。

4、本发明中提供的植物乳杆菌（ lactobacillus plantarum）r6是从羊瘤胃中分离得到，该菌株产亚油酸异构酶，其在mrs培养液中能将亚油酸转变成c9,t11-cla，发酵水平高达1 mg/ml。同时，该菌株高产植酸酶，能有效分解植酸，提高秸秆中矿物元素的消化吸收率。因此，本发明通过该菌株来发酵青贮饲料，利用其能在瘤胃定植的特性，提高瘤胃中植物乳杆菌r6的丰度，通过生物转化提高瘤胃中的cla含量，经代谢转运，显著提高牛肉中的cla含量，获得富含c9,t11-cla的牛肉，显著提高富硒秸秆中硒的利用率，获得富含硒的牛肉，满足消费者对营养健康的需求。

5、本发明的第二方面，提供了上述复合发酵菌剂的制备方法，包括以下步骤：

6、将植物乳杆菌r6菌种接入mrs培养液中，在37℃培养24 h得到植物乳杆菌r6菌液；

7、将酿酒酵母菌种接入麦芽汁培养液中，在25℃培养24 h，得到酿酒酵母菌液；

8、将枯草芽孢杆菌菌种接入营养肉汤培养液，在30℃培养24 h，得到枯草芽孢杆菌菌液；

9、将植物乳杆菌r6菌液、酿酒酵母菌液和枯草芽孢杆菌菌液按照体积比1:1:1混合得到复合发酵菌剂。

10、作为进一步优选的实施方式，上述植物乳杆菌r6菌液、酿酒酵母菌液和枯草芽孢杆菌菌液的菌体浓度为1×108cfu/ml。

11、本发明的第三方面，提供了上述复合发酵菌剂在发酵制备青贮饲料中的应用。

12、本发明的第四方面，提供了一种由上述复合发酵菌剂发酵得到的青贮饲料。

13、本发明的第五方面，还提供了上述青贮饲料的制备方法，包括以下步骤：

14、将上述复合发酵菌剂均匀喷洒在富硒玉米秸秆中，然后进行发酵直至ph小于4.2，即得到青贮饲料。

15、作为进一步优选的实施方式，上述富硒玉米秸秆为1 cm-3 cm的小段。

16、作为进一步优选的实施方式，上述复合发酵菌剂和富硒玉米秸秆的用量比为1:0.1%-1.0%。更优选地，复合发酵菌剂和富硒玉米秸秆的用量比为1:0.2%。

17、本发明的有益效果为：

18、（1）本发明的提供了一种复合发酵菌剂，其中植物乳杆菌r6是从羊瘤胃中分离得到，该菌株高产植酸酶，能有效分解植酸，提高秸秆中矿物元素的消化吸收率，通过该菌株来发酵青贮饲料，可显著降低青贮饲料中植酸的含量50%以上，提高秸秆中矿物元素的消化吸收率，其中硒的利用率提高了近55%。利用其能在瘤胃定植的特性，提高瘤胃中植物乳杆菌r6的丰度，通过生物转化提高瘤胃中的cla含量，经代谢转运，显著提高牛肉中的cla含量至23 mg/g脂肪以上，且c9,t11-cla的含量>75%，获得富含c9,t11-cla的牛肉，cla的产量高，c9,t11-cla异构体的纯度高，生产方法简单且成本低。

19、（2）本发明还提供了一种青贮饲料的制备方法，通过多菌种协同发酵，在酿酒酵母的作用下，提高了青贮饲料的酒香风味和适口性。在好气性枯草芽孢杆菌的作用下，迅速降低发酵初期饲料间隙中的空气，快速形成厌氧环境，促进厌氧发酵，有效避免异常发酵和腐败的发生。所选三株植物乳杆菌、酿酒酵母和枯草芽孢杆菌均是益生菌，能维持肠道菌群平衡，提高肉牛免疫力，促进饲料消化和营养吸收。

技术特征：

1.一种复合发酵菌剂，其特征在于，由植物乳杆菌（lactobacillus plantarum）r6、酿酒酵母（saccharomyces cerevisiae）和枯草芽孢杆菌（bacillus subtilis）组成；其中，所述植物乳杆菌r6已于2024年3月22日保藏于中国微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院，保藏编号为cgmcc no.30096。

2.根据权利要求1所述的复合发酵剂，其特征在于，所述酿酒酵母已于1952年1月1日保藏于中国微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院，保藏编号为cgmcc no.2.216；所述枯草芽孢杆菌已于1972年3月1日保藏于中国微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院，保藏编号为cgmcc no.1.821。

3.一种权利要求1-2任一项所述的复合发酵菌剂的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述植物乳杆菌r6菌液、酿酒酵母菌液和枯草芽孢杆菌菌液的菌体浓度为1×108cfu/ml。

5.权利要求1所述的复合发酵菌剂在发酵制备青贮饲料中的应用。

6.一种青贮饲料，其特征在于，由权利要求1所述的复合发酵剂发酵得到。

7.一种青贮饲料的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

8.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，富硒玉米秸秆为1 cm-3 cm的小段。

9.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，复合发酵菌剂和富硒玉米秸秆的用量比为1:0.1%-1.0%。

10.根据权利要求7所述的制备方法，其特征在于，复合发酵菌剂和富硒玉米秸秆的用量比为1:0.2%。

技术总结
本发明属于微生物发酵技术领域，具体涉及一种复合发酵菌剂及其在制备青贮饲料中的应用。该由植物乳杆菌R6、酿酒酵母和枯草芽孢杆菌组成；其中，所述植物乳杆菌R6已于2024年3月22日保藏于中国微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院，保藏编号为CGMCC No.30096。其中植物乳杆菌R6高产植酸酶，能有效分解植酸，提高秸秆中矿物元素的消化吸收率，通过该菌株来发酵青贮饲料，可显著降低青贮饲料中植酸的含量50%以上，提高秸秆中矿物元素的消化吸收率，其中硒的利用率提高了近55%，并能显著提高牛羊肉和奶中CLA的含量。

技术研发人员：刘晓华
受保护的技术使用者：南昌大学
技术研发日：
技术公布日：2024/10/10