本发明属于微生物发酵,具体涉及一种复合发酵菌剂及其在制备青贮饲料中的应用。
背景技术:
1、青贮饲料是将植物秸秆、青饲草料等经过切碎、密封、发酵而成,主要用于喂养反刍动物,其比新鲜饲料耐储存,且营养成分优于干饲料。植酸又称肌醇六磷酸,是植物组织中的一种含磷化合物,如在玉米秸秆中的含量高达2%。植酸有降低矿物元素的吸收和蛋白质的消化等抗营养作用,同时高磷粪便加重对环境的污染。为减少植酸的副作用,常在饲料中添加植酸酶。此外,青贮饲料在发酵过程中如控制不好发酵条件,常会造成风味不佳、适口性差,甚至青贮饲料腐败的问题。
技术实现思路
1、本发明的目的是解决现有技术的不足,提供一种复合发酵菌剂及其在制备青贮饲料中的应用,具体采用以下的技术方案:
2、本发明的第一方面,提供了一种复合发酵菌剂,其特征在于,由植物乳杆菌( lactobacillus plantarum)r6、酿酒酵母( saccharomyces cerevisiae)和枯草芽孢杆菌( bacillus subtilis)组成;其中,所述植物乳杆菌r6已于2024年3月22日保藏于中国微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心,地址为北京市朝阳区北辰西路1号院,保藏编号为cgmcc no.30096。
3、上述酿酒酵母( saccharomyces cerevisiae)和枯草芽孢杆菌( bacillus subtilis)均是购买于中国微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心,其中酿酒酵母已于1952年1月1日保藏于中国微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心,地址为北京市朝阳区北辰西路1号院,保藏编号为cgmcc no.2.216;所述枯草芽孢杆菌已于1972年3月1日保藏于中国微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心,地址为北京市朝阳区北辰西路1号院,保藏编号为cgmcc no.1.821。
4、本发明中提供的植物乳杆菌( lactobacillus plantarum)r6是从羊瘤胃中分离得到,该菌株产亚油酸异构酶,其在mrs培养液中能将亚油酸转变成c9,t11-cla,发酵水平高达1 mg/ml。同时,该菌株高产植酸酶,能有效分解植酸,提高秸秆中矿物元素的消化吸收率。因此,本发明通过该菌株来发酵青贮饲料,利用其能在瘤胃定植的特性,提高瘤胃中植物乳杆菌r6的丰度,通过生物转化提高瘤胃中的cla含量,经代谢转运,显著提高牛肉中的cla含量,获得富含c9,t11-cla的牛肉,显著提高富硒秸秆中硒的利用率,获得富含硒的牛肉,满足消费者对营养健康的需求。
5、本发明的第二方面,提供了上述复合发酵菌剂的制备方法,包括以下步骤:
6、将植物乳杆菌r6菌种接入mrs培养液中,在37℃培养24 h得到植物乳杆菌r6菌液;
7、将酿酒酵母菌种接入麦芽汁培养液中,在25℃培养24 h,得到酿酒酵母菌液;
8、将枯草芽孢杆菌菌种接入营养肉汤培养液,在30℃培养24 h,得到枯草芽孢杆菌菌液;
9、将植物乳杆菌r6菌液、酿酒酵母菌液和枯草芽孢杆菌菌液按照体积比1:1:1混合得到复合发酵菌剂。
10、作为进一步优选的实施方式,上述植物乳杆菌r6菌液、酿酒酵母菌液和枯草芽孢杆菌菌液的菌体浓度为1×108cfu/ml。
11、本发明的第三方面,提供了上述复合发酵菌剂在发酵制备青贮饲料中的应用。
12、本发明的第四方面,提供了一种由上述复合发酵菌剂发酵得到的青贮饲料。
13、本发明的第五方面,还提供了上述青贮饲料的制备方法,包括以下步骤:
14、将上述复合发酵菌剂均匀喷洒在富硒玉米秸秆中,然后进行发酵直至ph小于4.2,即得到青贮饲料。
15、作为进一步优选的实施方式,上述富硒玉米秸秆为1 cm-3 cm的小段。
16、作为进一步优选的实施方式,上述复合发酵菌剂和富硒玉米秸秆的用量比为1:0.1%-1.0%。更优选地,复合发酵菌剂和富硒玉米秸秆的用量比为1:0.2%。
17、本发明的有益效果为:
18、(1)本发明的提供了一种复合发酵菌剂,其中植物乳杆菌r6是从羊瘤胃中分离得到,该菌株高产植酸酶,能有效分解植酸,提高秸秆中矿物元素的消化吸收率,通过该菌株来发酵青贮饲料,可显著降低青贮饲料中植酸的含量50%以上,提高秸秆中矿物元素的消化吸收率,其中硒的利用率提高了近55%。利用其能在瘤胃定植的特性,提高瘤胃中植物乳杆菌r6的丰度,通过生物转化提高瘤胃中的cla含量,经代谢转运,显著提高牛肉中的cla含量至23 mg/g脂肪以上,且c9,t11-cla的含量>75%,获得富含c9,t11-cla的牛肉,cla的产量高,c9,t11-cla异构体的纯度高,生产方法简单且成本低。
19、(2)本发明还提供了一种青贮饲料的制备方法,通过多菌种协同发酵,在酿酒酵母的作用下,提高了青贮饲料的酒香风味和适口性。在好气性枯草芽孢杆菌的作用下,迅速降低发酵初期饲料间隙中的空气,快速形成厌氧环境,促进厌氧发酵,有效避免异常发酵和腐败的发生。所选三株植物乳杆菌、酿酒酵母和枯草芽孢杆菌均是益生菌,能维持肠道菌群平衡,提高肉牛免疫力,促进饲料消化和营养吸收。
1.一种复合发酵菌剂,其特征在于,由植物乳杆菌(lactobacillus plantarum)r6、酿酒酵母(saccharomyces cerevisiae)和枯草芽孢杆菌(bacillus subtilis)组成;其中,所述植物乳杆菌r6已于2024年3月22日保藏于中国微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心,地址为北京市朝阳区北辰西路1号院,保藏编号为cgmcc no.30096。
2.根据权利要求1所述的复合发酵剂,其特征在于,所述酿酒酵母已于1952年1月1日保藏于中国微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心,地址为北京市朝阳区北辰西路1号院,保藏编号为cgmcc no.2.216;所述枯草芽孢杆菌已于1972年3月1日保藏于中国微生物菌株保藏管理委员会普通微生物中心,地址为北京市朝阳区北辰西路1号院,保藏编号为cgmcc no.1.821。
3.一种权利要求1-2任一项所述的复合发酵菌剂的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
4.根据权利要求3所述的制备方法,其特征在于,所述植物乳杆菌r6菌液、酿酒酵母菌液和枯草芽孢杆菌菌液的菌体浓度为1×108cfu/ml。
5.权利要求1所述的复合发酵菌剂在发酵制备青贮饲料中的应用。
6.一种青贮饲料,其特征在于,由权利要求1所述的复合发酵剂发酵得到。
7.一种青贮饲料的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
8.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,富硒玉米秸秆为1 cm-3 cm的小段。
9.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,复合发酵菌剂和富硒玉米秸秆的用量比为1:0.1%-1.0%。
10.根据权利要求7所述的制备方法,其特征在于,复合发酵菌剂和富硒玉米秸秆的用量比为1:0.2%。