一种葫芦烷型三萜化合物及其提取方法与抗肝损伤应用

本发明涉及生物医药，具体涉及一种葫芦烷型三萜化合物及其提取方法与抗肝损伤应用。

背景技术：

1、肝内胆汁淤积（intrahepaic cholestasis，ic）是一种由于肝细胞或毛细胆管结构与功能障碍，导致胆汁酸在肝脏内蓄积，从而引发的肝脏病变的临床综合征。长期持续的ic将发展成原发性胆汁性肝硬化、原发性肝硬化性胆管炎、肝癌、肝衰竭等严重后果。现代医学认为，任何引起肝细胞和胆管细胞损害的因素均可能导致ic，常见病因包括病毒和细菌感染、药物损伤、自身免疫性疾病、酒精中毒等。

2、现代医学对于ic尚缺乏特异性髙、疗效好、副作用小的治疗药物，主要以综合治疗为主。临床常用药物主要包括熊去氧胆酸、糖皮质激素和s-腺苷蛋氨酸等。熊去氧胆酸可明显改善胆汁淤积，但其价格贵，且疗效较慢，部分患者对其应答不佳。糖皮质激素（如地塞米松等）被认为是治疗急性ic的传统药物之一，但是服用后易产生反跳现象，并且长期服用激素会产生严重的不良反应，对于重症ic不能长期使用。总的来说，西医对ic的治疗是以改善症状和控制相关并发症为主，临床上尚无特效药，且可选药物不多，漫长的治疗过程、昂贵的医疗费用以及治疗过程所伴发的不良反应给患者造成了严重的身心负担。因此亟需研发一种用于治疗ic的新型药物。

技术实现思路

1、本发明的目的在于提供一种葫芦烷型三萜化合物及其提取方法与应用，通过从长梗金腰内的有效成分进行提取分离，获得具有抗ic型肝损伤的活性物质，能够为治疗胆汁肝淤积型肝损伤相关疾病的药物研究和开发提供基础。

2、第一方面，本发明提供一种葫芦烷型三萜化合物，其结构式如式（i）所示：

3、。

4、第二方面，本发明提供了一种葫芦烷型三萜化合物的提取方法，所述葫芦烷型三萜化合物提取自长梗金腰全草。

5、可选地，包括以下步骤：

6、使用乙醇溶液对长梗金腰全草进行渗漉提取后浓缩制得浸膏，将浸膏再分散为分散液，使用石油醚对所述分散液进行萃取后获得萃余物，使用乙酸乙酯对所述萃余物进行萃取后，分离乙酸乙酯萃取物；

7、将乙酸乙酯萃取物上大孔吸附树脂柱，依次用蒸馏水、10%乙醇、20%乙醇、30%乙醇、40%乙醇、50%乙醇、60%乙醇、70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇梯度洗脱，获得十个流分并选取第七个流分为有效流分a；

8、将有效流分a上ods柱，在体积比(3-10)：(7-0)的甲醇-水溶剂系统进行梯度洗脱后，获得十个流分并选取第十个流分为有效流分b；

9、将有效流分b上硅胶柱，在体积比(15-1)：1的二氯甲烷-甲醇溶剂系统进行梯度洗脱后，获得五个流分并选取第三个流分为有效流分c，将有效流分c经制备色谱分离纯化制得葫芦烷型三萜化合物。

10、可选地，使用乙醇溶液对长梗金腰全草进行渗漉提取时，所述乙醇溶液中乙醇的体积分数为60-80%。

11、可选地，将浸膏再分散为分散液时，将浸膏与体积分数0-10%的乙醇溶液以混合比(2-3)kg：(1-4)l搅拌混合制得分散液。

12、可选地，使用石油醚对所述分散液进行萃取时，所述石油醚与所述分散液的体积比为1: (1-5)。

13、可选地，使用乙酸乙酯对所述萃余物进行萃取时，所述乙酸乙酯与所述萃余物的体积比为1: (1-5)。

14、可选地，使用蒸馏水、10%乙醇、20%乙醇、30%乙醇、40%乙醇、50%乙醇、60%乙醇、70%乙醇、80%乙醇、95%乙醇进行梯度洗脱时，每个梯度的洗脱体积为柱体积的3-6倍。

15、可选地，将乙酸乙酯萃取物上大孔吸附树脂柱时，所述大孔吸附树脂柱为hp-20大孔吸附树脂柱、d101大孔吸附树脂柱中的一种。

16、可选地，将有效流分c经制备色谱分离纯化时，所述制备色谱为反相ods hplc制备色谱。

17、可选地，使用乙醇溶液对长梗金腰全草进行渗漉提取时，预先将长梗金腰全草进行干燥粉碎处理。

18、可选地，将有效流分a上ods柱，在体积比(3-10)：(7-0)的甲醇-水溶剂系统进行梯度洗脱时，包括：将有效流分a上ods柱，在体积比分别为3:7、4:6、5:5、7:3、10:0的甲醇-水溶剂系统进行梯度洗脱。

19、可选地，将有效流分b上硅胶柱，在体积比(15-1)：1的二氯甲烷-甲醇溶剂系统进行梯度洗脱时，包括：将有效流分b上硅胶柱，在体积比15:1、10:1、5:1、3:1、1:1的二氯甲烷-甲醇溶剂系统进行梯度洗脱。

20、可选地，将有效流分c经制备色谱分离纯化制得葫芦烷型三萜化合物时，包括：将有效流分c上反相ods hplc制备色谱，在体积比1:1的乙腈-水溶剂系统进行洗脱后，制得葫芦烷型三萜化合物。

21、第三方面，本发明还提供了一种葫芦烷型三萜化合物在制备治疗/预防胆汁肝淤积型肝损伤药物中的应用。

22、可选地，所述胆汁肝淤积型肝损伤包括原发性胆汁性肝硬化、原发性肝硬化性胆管炎、病毒性肝炎、酒精或药物性肝损伤、妊娠期胆汁淤积症中的至少一种。

技术特征：

1.一种葫芦烷型三萜化合物，其特征在于，所述葫芦烷型三萜化合物的结构式如式（i）所示：

2.一种如权利要求1所述的葫芦烷型三萜化合物的提取方法，其特征在于，所述葫芦烷型三萜化合物提取自长梗金腰全草。

3.根据权利要求2所述的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

4.根据权利要求3所述的提取方法，其特征在于，使用乙醇溶液对长梗金腰全草进行渗漉提取时，所述乙醇溶液中乙醇的体积分数为60-80%；

5.根据权利要求3所述的提取方法，其特征在于，将有效流分a上ods柱，在体积比(3-10)：(7-0)的甲醇-水溶剂系统进行梯度洗脱时，包括：将有效流分a上ods柱，在体积比分别为3:7、4:6、5:5、7:3、10:0的甲醇-水溶剂系统进行梯度洗脱。

6.根据权利要求3所述的提取方法，其特征在于，将有效流分b上硅胶柱，在体积比(15-1)：1的二氯甲烷-甲醇溶剂系统进行梯度洗脱时，包括：将有效流分b上硅胶柱，在体积比15:1、10:1、5:1、3:1、1:1的二氯甲烷-甲醇溶剂系统进行梯度洗脱。

7.根据权利要求3所述的提取方法，其特征在于，将有效流分c经制备色谱分离纯化制得葫芦烷型三萜化合物时，包括：将有效流分c上反相ods hplc制备色谱，在体积比1:1的乙腈-水溶剂系统进行洗脱，制得葫芦烷型三萜化合物。

8.一种如权利要求1所述的葫芦烷型三萜化合物，或如权利要求2至7任一项所述提取方法所提取的葫芦烷型三萜化合物，在制备治疗/预防胆汁肝淤积型肝损伤药物中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于，所述胆汁肝淤积型肝损伤包括原发性胆汁性肝硬化、原发性肝硬化性胆管炎、病毒性肝炎、酒精或药物性肝损伤、妊娠期胆汁淤积症中的至少一种。

技术总结
本发明提供了一种葫芦烷型三萜化合物及其提取方法与抗肝损伤应用，涉及生物医药技术领域。本发明提供了一种葫芦烷型三萜化合物，该化合物在50μmol/L浓度条件下对利福平诱导的LO2细胞损伤具有显著保护作用，可进一步用于制备治疗/预防胆汁淤积型肝损伤疾病的药物。

技术研发人员：李文艳,蒋伟,任刚,王寅,钟文,邹雪艳,张雯,杨菲,蒲超伟,甘乐怀,娄永,勒觉么子各,彭婧雯
受保护的技术使用者：江西中医药大学
技术研发日：
技术公布日：2024/8/13